一、大鼠局部脑缺血再灌注后淀粉样前置蛋白基因的表达（论文文献综述）
薛玉英[1]（2021）在《MicroRNA-155对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用》文中指出背景:缺血性脑卒中指由各种原因的脑血管病变引起局部脑组织血液供应障碍发生缺血、缺氧性坏死,进而迅速出现相对应的神经功能缺损的一类临床综合征。目前治疗最有效的途径是及时恢复脑血流供应挽救缺血的脑组织。随着卒中患者闭塞血管的再通,不可避免的发生了脑缺血再灌注损伤,不少患者因之预后不良。研究表明脑缺血再灌注损伤可能与氧化、硝化应激、炎症反应、凋亡坏死及自噬等病理生理过程相关,其具体机制迄今未明。miRNAs是一组单链的非编码RNA分子,通过抑制m RNA的表达或翻译发挥调控目的基因的作用。miR-155作为miRNAs家族之一,与机体免疫细胞的发育分化、炎症反应、免疫应答等多种生物过程密切相关。我们前期的研究发现在SD大鼠脑缺血/再灌注模型中,miRNA-155在缺血侧脑组织中表达升高。近来发现在神经细胞氧糖剥夺/复氧复糖（OGD/R）处理后,miR-155表达水平明显升高,并通过靶向抑制GATA3的表达进而促进Caspase-3生成,加重细胞凋亡的发生。鉴于miR-155对炎症和凋亡的影响我们推测其可能是一个新的脑缺血性损伤治疗的靶点。因而本实验进一步探究干预miR-155的表达水平能否对脑缺血再灌注损伤产生保护作用,进而给脑缺血再灌注损伤的治疗提供可能的策略。方法:SD雄性大鼠随机分为5组:sham组、MCAO/R组、MCAO/R+LV miR-155组、MCAO/R+LV miR-155 Sponge组和MCAO/R+LV miR-155 Scrambled组。通过颅内立体定位注射miR-155和miR-155 Sponge干预miR-155的表达。7天后,制备大鼠脑缺血再灌注模型。再灌注24h时,分别计算各组存活率,并通过TTC染色、TUNEL染色评估脑梗死体积变化及凋亡细胞的变化情况。结果:（1）与MCAO/R组相比,MCAO/R+LV miR-155组的大鼠存活率降低,MCAO/R+LV miR-155 Sponge组大鼠存活率增加（P<0.05）。（2）与MCAO/R组相比,MCAO/R+LV miR-155组大脑梗死体积增大,而MCAO/R+LV miR-155 Sponge组大脑梗死体积减小（P<0.05）。（3）与MCAO/R组比,MCAO/R+LV miR-155组缺血半暗带区TUNEL阳性细胞增加,而MCAO/R+LV miR-155 Sponge组TUNEL阳性细胞减少（P<0.05）。结论:（1）在大鼠脑缺血再灌注模型中,抑制miR155的表达可以提高大鼠的存活率;（2）在大鼠脑缺血再灌注模型中,抑制miR155的表达可以减少大鼠脑梗死的体积,削弱细胞的凋亡。
张鹏飞[2]（2021）在《大鼠脑缺血后TDP-43变化及人参皂苷Rg1对其调节机制研究》文中研究表明[目 的]1.观察大鼠脑缺血后皮质区TDP-43的变化,探明其变化规律及机制;2.探究人参皂苷Rg1对脑缺血后TDP-43表达的调节作用及机制,为防治脑缺血提供理论基础。[方 法]本实验用SD雄性成年大鼠96只,随机分为Sham组、脑缺血（MCAO）组、生理盐水治疗（NS）组、人参皂苷Rg1治疗（Rg1）组四个大组,各大组再根据取材时间分为3d、7d和14d组（n=4）。经神经功能评价和MRI检测后,各组在相应时间点灌注取脑后,留取脑缺血皮质区脑组织,应用Western blot法检测TDP-43、p-ERK、p-JNK和p-p38蛋白的变化。运用QPCR检测TDP-43 mRNA的变化。运用免疫组织化学染色观察TDP-43的分布变化。应用IBM SPSS Statistics 25对数据进行单因素方差分析及两两比较,P<0.05时,差异就有统计学意义。[结 果]1.经Bederson神经功能缺失评分可见MCAO组神经功能缺失明显,Rg1组神经功能恢复更快;头颅核磁共振成像T2WI显示MCAO组出现明显的高信号影及脑肿胀,Rg1组较NS组减轻;2.采用Western blot、免疫组化和QPCR检测大鼠永久性脑缺血后缺血皮质区TDP-43变化如下:与Sham组相比,MCAO组和NS组各时间点TDP-43表达水平明显增加,有统计学意义（P<0.05）;与NS组相比,Rg1组在各时间点的TDP-43表达下降,具有统计学意义（P<0.05）。3.p-ERK变化如下:Western blot显示,与Sham组比较,MCAO组和NS组各时间点p-ERK蛋白表达降低,具有统计学意义（P<0.05）;与NS组相比,Rg1组p-ERK表达增加,具有统计学意义（P<0.05）。4.p-JNK变化如下:Western blot显示,与Sham组比较,MCAO组和NS组各时间点p-JNK蛋白表达上调,具有统计学意义（P<0.05）;与NS组相比,Rg1组p-JNK表达下调,具有统计学意义（P<0.05）。5.p-p38 变化如下:Western blot 显示,与 Sham 组比较,MCAO组和NS组各时间点p-p38蛋白表达明显增加,具有统计学意义（P<0.05）;与NS组相比,Rg1组p-p38表达明显降低,具有统计学意义（P<0.05）。[结 论]1.大鼠永久性脑缺血后的神经功能下降可能与TDP-43过度表达相关;2.人参皂苷Rg1可能通过下调TDP-43减轻永久性脑缺血所致的神经退变及神经功能障碍;3.人参皂苷Rg1可能经MAPK信号通路降低脑缺血后TDP-43的过表达。
王福星[3]（2021）在《青年缺血性脑卒中后海马齿状回神经分化及紫杉叶素干预缺血性脑卒中的作用及机制研究》文中研究说明第一章青年缺血性卒中后海马齿状回神经分化机制研究目的:观测缺血性卒中后青年及老年沙鼠神经功能康复、DG区细胞增殖、神经母细胞分化及神经再生差异,探讨青年缺血性卒中后神经再生的调节机制,为青年缺血性卒中提供治疗靶点。方法:实验设有青年与老年组,并利用沙鼠构建短暂性前脑缺血模型。通过Morris水迷宫及神经功能评分检测缺血性卒中后沙鼠神经、认知及运动功能康复情况;免疫组织化学染色观察缺血损伤后,海马CA1区神经元损伤、DG区细胞增殖、神经母细胞分化情况;免疫荧光NeuN/BrdU共定位检测神经元再生情况,Western blot检测Erk信号通路及自噬相关蛋白表达水平。并借用Erk抑制剂（U0126）及自噬抑制剂（3MA）观察青年缺血性卒中后DG区细胞增殖、神经母细胞分化及神经再生情况。结果:1.水迷宫及神经功能评分显示:缺血性卒中后,青年沙鼠认知及运动功能康复能力优于老年沙鼠。2.免疫组织化学结果显示:青年沙鼠DG区细胞增殖、神经母细胞分化及缺血·性卒中后28天DG区神经再生数量均显着高于老年沙鼠。3.Western blot结果显示:缺血性卒中后,青年沙鼠海马区Erk信号通路及自噬相关蛋白表达高于老年沙鼠。4.Erik或自噬抑制剂处理后,青年沙鼠认知、运动功能、神经母细胞分化、神经再生能力下降。结论:短暂性前脑缺血后,青年沙鼠通过调控Erk信号通路及自噬相关蛋白水平的表达促进细胞增殖、神经母细胞分化、神经再生,最终改善了认知功能缺失,促进了神经功能康复。第二章紫杉叶素抗缺血性卒中的保护作用及分子机制目的:研究紫杉叶素（Taxifolin,Tax）抗缺血性卒中损伤的保护作用及分子机制。方法:选取青年沙鼠和ICR小鼠随机分为假手术组（Sham）,模型（Isch）组,20mg/kg Tax+Isch组和40mg/kg Tax+Isch组。按照分组要求分别选取沙鼠通过双侧颈总动脉夹闭术构建短暂性前脑缺血模型,ICR小鼠通过大脑中动脉栓塞法构建局灶性缺血性卒中模型。采用CV染色对沙鼠海马CA1区细胞形态及数量进行评估。采用免疫组织化学染色观察小鼠及沙鼠NeuN、Iba1、GFAP、ZO-1、PECAM-1、DCX。采用Western Blot法观察Erk和Nrf2信号通路相关蛋白表达情况。结果:1.Tax干预明显改善了青年沙鼠前脑缺血性卒中后神经功能康复,减少海马CA1区神经元死亡,促进了 DG区神经分化;同时抑制胶质细胞的活化;增强了 ZO-1、PECAM-1的免疫表达;Tax处理明显提高缺血性卒中后海马区Erk信号通路的蛋白表达。2.Tax处理组明显减轻ICR小鼠局灶性脑缺血性卒中后神经损伤症状、减少脑梗死体积及减少海马CA1区及皮质区神经元死亡;同时抑制星形胶质细胞及小胶质细胞的活化;并且Tax处理明显提高半暗带Nrf2和HO-1的蛋白表达,减轻了缺血再灌注损伤诱导的凋亡。结论:1.Tax显着改善了前脑及局灶性脑卒中所致的神经元死亡,神经功能缺失;2.Tax显着降低了前脑及局灶性脑卒中后胶质细胞的活化;3.Tax显着改善前脑性脑卒中所致血脑屏障损伤且激活了 Erk信号通路关键蛋白的表达与其保护作用密切相关;4.Tax在局灶性脑卒中后通过激活Nrf2信号通路发挥了神经保护作用。
瞿源[4]（2021）在《脂多糖诱导小鼠形成免疫耐受后对缺血性脑中风的影响》文中指出小胶质细胞作为中枢神经系统的常驻固有免疫细胞,在脑中风发生过程中起着不可或缺的作用。目前最新研究报道指出,小胶质细胞可被诱导形成免疫耐受。然而,脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导小鼠形成免疫耐受后对缺血性脑中风的影响,以及处于耐受状态下小胶质细胞糖酵解与氧化磷酸化水平的变化尚不清楚。在本实验中,我们首先通过腹腔注射的方式连续4天向小鼠体内注射0.5mg/kg的LPS构建LPS诱导的免疫耐受模型。在小鼠建立免疫耐受后的第4天,我们采用化学光敏剂Rose bengal对耐受后的小鼠构建了急性缺血性脑中风模型,同时应用Nissl染色法、Fluoro-Jade C染色法和免疫荧光染色法分别对梗死体积、退行性神经元以及细胞因子的变化进行检测。在体外实验中,我们通过培养原代小胶质细胞以及BV-2细胞,来检测LPS诱导小胶质细胞形成免疫耐受后对小胶质细胞迁移、吞噬、炎症和增殖的影响。与此同时,我们对免疫耐受处理后的小胶质细胞进行氧糖剥夺再灌注,同样观察小胶质细胞迁移、吞噬、炎症和增殖的影响。最后,我们分别应用D-2-脱氧葡萄糖（2-DG）以及干扰素-γ（IFN-γ）来调节处于耐受状态小胶质细胞的糖酵解以及氧化磷酸,以此探究小胶质细胞免疫耐受与代谢水平变化之间的关系。实验研究结果发现,在体内LPS诱导的免疫耐受降低了中风后小鼠梗死体积、退行性神经元数量、小胶质细胞的激活数量以及促炎因子的表达,但增强了抑炎因子的表达。在体外实验中,LPS诱导的小胶质细胞免疫耐受,使得小胶质细胞迁移能力、促炎因子的表达、细胞增殖以及细胞吞噬能力降低。在氧糖剥夺再灌注过程中处于免疫耐受状态的小胶质细胞迁移能力、促炎因子的表达和细胞增殖水平仍处于抑制状态,但吞噬能力在氧糖剥夺再灌注后却显着上升。最后,通过2-DG和IFN-γ分别抑制糖酵解以及增强氧化磷酸化,发现促炎因子表达上调、细胞迁移能力上升、细胞增殖水平上调以及吞噬能力下降,以上现象表明LPS诱导的小胶质细胞免疫耐受被打破。以上结果表明,LPS诱导的免疫耐受可以减轻缺血性脑中风带来的损伤,这可能与小胶质细胞免疫功能的改变息息相关,而抑制糖酵解或增强氧化磷酸化可以打破小胶质细胞的免疫耐受状态。这些结果为小胶质细胞代谢状态与免疫功能间关系的研究提供新的见解,并为缺血性脑中风的治疗提供新的思路。
杨超[5]（2020）在《基于炎症反应、氧化应激、miRNA-124/BACE1/Aβ通路探讨涤痰汤治疗血管性痴呆模型大鼠的作用机制》文中认为研究目的:血管性痴呆（vascular dementia,VD）是指由缺血性卒中、出血性卒中和造成记忆、认知和行为等脑区低灌注的脑血管疾病所致的严重认知功能障碍综合征。VD的发病机制与炎症反应、氧化应激、Aβ异常沉积等多个病理机制有关,涤痰汤是临床治疗痴呆的经典方剂,可有效改善VD患者的认知功能障碍。涤痰汤属于中药复方,治疗疾病具有多途径、多基因、多靶点的优势。本试验拟通过改良双侧颈总动脉永久阻断法（2-VO）制备VD大鼠模型,对VD大鼠行为及记忆能力、海马组织HE染色、氧化应激、炎症反应及mi RNA-124/BACE1/Aβ信号通路等多方面进行研究,多角度多层次探讨涤痰汤治疗VD的作用机制。研究方法:一理论探讨:从中医基础理论探讨VD的病因、病机、治则、治法和方药,提出痰浊阻窍是VD发生认知障碍的病机中心环节,从临床研究以及中药成分研究分析涤痰汤治疗VD的可行性。二动物实验:1.SPF级Wistar大鼠50只适应性饲养1周后开始实验,随机分为5组,即假手术组、模型组、涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组、盐酸多奈哌齐组,每组10只。通过改良双侧颈总动脉永久阻断法（2-VO）制备VD大鼠模型,每组大鼠给与相应干预措施,2.采用Morris水迷宫实验观察VD大鼠认知功能的改变,通过HE染色用光学显微镜观察大鼠海马组织形态学变化,探讨涤痰汤对VD大鼠认知功能障碍以及海马组织病理损伤的治疗作用。3.通过免疫组化法检测NOX2蛋白表达,Western blot法检测海马组织HO-1蛋白表达,生化方法检测海马组织ROS、GSH含量检测,来探讨涤痰汤对VD大鼠氧化应激损伤的影响。4.通过免疫组化法检测NF-кB的表达,Western blot法检测海马组织TNF-α蛋白表达,ELISA检测海马组织IL-1β、IL-10含量,探讨涤痰汤对VD大鼠炎症反应的影响。5.通过PCR检测海马组织中mi R-124的表达,western blot法检测海马组织中BACE1的表达,免疫组化法检测海马组织中Aβ的表达,探讨涤痰汤基于mi RNA-124/BACE1/Aβ通路对VD模型大鼠的治疗作用。研究结果:1.定位航行实验结果:与假手术组比较,VD模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长（P<0.01）。与模型组比较,涤痰汤高剂量组的逃避潜伏期明显缩短（P<0.01）,西药组及涤痰汤低剂量组的逃避潜伏期缩短（P<0.05）。与西药组比较,涤痰汤高剂量组的逃避潜伏期缩短（P<0.05）,涤痰汤低剂量组的逃避潜伏期无明显差异（P>0.05）。2.空间探索实验结果:与假手术组比较,模型组大鼠穿越原平台次数及停留时间明显缩短（P<0.01）。与模型组比较,涤痰汤高剂量组（P<0.01）和涤痰汤低剂量组（P<0.05）大鼠穿越原平台次数及停留时间明显增加,西药组穿越原平台次数及停留时间也明显增加（P<0.05）。与西药组比较,涤痰汤高剂量组穿越原平台次数及停留时间均明显增加（P<0.05）,而涤痰汤低剂量组的穿越原平台次数及停留时间无明显差异（P>0.05）。3.HE染色:光镜下各组大鼠海马形态学观察与比较结果如下:假手术组大鼠海马CA1区锥体细胞形态规则而饱满、细胞数量多、边界清晰、层次分明、排列整齐而紧密、染色均匀,细胞核较大,呈类圆形,着色均匀,核仁清楚,细胞质丰富。模型组大鼠海马CA1区锥体细胞形态不规则、细胞边界模糊、排列紊乱而疏松,正常细胞数量减少,可见坏死的神经元,细胞膜、核膜不清晰,细胞核形态不规则,着色变浅,核仁固缩、深染,胞浆浑浊。涤痰汤高剂量组,涤痰汤低剂量组以及西药组的大鼠海马CA1区锥体细胞,与模型组比较,细胞形态规则、边界清晰、层次分明、排列整齐,正常细胞数量明显增多,坏死的神经元少,细胞核形态规则,核膜及核仁清楚,细胞质丰富。其中涤痰汤高剂量组在海马病理学改变上优于涤痰汤低剂量组和西药组。4.海马组织中NOX2的表达情况:与假手术组比较,VD模型组NOX2蛋白相对表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组以及西药组NOX2蛋白相对表达量降低（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组相比,涤痰汤高剂量组NOX2蛋白相对表达量明显降低（P<0.05）,西药组与涤痰汤低剂量组NOX2蛋白相对表达量的差异不具有统计学意义（P>0.05）。5.海马组织中HO-1蛋白表达情况:与假手术组比较,VD模型组HO-1蛋白相对表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组以及西药组HO-1蛋白相对表达量均有增高（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组相比,涤痰汤高剂量组HO-1蛋白相对表达量增高（P<0.05）,西药组与涤痰汤低剂量组HO-1蛋白相对表达量的差异不具有统计学意义（P>0.05）。6.海马组织ROS含量:与假手术组比较,VD模型组ROS表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组以及西药组ROS表达量降低（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组相比,涤痰汤高剂量组ROS表达量明显降低（P<0.05）,西药组与涤痰汤低剂量组ROS表达量的差异不具有统计学意义（P>0.05）。7.海马组织GSH含量:与假手术组比较,VD模型组GSH表达量明显降低（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组以及西药组GSH表达量升高（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组相比,涤痰汤高剂量组GSH表达量明显升高（P<0.05）,西药组与涤痰汤低剂量组GSH表达量的差异不具有统计学意义（P>0.05）。8.海马组织中NF-кB的表达结果:与假手术组相比,VD模型组NF-кB表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组及西药组NF-кB表达量均下降（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组比较,涤痰汤高剂量组NF-кB表达量下降（P<0.05）。涤痰汤低剂量与西药组之间差异无统计学意义（P>0.05）9.海马组织TNF-α表达水平:与假手术组相比,VD模型组TNF-α表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组及西药组TNF-α表达量均下降（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组比较,涤痰汤高剂量组TNF-α表达量下降（P<0.05）。涤痰汤低剂量与西药组之间差异无统计学意义。（P>0.05）10.海马组织IL-1β含量检测结果比较:与假手术组相比,VD模型组IL-1β表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组及西药组IL-1β表达量均下降（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组比较,涤痰汤高剂量组IL-1β表达量下降（P<0.05）。涤痰汤低剂量与西药组之间差异无统计学意义。（P>0.05）11.海马组织IL-10含量检测结果比较:与假手术组相比,VD模型组IL-10表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组及西药组IL-10表达量均增高（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组比较,涤痰汤高剂量组IL-1β表达量增高（P<0.05）。涤痰汤低剂量与西药组之间差异无统计学意义（P>0.05）12.海马组织中mi R-124的表达情况:与假手术组比较,VD模型组mi R-124表达量明显降低（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组以及西药组mi R-124表达量升高（P<0.01）;与西药组相比,涤痰汤高剂量组mi R-124表达量的差异不具有统计学意义（P>0.05）,西药组与涤痰汤低剂量组mi R-124表达量的差异具有统计学意义（P<0.05）。13.海马组织中BACE1的表达情况:与假手术组比较,VD模型组BACE1表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组以及西药组BACE1表达量降低（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组相比,涤痰汤高剂量组BACE1表达量明显降低（P<0.05）,西药组与涤痰汤低剂量组BACE1表达量的差异不具有统计学意义。（P>0.05）14.海马组织中Aβ的表达情况:与假手术组比较,VD模型组Aβ表达量明显增高（P<0.01）;与模型组比较,涤痰汤高剂量组、涤痰汤低剂量组以及西药组Aβ表达量降低（P<0.01,P<0.05,P<0.05）;与西药组相比,涤痰汤高剂量组Aβ表达量明显降低（P<0.05）,西药组与涤痰汤低剂量组Aβ表达量的差异不具有统计学意义（P>0.05）。研究结论:1.涤痰汤能显着改善VD模型大鼠的学习记忆能力和空间探索能力以及海马组织的病理损伤,以涤痰汤高剂量组治疗效果最为显着。2.涤痰汤可以通过抑制NOX2蛋白表达,促进海马组织HO-1蛋白表达,减少海马组织ROS的含量,增加GSH含量来缓解VD大鼠氧化应激损伤。其中以涤痰汤高剂量组治疗效果最为显着。3.涤痰汤可以抑制NF-кB,TNF-α,IL-1β的表达,促进IL-10的表达缓解VD大鼠的炎症反应。其中以涤痰汤高剂量组治疗效果最为显着。4.涤痰汤可以通过促进mi RNA-124的产生,从而抑制BACE1/Aβ发挥对VD大鼠的治疗作用。其中以涤痰汤高剂量组治疗效果最为显着。
张洁[6]（2020）在《基于网络药理学的洋川芎内酯H治疗缺血性脑卒中的作用机制研究》文中指出背景及目的:缺血性脑卒中（Cerebral ischemic stroke,CIS）属于中医中风范畴,具有发病率、致死率、致残率、复发率均高的四大特点,是严重威胁人类生命和健康的疾病之一。现有研究表明,洋川芎内酯类化合物是中药川芎中主要活性成分及代谢成分,具有抗氧化损伤、抗炎、抗凝及抗血小板聚集、舒张血管、细胞毒等药理作用。洋川芎内酯H（Senkyunolide-H,SEH）为洋川芎内酯类,具有很好的脂溶性和水溶性,能够迅速进入血液和脑脊液,但对其抗脑缺血的药理作用报道较少,尚未见其在保护脑缺血再灌注（ischemia reperfusion,I/R）损伤组织方面具有活性的报道。因此,本研究旨在通过网络药理学和体内外实验的方法预测和明确SEH抗脑I/R损伤的作用及其作用机制,为中药治疗CIS的开发提供创新思路。方法:1.网络药理学预测SEH干预治疗CIS的作用靶点和机制。通过PharmMapper服务器预测SEH作用靶点,OMIM数据库、DisGeNET数据库获取CIS相关靶点;利用Cytoscape 3.5.1软件分别构建SEH和CIS相关靶点蛋白相互作用网络,并进行网络合并及拓扑参数分析筛选出SEH治疗CIS的关键靶标;通过DAVID和KEGG数据库对关键靶标进行基因本体（Gene ontology,GO）功能富集分析和通路分析。2.体内实验验证SEH干预保护脑I/R损伤的作用及其机制。将140只雄性ICR小鼠（8周龄）随机分为5组（每组n=28）,即假手术组、SEH+假手术组（40mg/kg）、模型组、低剂量SEH组（20mg/kg）、高剂量SEH组（40mg/kg）。制作小鼠大脑中动脉闭塞再灌注（MCAO/R）模型,并于术后0、6、24小时（每组n=14;7只动物用于组织学分析,7只动物用于生化分析）颈椎脱臼法处死小鼠,取脑备用;利用神经行为学评分及TTC染色比较各组小鼠神经功能和梗死体积的差异;利用免疫组化实验检测小鼠缺血侧海马CA1区NeuN标记的神经元核抗原的变化;利用蛋白印迹法测定小鼠缺血半暗带区 PI3K、p-PI3K p85（Tyr458）、Akt、p1Akt（Ser473）、NF-κB、Bcl-XL、Cleaved-Caspase3的蛋白表达。3.体外实验验证SEH干预保护脑I/R损伤的作用及其机制。构建PC12细胞氧糖剥夺再灌注（OGD/R）模型,加入不同浓度的SEH（25,50,100μM）,同时设立正常对照组、不给药模型组、抑制剂给药组（LY29400210μM）;利用CCK-8法检测细胞活性;采用蛋白印迹法观察各组目的蛋白的表达量。结果:1.网络药理学研究获得SEH治疗CIS的62个关键靶标;GO分析显示此62个关键靶标主要富集在核染色质、转录因子复合物、受体复合物、细胞贴壁连接、核体和基底外侧质膜等细胞成分中,具有结合转录因子、受损DNA、蛋白磷酸酶、转录调控区DNA、肾上腺素受体、ATP、胰岛素受体、以及调节一氧化氮合酶、激酶、蛋白酪氨酸激酶和细胞增殖等分子功能,主要参与调控RNA聚合酶Ⅱ启动子转录、DNA模板转录、NF-κB转录因子、蛋白质自磷酸化、表皮生长因子受体和磷酯酰肌醇介导的信号传导途径等生物过程;KEGG分析显示SEH治疗CIS可能通过PI3K/Akt、ErbB、FOXO和神经营养素等信号通路,其中,PI3K/Akt信号通路的调控可能是关键机制之一（均p<0.05）。2.体内实验显示,与MCAO模型组相比,SEH给药组神经功能评分明显降低,梗死体积明显减少;随着缺血再灌注时间的延长,缺血侧海马CA1区NeuN的数量逐渐减少,但SEH给药组NeuN的免疫表达都明显比MCAO模型组高;随着缺血再灌注时间的延长,缺血半暗带区Bcl-XL蛋白水平和p-PI3K p85/PI3K及p-Akt（Ser 473）/Akt蛋白水平比值都逐渐降低,而SEH给药组蛋白水平及比值都较模型组升高;另外,模型组Cleaved-Caspase3和NF-κB蛋白表达随着再灌注时间延长而增加,但SEH给药组Cleaved-Caspase3和NF-κB蛋白表达随着再灌注时间延长而减少（均p<0.05）;相比之下,SEH给药假手术组与正常假手术组均无明显差异（均p>0.05）。3.体外CCK-8实验显示与正常对照组相比,OGD组的细胞活力明显降低,但在50及100μM SEH处理的OGD/R组中,其细胞活性随着SEH浓度的增加而逐渐增加,且在100μM SEH干预时升高最明显,而与单独的SEH治疗组相比,10μMLY294002干预后细胞活力显着降低;免疫印迹结果显示OGD/R构建后,细胞Bcl-XL蛋白表达和p-PI3K p85/PI3K及p-Akt（Ser 473）/Akt蛋白水平比值都明显降低,Cleaved-Caspase3和NF-κB蛋白水平升高,而100μM SEH干预组显着提高了 Bcl-XL蛋白表达和p-PI3K p85/PI3K及p-Akt（Ser 473）/Akt蛋白水平比值,并降低了 Cleaved-Caspase3 和 NF-κB 蛋白水平,但 100μM SEH 的作用都被 10μM LY294002抑制（均p<0.05）。结论:1.SEH通过多靶点、多途径发挥治疗CIS的作用,其中PI3K/Akt信号通路可能是SEH治疗CIS的关键机制之一。2.SEH可改善MCAO/R小鼠神经功能,降低MCAO/R诱导的小鼠脑梗死体积,减少脑组织中细胞凋亡。3.SEH可提高OGD/R PC12细胞的活性,抑制OGD/R诱导的PC12细胞凋亡。4.SEH通过调控PI3K/Akt/NF-κB通路减少细胞凋亡发挥保护脑缺血再灌注损伤的作用。
胡玲[7]（2020）在《探讨生物信息学筛选的miR216/124靶向CADM2对小鼠再灌注脑损伤细胞凋亡的作用》文中认为背景:缺血性脑卒中是最常见的死亡和致残原因之一,作为严重威胁人们生命安全和生活质量的疾病,该疾病不仅给家庭带来沉重的负担,社会医疗资源也面临严峻的考验。流行病学的调查研究发现该疾病不仅发病率越来越高,而且呈现越来越低龄化的趋势。临床上对于错过溶栓治疗时间窗的该类疾病患者尚无有效精准的治疗策略。因此,深入研究脑卒中发生发展的机制解决临床问题已经成为神经学科亟待解决的重要课题。近年来,随着对该疾病研究的不断深入,miRNA与脑卒中疾病的相关性逐渐被人们认识。在人类基因中,三分之一的基因表达均受到各物种间具有高度保守性miRNA的调控而参与人体重要的生物调节过程如增殖分化,自噬凋亡等。并且,miRNA在脊椎动物中有一半与其他物种还具有同源性。这些特点为挖掘miRNA与疾病之间的关联性提供了基础,而且快速发展的高通量芯片技术为我们在基因组水平研究与疾病相关的分子机制提供了可能性。鉴于此,我们推断（1）鉴于miRNA在细胞内具有广泛的生物学功能,建模的多条miRNAs共同作用在脑卒中损伤级联中必有重要作用,通过研究缺血性脑卒中多条miRNAs的联合功能,开启了研究脑卒中损伤机制的新方式;（2）筛选小鼠脑缺血模型组中半影区与对照组大脑相同部位miRNA的表达谱,借助生物信息学技术进行数据建模并挖掘出脑缺血相关的特异性表达的miRNAs具有可行性;（3）通过构建miRNAs/mRNA共表达网络、基因位点GO分析和KEGG通路分析及双荧光素酶报告实验系统探讨脑组织缺血区差异表达的基因在脑卒中的机制为发现新的治疗靶点奠定理论基础。目的:本研究利用芯片大数据和先进的数据处理分析方法来建立可靠的脑卒中相关的miRNAs（miR-124/miR-216）关联模型,在此基础上利用生物信息学技术进行系统分析并探讨miRNAs联合体和靶基因的功能定位及与脑卒中发生发展的关联意义;同时运用分子生物学、细胞生物学等技术手段在分子水平、细胞水平、动物水平上揭示mi R-216、miR-124与CADM2之间的相互作用及分子机制,并探索两者之间的相互关系在脑卒中发生发展中的调控作用,进一步完善脑卒中发生发展的分子机制,为临床上脑卒中的防治提供新的治疗靶标。方法:1.第一部分下载GEO数据库中脑缺血再灌注损伤小鼠的miRNAs的芯片数据并对数据进行分析整理;运用Weka软件筛选获得的差异表达基因并构建意义miRNAs协同调控脑卒中进展相关的数据模型;应用生物信息软件挖掘miRNAs的靶基因并采用荧光素酶报告实验验证miRNAs与靶基因的关系。2.第二部分体外构建OGD模型;转染miRNAs的激动剂和抑制剂至各实验组并用CCK-8实验、流式细胞分析技术、基质胶成管实验、PCR法及Western blot检测并分析生物学效应。3.第三部分构建小鼠的MCAO模型获取最佳造模时间;构建慢病毒;利用miRNAs的慢病毒处理各实验组同时进行神经功能评分,TTC,Tunel法,PCR法及Western blot法分别检测及分析细胞凋亡率及基因和蛋白表达等相关生物学效应。结果:1.通过基因芯片数据分析处理获得包括miR-216和miR-124在内的30条与小鼠缺血再灌注损伤相关的差异表达miRNAs;通过体外建模挖掘与脑卒中疾病相关的目标miRNAs（miR-124/miR-216）及潜在作用的共同靶基因CADM2,并且进行了潜在的作用通路和功能分析发现目标miRNAs（miR-124/miR-216）调控靶基因CADM2可能影响脑卒中的进展过程。2.采用小鼠N2a细胞行氧糖剥夺（OGD）处理,在此基础上分别转染和共转染外源性miR-216与miR-124的激动剂和抑制剂予各组检测细胞存活率、细胞凋亡率、成管能力以及相关凋亡通路蛋白表达的表达情况。我们发现mi R-216与miR-124的高表达能增加细胞的存活率,抑制细胞凋亡的发生;当共转染miR-216与miR-124的激动剂后能更显着抑制与脑卒中模型细胞关系密切细胞的凋亡。3.成功构建慢病毒后,基于MCAO模型并转染过表达miR-216/miR-124的慢病毒载体,我们发现转染过表达病毒的小鼠神经功能评分较好,凋亡较少,过表达miR-216/124的小鼠靶基因CADM2降低明显,差异有统计学意义。结论:通过公共数据库的数据挖掘和分析获知30条miRNAs与小鼠缺血再灌注损伤相关的差异表达miRNAs。在此基础上用生物软件建模获悉到意义模型miR-124/miR-216协同调控脑卒中的进展过程,其调控的机制可能与共同靶基因CADM2启动凋亡信号通路相关。从细胞实验和动物实验我们进一步论证发现miR-216/miR-124联合体协同参与调控缺血再灌注小鼠的神经细胞功能,其机制为miR-216/miR-124协同负性调控CADM2使其激活PI3K-Akt信号通路,启动了内源性保护机制改善神经细胞的凋亡,从而达到保护神经细胞的作用。在这里,我们首次利用大数据挖掘和建模发现miRNA-216与miRNA-124能作为脑卒中进展相关的分子标志物模型协同调控其病理过程,并揭示了miRNA-216与miRNA-124以及CADM2之间构成的新的调控脑卒中的分子网络。通过三者的相互作用激活PI3K-Akt信号通路进而启动内源性的脑保护作用,miR-216/miR-124/CADM2/PI3K-Akt信号通路的揭示均是本研究的创新。
张宝瑜[8]（2020）在《基于GluN2B/m-Calpain/p38 MAPK路径研究电针预处理对脑缺血再灌注大鼠的神经保护机制》文中指出目的:以SD大鼠实验性大脑中动脉梗死再灌注为损伤模型,基于谷氨酸诱导神经元兴奋毒性损伤的分子生物学路径,探讨电针预处理脑保护作用的机制,为针刺防治脑血管病提供依据。方法:构建SD大鼠MCAO/R大脑中动脉梗死再灌注模型,大脑中动脉梗阻缺血90min后恢复灌注。分为假手术组、模型组、电针预处理组进行比较。末次干预后2h进行造模,造模后24h通过Garcia行为学评分评价大鼠神经运动机能、TTC染色评价脑梗死体积以及TUNEL阳性神经细胞染色计数评价各组脑细胞的保护效应。通过液相色谱-质谱联用技术测定胞外谷氨酸浓度。通过Western Blot和免疫荧光双标染色观察海马GluN2B、m-Calpain、p38 MAPK蛋白表达情况。结果:1.大鼠脑缺血再灌注损伤后,Garcia神经行为学评分显着降低（P<0.001）,电针预处理能显着改善大鼠脑缺血再灌注损伤的神经行为学表现（P<0.01）。TTC染色提示缺血再灌注损伤后,大鼠大脑出现明显的梗死灶（P<0.001）,而电针预处理组的大鼠脑梗死体积百分比较单纯缺血再灌注损伤的大鼠有所减少（P<0.001）。脑缺血后,大鼠海马CA1区细胞凋亡较假手术组增加（P<0.05）,与单纯缺血再灌注模型大鼠相较,电针预处理能够显着减少海马CA1区TUNEL阳性细胞的数量（P<0.001）。2.液相色谱-质谱联用技术检测海马神经元胞外谷氨酸浓度,发现大鼠脑缺血再灌注损伤后,胞外谷氨酸浓度升高,而电针预处理组胞外谷氨酸浓度较单纯缺血再灌注损伤的大鼠有下降趋势,但差异无统计学意义。3.Western Blot和免疫荧光双标染色检测电针预处理对GluN2B受体的调控作用,发现脑缺血再灌注损伤后海马GluN2B表达升高（P<0.001）,且海马CA1区GluN2B/NeuN共定位细胞增多;相比于单纯缺血再灌注损伤大鼠,电针预处理降低海马GluN2B表达（P<0.01）,并减少海马CA1区GluN2B/NeuN共定位细胞。4.Western Blot和免疫荧光染色检测海马神经元m-Calpain的表达及电针的调控作用,发现脑缺血再灌注损伤后海马m-Calpain表达升高（P<0.001）,且海马CA1区m-Calpain/NeuN共定位细胞增多;相比于单纯缺血再灌注损伤大鼠,电针预处理降低海马m-Calpain表达（P<0.01）,并减少海马CA1区m-Calpain/NeuN共定位细胞。5.Western Blot检测海马神经元p38 MAPK表达,发现各组大鼠t-p38表达水平之间无差异,但p-p38/t-p38比值观察p38磷酸化水平发现,与单纯缺血再灌注损伤模型组大鼠相较,电针预处理能够显着降低海马p38 MAPK磷酸化水平（P<0.01）。结论:1.电针预处理可减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,具有延迟性神经保护作用。2.电针预处理的延迟性神经保护作用可能不能通过调节胞外谷氨酸浓度实现。3.电针预处理可以通过调节GluN2B蛋白表达,减少脑缺血再灌注引起的神经元损伤,在损伤级联反应的最上游起始点终止缺血性卒中诱导的兴奋毒性。4.电针预处理可下调海马神经元m-Calpain、p-p38 MAPK的表达,在电针脑保护中发挥重要效用,这可能是电针预处理抑制神经元凋亡分子生物学路径的下游机制。
吴丹红[9]（2020）在《SIRT2对脑缺血再灌注损伤的影响及机制研究》文中研究说明急性缺血性脑卒中（AIS）具有较高的发病率、致残率及致死率,严重影响人类健康,目前AIS的治疗依然存在很大的挑战。沉默信息调节因子2相关酶2（SIRT2）在多种神经系统疾病中有着十分重要的调节作用,但在急性脑缺血再灌注损伤中的作用尚无明确定论。为明确SIRT2对缺血性脑损伤的影响及其作用机制,本课题从临床、动物及细胞等方面对此进行了研究,以期为AIS的治疗提供新的思路。第一部分:急性缺血性卒中血清外泌体SIRT2表达的临床研究目的:了解SIRT2水平与AIS的发生、严重程度和预后的关系。方法:用ELISA检测AIS患者组（n=120）和AIS高危对照组（n=60）血清外泌体中SIRT2水平;用美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评估AIS神经功能缺损严重程度及改良Rankin评分量表（m RS）评估AIS预后。结果:AIS患者血清外泌体SIRT2水平显着高于AIS高危组（P<0.001）;多因素分析表明,SIRT2水平与AIS患者神经功能缺损严重程度呈正相关（P<0.001）,但与AIS发病后90天不良预后无关（P>0.05）。结论:血清外泌体SIRT2水平与AIS的发生相关及与严重程度呈正相关。第二部分:抑制SIRT2的活性对缺血再灌注动物脑损伤的影响目的:探讨抑制SIRT2的活性对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:以大脑中动脉阻塞（MCAO）模型小鼠和SIRT2活性抑制剂AK-7干预的MCAO小鼠为研究对象,采用悬空悬尾实验、转角实验、木棒实验、平衡木实验及Longa法神经行为学评分评估小鼠神经功能缺损严重程度,TTC染色计算脑梗死体积。结果:抑制SIRT2的活性后MCAO小鼠神经功能缺损明显减轻（P<0.001）,脑梗死体积显着减小（P<0.001）。结论:抑制SIRT2活性可显着改善脑缺血再灌注损伤。第三部分:抑制SIRT2活性改善脑缺血再灌注损伤的机制研究目的:探讨抑制SIRT2活性改善脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法:（1）构建敲减SIRT2质粒,以及氧糖剥夺/复氧（OGD/R）细胞模型,用Western blot分析α-tubulin和乙酰化α-tubulin、P38和p P38和SIRT2水平,用Co IP检测SIRT2与P38的相互作用。（2）制备大脑中动脉阻塞（MCAO）小鼠模型,采用悬空悬尾实验、转角实验、木棒实验、平衡木实验及Longa法神经行为学评分评估神经功能缺损严重程度,Western blot分析上述蛋白,TTC染色检测脑梗死体积。结果:（1）OGD/R细胞内SIRT2和P38均被激活,抑制SIRT2活性诱导P38活性进一步增强;免疫共沉淀揭示P38与SIRT2相互作用。（2）MCAO小鼠脑内P38被激活,抑制SIRT2活性,不仅可使P38的活性进一步增强,而且可减轻缺血再灌注造成的神经功能缺损和梗死体积,同时抑制SIRT2和P38活性,此效应明显减弱。结论:抑制SIRT2活性改善脑缺血再灌注损伤的作用是通过激活P38来实现的。综上所述,本研究表明,AIS患者血清外泌体SIRT2水平与AIS患者神经功能缺损的严重程度呈正相关;抑制SIRT2活性可明显减轻MCAO小鼠的缺血再灌注损伤;细胞实验揭示并动物研究验证了抑制SIRT2活性改善脑缺血再灌注损伤是通过激活P38实现的。本研究的结果不仅有助于深入了解脑缺血再灌注损伤的病理生理机制,而且为临床寻找新的AIS治疗策略提供了有一定价值的科学依据。
梁克山[10]（2019）在《P38MAPK抑制剂、雌二醇和TPX2对痴呆鼠模型海马神经细胞损害的保护作用及认知功能的影响》文中指出引言痴呆是以认知功能进行性减退为特征的综合征,是一种渐进的、退化的脑部疾病,导致认知和情感功能的丧失,最常见于记忆,而其他功能如语言、行为以及最显着的执行功能也常常受损。据估计,全世界约有2400万人患有痴呆症,到2040年,这一数字将增加3至4倍。大约60%是阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）,10%～20%为血管性痴呆（vascular dementia,VaD）,分别占痴呆的第一、二位,其发病机制尚未完全明了。AD特征性病理改变为颞叶海马出现β淀粉样蛋白沉积形成的细胞外老年斑和tau蛋白过度磷酸化形成的神经细胞内神经原纤维缠结,VaD是由于缺血、出血、低灌注、栓塞、小血管病等血管因素及事件致认知领域损害。在影像学方面,AD是以海马、颞、顶叶皮质萎缩为主的弥漫性萎缩,VaD表现为认知相关区（额叶、颞叶、海马、顶叶、角回、丘脑等）的血管事件（梗死、出血、脑白质病变、腔隙性梗死）。除家族史和一些躯体疾病外,导致痴呆的危险因素主要有:年龄、性别、较低教育、经济水平等。两者在临床表现上各有特点。但在临床实际工作中常难以鉴别。有证据表明,相当部分的AD具有脑血管方面的病理改变,这可能是老龄化的表现之一,也有可能是AD与VaD混合状态的表现之一。同样地,VaD患者脑组织病理检查可以发现诸如老年斑之类AD改变,这可能是混合性痴呆的结果,与正常的老年化进程有关。这就导致人们对这两种疾病的关系和鉴别产生了浓厚的兴趣,这些问题的研究有助于对痴呆发生的病理机制有更加深人的了解,对临床干预策略的制定有很大的推动作用。海马是神经系统中与人类的学习与记忆关系密切的重要功能区,大脑的海马体不但是老年痴呆最早最重要的病变区域,而且也是血管性痴呆的重要受损部位,以往的研究表明,海马神经元凋亡在AD和VaD的发病中均起着重要的作用,并且对缺血低灌注损伤具有明显的易感性。阿尔茨海默氏病（阿尔茨海默病）是一种进行性神经退行性疾病,最终导致神经元不可逆性损伤以及各种智力缺陷,包括认知和记忆。AD已成为重要的公共卫生问题,其症状主要包括躯体、认知、情绪功能的障碍,以及长期的认知和感觉功能退化,这些均明显影响患者的生活质量。当前已有大量有关AD发生和发展方面的研究,并已取得显着成绩,但是这些研究仍然无法提供有效的疾病诊断和治疗技术。这种紧迫的需求激发了神经科学界及医疗行业对AD治疗方法发展的兴趣。根据经典的淀粉样蛋白假说,相对于其他各种淀粉衍生物,Aβ1-42在AD的发病中起着重要的作用。Aβ1-42是由淀粉样前体蛋白（APP）裂解产生的β-分泌酶和γ-分泌酶。Aβ蛋白过量导致淀粉样斑块的形成和各种神经功能障碍包括炎性级联反应的激活启动,tau蛋白磷酸化的推广,氧化应激的增加,细胞内的信号转导通路的管制,突触可塑性的损伤及诱导神经元的凋亡和细胞死亡。越来越多的证据表明,雌二醇可能既促进又会损害记忆相关的过程,因此,雌激素在AD病理过程中所扮演的确切的角色仍然是难以捉摸的。目前,通过向脑内立体定向注射Aβ1-42建立AD小鼠模型。切除小鼠双侧卵巢来观察17β-雌二醇（E2）对AD不同阶段的治疗（早期和晚期）的影响,国内外少见报道,对这一课题的进一步研究无疑具有重要意义。充分证据表明,妇女绝经后循环系统中雌激素水平会突然下降,造成氧化应激风险加大和神经退行过程加快,尤其是那些AD的高危人群。另一方面,实验研究表明,雌性动物（OVX）切除卵巢后的雌激素治疗可改善其学习和记忆过程,提高其在旋臂迷宫和对象识别中的认知能力。在临床情况下,绝经后5年内保持较高雌二醇水平的女性与保持稳定低雌二醇水平的女性相比,前者表现出更优的行为能力。此外,具有较高内源性雌激素水平的绝经后妇女在斯特鲁普任务和空间工作记忆,延迟回忆和数字排序测试方面的能力更为出色。同样,正在服用激素替代疗法的妇女在非空间工作记忆和空间工作记忆任务有更好的反应。然而,也有报道指出雌激素对绝经后妇女认知能力的负面影响。旨在了解这些差异的研究结果表明,若提前应用雌二醇,暴露于Aβ蛋白的神经元所受损伤会显着减少,而若同时或于暴露Aβ蛋白5天后应用雌二醇,神经元则无法获得雌二醇所带来的保护,甚至所受损伤会转而加剧。总之,在阿尔茨海默病的病理过程中雌激素起着微妙又重要的作用,可在不同阶段施加积极或消极的影响。因此,本实验通过研究AD不同病理阶段的17β-雌二醇（E2）治疗（早期和晚期）,全面了解E2在AD病理过程中的角色和评估E2作为预防药物的意义。海马是神经系统中与人类的学习与记忆关系密切的重要功能区,大脑的海马体不但是老年痴呆最先最重要的病变区域,而且也是血管性痴呆的重要受损部位,以往的研究表明,海马神经元凋亡在AD和VaD的发病中均起着重要的作用,但SB202190和SB203580对海马神经元凋亡因子表达和学习记忆能力的影响却少有报道,特别是SB202190和SB203580对海马神经元凋亡和Bcl-2、Caspase-3表达影响的研究国内外未见有报道。为了探讨海马神经元凋亡在AD和VaD中的致病机制以及对认知功能的影响,历时6年课题组做了以下3项课题:1.应用雌二醇对AD痴呆小鼠模型海马神经细胞元凋亡的保护作用机制和认知功能影响进行了研究,本研究利用切除双侧卵巢的小鼠,经侧脑室内注射Aβ1-42的方法建立阿尔茨海默病（AD）模型,并给予雌二醇（E2）治疗,研究Aβ1-42诱导的海马神经毒性及分子机制,评价E2拮抗Aβ1-42诱导的海马神经毒性的效果和分子机制。2.应用p38MAPK抑制剂对VaD痴呆大鼠模型海马神经细胞凋亡的保护作用机制和认知功能影响进行了研究,在这项研究中,我们研究了 SB203580、SB202190对血管性痴呆大鼠海马细胞凋亡和学习记忆能力的影响。观察了 p38 MAPK抑制剂对脑细胞凋亡的保护作用,并借助海马依赖性水迷宫试验检测了大鼠的空间参考学习和记忆能力。3.应用TPX2研究对阿尔茨海默病模型大鼠神经细胞凋亡的保护作用机制。借助海马依赖性水迷宫试验检测了大鼠的空间参考学习和记忆能力。TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡,H E染色观察各组脑组织细胞,Western blot检测ERK和p38 MAPK的表达,采用RT-PCR方法检测MAPK、ERK和p21中mRNA的表达水平。观察了 TPX2对经β1-42处理脑组织的细胞凋亡有保护作用,进一步通过抑制MAPK、ERK和p38蛋白的表达而探讨了其作用机理。总之,课题组通过以上3项研究,旨在进一步阐明p38MAPK抑制剂和雌二醇对痴呆鼠模型海马神经元凋亡的保护作用机制以及对痴呆模型认知功能的影响。第一部分 雌二醇治疗对小鼠阿尔茨海默病模型海马神经元发生及认知功能障碍的早期保护作用目的:本研究利用切除双侧卵巢的小鼠,经侧脑室内注射Aβ1-442的方法建立阿尔茨海默病（AD）模型,并给予雌二醇（E2）治疗。检测Aβ1-42诱导的神经毒性及分子机制;评价E2拮抗Aβ1-42诱导的神经毒性的效果和分子机制。方法:1.双侧卵巢切除术:所有小鼠双侧卵巢切除并立即皮下植入药物,可以持续释放药物60天,内含有E2 0.18毫克。2.动物模型的制备:AD模型组小鼠Aβ1-42（4μg/mouse）,缓慢注射（0.5μl/min）;安慰剂组小鼠注射等量生理盐水（4μg/mouse）。3.BrdU注射:BrdU连续3次腹腔注射,间隔6小时,给药剂量为50mg/kg。4.雌二醇治疗:（1）早期E2治疗:注射BrdU后第7天双侧海马注射Aβ1-42,后给予7天雌二醇皮下注射,3 μg/day。（2）后期E2治疗:注射BrdU后第7天双侧海马注射Aβ1-42,7天后再给予7天雌二醇皮下注射,3 μ g/day。5.Morris水迷宫实验:计算每组小鼠平均游泳速度、延迟时间。在实验的第8天,撤去隐蔽的水面下平台,观察并记录小鼠的游泳速度及登台潜伏期。6.免疫染色:采用NeuN和BrdU免疫染色检测海马神经的生成。7.ELISA检测:检测促黄体生成激素（LH）、促卵泡激素（FSH）、雌激素（Estrogen）、孕酮（Progesterone）血清水平。8.RT-PCR:从大脑样本中取出海马组织,在冰上用剪刀将其剪碎。总mRNA采用Trizol试剂提取和RNA反转录与PrimeScriptTMRT试剂盒。9.Western blotting检测信号通路蛋白的表达:从大脑样本中取出海马组织,在冰上用剪刀将其剪碎。蛋白样品的提取采用放射免疫沉淀试验（RIPA）缓冲液。10.cAMP浓度测定:海马组织,在冰上用剪刀将其剪碎。组织颗粒在裂解缓冲液中裂解10分钟,在4℃、14000 rpm离心10分钟,收集上清液并用LANCETM cAMP 384试剂盒测定环磷酸腺苷（cAMP）浓度。11.透射电子显微镜:腹腔麻醉后小鼠,经心脏用2.5%戊二醛灌注并取出海马组织,海马组织继续用2.5%戊二醛固定过夜,在4℃,四氧化锇固定2小时后制作超薄切片（60 nm）,用丙酮脱水和醋酸铀染色。结果:1.小鼠海马注射Aβ1-42后,进行Morris水迷宫测试评,估认知功能,特别是空间学习和记忆能力（图1A）。在培训第1-2天,接受Aβ1-42注射的“老年”鼠在发现可见平台的游泳速度或时间延迟上与对照组相比没有差异,这表明空间学习能力不是在Aβ1-42注射后立即受到影响（P>0.05,n=10;见图1A）。相反,改为隐藏平台培训的第3-7天,Aβ1-42小鼠比对照组小鼠时间延迟更长,这些差异在5-7天显着,这表明记忆功能是在Aβ1-42注射后5天开始明显受损（P<0.01,n=10;见图 1A）。从迷宫中去掉平台后,观察小鼠在每个象限停留的时间比例（图1B）。Aβ1-42小鼠在象限虚拟平台的位置所花费的时间百分比明显减少。在本研究中,通过NeuN和BrdU染色标记海马神经元（图1C）,染色结果显示Aβ1-42模型组小鼠BrdU注射后21到28天,NeuN、BrdU 阳性细胞数量均显着减少（P<0.01,n=10;图1D）。这些结果表明,小鼠海马神经元在接受Aβ1-42注射后发生严重损害。2.为评估E2对AD小鼠病理过程中早期阶段的影响,在造模后立即给予E2治疗（图2C）。与单纯对照组相比,接受E2治疗的对照组海马神经元再生无明显变化,而Aβ1-42小鼠接受E2治疗与未接受E2治疗比较,NeuN和BrdU 阳性细胞显着增加（P<0.01,n=3;图2D）。此外,给予E2治疗后,AD小鼠找到隐藏平台的潜伏期显着降低（P<0.01,n=10;图2A）,在撤出平台的象限所停留的时间比例明显升高（P<0.01,n=10;图2B）。这些研究结果表明,在Aβ1-42小鼠AD病理过程的早期阶段,雌激素治疗增加海马元神经再生并促进认知功能的恢复。3.为评估E2对AD小鼠病理过程中后期阶段的影响,在造模后第7天开始给予E2治疗（图2C）。无论是对照组还是模型组,E2治疗均没有改善海马神经元再生,NeuN和BrdU阳性细胞没有明显变化（P>0.05,n=3;见图3D）。此外,给予E2治疗,并没有降低AD小鼠找到隐藏平台的潜伏期（P>0.05,n=10;见图3A）。在撤出平台的象限停留时间比例没有明显升高（P>0.05,n=10;见图3B）。4.通过测定LH、FSH、雌激素和孕激素的血清水平,确认E2的效果。在E2治疗前FSH,LH,雌激素或孕激素水平没有显着差异（P>0.05,n=6;图4A-D）,但在E2治疗后LH、FSH、雌激素水平显着增加,而孕酮水平明显下降（P<0.01,n=6;图 4A-D）。在早期给与雌二醇的Aβ1-42小鼠,TrkB、BDNF的mRNA及蛋白水平显着上调,而P75NTR表达水平减少（P<0.01,n=3;图4E,F）。这些结果表明,E2诱导的神经发生,至少部分通过BDNF/TrkB通路。对这一途径的下游因子进行了检测（图4E,F）和结果与以前的研究结果相一致,STAT3/CREB/ERK信号通路的激活明显增加（P<0.01,n=3;图4E,F）。本研究还对cAMP水平进行评估,以确认BDNF/TrkB下游信号通路的活化（图4D）。5.与后期E2治疗及未给予E2治疗比较,在早期给与雌二醇的A β 1-42小鼠,NO和ROS的水平明显降低（P<0.01,n=3;图5A）。相应的细胞死亡相关的Cytochrome-c/Bax/Bcl-2/acspase-3 信号通路因子活化下调（P<0.01,n=3;图5B-C）。这些结果表明,E2降低AD病理过程早期阶段海马区的细胞的氧化应激及死亡通路相关因子的活化,促进认知功能的恢复。6.与后期E2治疗及未给予E2治疗比较,在早期给与雌二醇的Aβ1-42小鼠,胶质细胞增生显着降低（P<0.01,n=3:图6A,B）。E2介导的炎症反应,上调抗炎信号通路的因子活化（CD206,FIZZ1,1、TGFβ）并下调促炎信号通路因子的活化（IL-1β,TNF 和 IL-6。P<0.01,n=3;图 6C-E）。7.在本研究中,使用透射电镜观察海马突触的超微结构。与后期E2治疗及未给与E2治疗比较,发现在早期给与雌二醇的Aβ1-42小鼠,突触的数量显着增加（P<0.01,n=3;图7A）。为了进一步探讨E2对不同类型突触的作用,采用Western blot对海马NMDA受体和AMPAR受体水平进行分析。NMDA受体（GluN1和GluN2）水平没有明显影响,而AMPAR受体水平（GluA1 GluA2）明显增加（P<0.01,n=3;图7B,C）。此外,还有重要的突触后蛋白Hevin和SPARC表达明显增加（P<0.01,n=3;图7B,C）,这两种蛋白在突触的生成及功能方面起着重要作用。结论:1.Aβ1-42小鼠认知功能减退与海马区神经元发生有关。小鼠海马神经元在接受Aβ1-42注射后发生严重损害,海马神经元损害在认知功能障碍方面起到重要作用。2.AD早期阶段E2可增加海马神经元再生并促进认知功能的恢复,而后期阶段E2治疗对的海马神经元再生及认知功能无改善。3.AD早期阶段E2治疗上调Aβ1-42小鼠海马神经元再生相关信号通路。4.AD早期阶段E2治疗可减少氧化应激、下调细胞死亡相关的信号通路活性。5.AD早期阶段E2治疗抑制Aβ1-42小鼠海马小胶质细胞过度增生。6.AD早期阶段E2治疗可增加海马神经元突触受体数量。第二部分 P38MAPK抑制剂对血管性痴呆大鼠海马细胞凋亡的保护作用及学习记忆能力的影响目的:本研究利用应用双侧颈总动脉结扎法（2-VO法）制作血管性痴呆（VaD）大鼠模型,经侧脑室内注射SB202190和SB203580的方法对VaD大鼠学习记忆能力进行研究,观察p38MAPK抑制剂对VaD大鼠海马依赖的Morris水迷宫的认知功能所起的作用,并通过研究海马神经元凋亡、海马区P38MAPK磷酸化变化及Bcl-2和Caspase-3表达,研究SB202190和SB203580对血管性痴呆大鼠海马区的神经保护机制,探讨海马神经元凋亡在血管性痴呆的发病机制中所起的作用。方法:利用应用双侧颈总动脉结扎法（2-VO法）制作血管性痴呆（VaD）大鼠模型,随机分为SB202190治疗组、SB203580治疗组、对照组和假手术组。假手术组只分离出双侧颈总动脉并不对其结扎,作为两血管法VaD模型的正常对比。治疗组采用侧脑室注射给药方式分别给予P38MAPK抑制剂SB202190、SB203580,对照组和假手术组采用侧脑室注射给药方式给予等量二甲基亚矾（DMSO）,注射药物2周后用Morris水迷宫法测试各组大鼠的学习记忆能力的变化。注射药物后应用TUNEL法检测海马区神经元凋亡,应用蛋白印迹（Western blot）法检测大鼠海马区P38MAPK磷酸化变化,免疫荧光法和激光共聚焦显微镜观察大鼠海马区Bcl-2和Caspase-3表达,以探讨SB202190和SB203580对血管性痴呆大鼠海马区的神经保护机制。结果:1.本研究对平台逃避潜伏期、空间学习、大鼠的SB203580或SB202190治疗效果均进行了研究。结果表明,SB203580和SB202190治疗组平台逃避潜伏期与假手术组和对照组相比明显缩短（**P<0.01）,说明大鼠的空间学习能力得以提高。2.给予SB203580和SB202190治疗5天后我们还观察到海马磷酸化激活P38 MAPK表达水平在各治疗组间差异显着（**P<0.01,SB203580治疗组或SB202190组治疗VS假手术组和对照组）。结果显示,SB203580或SB202190治疗后p38MAPK的表达显着降低。SB203580和SB202190治疗组间无显着差异。3.SB203580和SB202190有助于海马神经元抵抗慢性缺血诱导的细胞凋亡。为了探索SB203580和SB202190是否对血管性痴呆大鼠体外海马细胞凋亡和学习记忆能力有效,本实验用HT22细胞测试SB203580和SB202190的治疗效果。与对照组相比,用SB203580或SB202190治疗后实验组海马神经元凋亡减少。实验也证实了在体内SB203580、SB202190对海马细胞凋亡和血管性痴呆大鼠学习记忆能力是有疗效的。侧脑室注射SB203580和SB202190治疗五天后,处死大鼠,与对照组、SB203580和SB202190组相比,假手术组TUNEL阳性细胞数（脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导缺口末端标记,绿色荧光）显着下降（**P<0.01）。然而,SB203580和SB202190组与对照组相比,前者TUNEL阳性细胞数目显着降低;而且SB203580组与SB202190组相比,前者TUNEL 阳性细胞较少。总之,SB203580和SB202190有助于海马神经元抵抗慢性缺血诱导的细胞凋亡。4.本实验研究了 SB203580和SB202190对VaD大鼠海马区施加的抗凋亡能力。脑室注射五天后,处死大鼠获取VaD大鼠海马标本。SB203580或SB202190培养48小时后,进行实验计算实验组凋亡细胞的数量（n=3）。P38MAKA培养后,HT22细胞出现皱缩,碎裂成膜结合凋亡小体,很快被邻近细胞吞噬。P38MAKA能够减少HT22细胞的凋亡。而SB203580或SB202190治疗组凋亡的HT22细胞数量均显着低于对照组。5.在VaD大鼠模型的海马标本上进行了 P38 MAKA和凋亡相关基因之间的关系研究。我们对P38MAKA诱导细胞凋亡相关的mRNA的表达水平进行了分析。与假手术组和对照组相比,细胞凋亡抑制基因BAX和Bcl-2在VaD大鼠海马经SB203580 或 SB202190 治疗后表达增加。caspase-8、caspase-3 和 caspase-9 的表达在SB202190或SB203580治疗组比对照组均显着降低。但SB202190治疗组细胞凋亡抑制基因Bax和Bcl-2的表达比SB203580组略高,这表明SB202190可通过抑制P38 MAKA的活性而减少细胞凋亡,依赖线粒体的凋亡途径可以由慢性缺血激活。6.大鼠经SB203580和SB202190治疗存活时间延长 实验组其余VaD大鼠模型继续存活以观察治疗的远期疗效。假手术组和对照组大鼠在第30天处死。相反,约30%SB202190组和60%SB203580组的动物最后需要处死（**P<0.01）。这说明与SB203580相比,SB202190治疗可进一步延长大鼠的存活时间。其中,相对于SB203580,SB202190较好的治疗效果体现在VaD大鼠显着的生存优势（**P<0.05）结论1.P38MAPK抑制剂SB202190和SB203580,能提高或改善VaD大鼠的学习记忆能力。2.本研究给予VaD大鼠P38MAPK抑制剂治疗后p38MAPK的表达显着降低,有效减少海马神经元细胞凋亡,促进记忆障碍重建,且耐受性良好。3.SB203580和SB202190通过抑制P38 MAKA的活性而减少细胞凋亡,有助于海马神经元抵抗慢性缺血诱导的细胞凋亡,依赖线粒体的凋亡途径可以由慢性缺血激活。4.大鼠经SB203580和SB202190治疗存活时间延长,与SB203580相比,SB202190治疗可进一步延长大鼠的存活时间。第三部分 TPX2对阿尔茨海默病模型大鼠神经细胞凋亡的保护作用机制的研究目的:研究TPX2对阿尔茨海默病模型大鼠神经细胞凋亡的保护作用机制。方法:将90只大鼠随机分为药物组、对照组和空白组,每组30只。在药物治疗组和空白组大鼠用1 0%水合氯醛麻醉（0.5ml/100g剂量）,在大鼠双侧海马区域的准确位置注入Aβ1-425ul（浓度1μg/ul）建立模型。将配置的TPX2抑制剂制成溶液。模型建立后,各组大鼠分别给予不同的治疗方法;药物组大鼠将TPX2-siRNA溶液连接10μl微量注射器给予侧脑室注射10μl,对照组大鼠给予侧脑室注射等量1%DMSO溶液。空白组为正常健康组,本组大鼠未作任何手术或药物治疗。大鼠脑组织分为两个部分,一部分是固定、脱水、石蜡包埋、制成约5um厚度的切片。TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡,HE染色观察各组脑组织细胞,Western blot检测ERK、MAPK和p38的表达水平,采用RT-PCR方法检测MAPK、ERK和p38中mRNA的表达水平。结果:一周后,TUNEL染色显示在药物组脑组织细胞凋亡率明显高于对照组和空白组,差异具有统计学意义（P<0.05）;使用TPX2抑制剂后,药物组TPX2的mRNA表达水平显着低于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）,分别检测MAPK和p38蛋白的mRNA表达水平,药物组MAPK水平显着高于对照组及空白组,差异具有统计学意义（P<0.05）;Western blot灰度值比较中发现,MAPK和p38的表达水平无显着差异,其差异不具有统计学意义（P>0.05）。然而,在药物组中,MAPK、p38表达水平明显高于对照组,空白组MAPK灰度值则明显下降,其差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:因此,TPX2通过抑制MAPK、ERK和p38蛋白的表达抑制经Aβ1-42处理的脑组织细胞发生凋亡,对其有保护作用。
二、大鼠局部脑缺血再灌注后淀粉样前置蛋白基因的表达（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、大鼠局部脑缺血再灌注后淀粉样前置蛋白基因的表达（论文提纲范文）
（1）MicroRNA-155对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一章、材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 实验试剂 |
| 1.1.2 主要仪器 |
| 1.1.3 试剂配制 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 实验动物及分组 |
| 1.2.2 实验动物模型建立 |
| 1.2.3 Longa评分 |
| 1.2.4 大鼠TTC染色 |
| 1.2.5 大鼠脑缺血半暗带区TUNEL检测细胞凋亡 |
| 1.3 统计学分析 |
| 第二章、实验结果 |
| 2.1 不同水平miR-155对MCAO/R大鼠存活率的影响 |
| 2.2 不同水平miR-155对MCAO/R大鼠脑梗死体积的影响 |
| 2.3 不同水平 miR-155 对 MCAO/R 大鼠缺血半暗带区细胞凋亡的影响 |
| 第三章、讨论 |
| 第四章、结论与展望 |
| 4.1 结论 |
| 4.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
（2）大鼠脑缺血后TDP-43变化及人参皂苷Rg1对其调节机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 NLRP3炎性小体在中枢神经系统疾病中的作用研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（3）青年缺血性脑卒中后海马齿状回神经分化及紫杉叶素干预缺血性脑卒中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 第一章 青年缺血性卒中后海马齿状回神经分化机制研究 |
| 前言 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验主要试剂 |
| 1.3 实验主要仪器 |
| 1.4 试剂配制 |
| 2. 方法 |
| 2.1 沙鼠短暂性前脑缺血模型制备 |
| 2.2 实验分组及给药 |
| 2.3 脑组织处理 |
| 2.4 BrdU的免疫组织化学 |
| 2.5 神经功能评分 |
| 2.6 Morris水迷宫实验 |
| 2.7 免疫组织化学染色 |
| 2.8 BrdU/NeuN的双重免疫荧光染色 |
| 2.9 蛋白印迹实验 |
| 2.10 统计学分析 |
| 3. 结果 |
| 3.1 青、老年沙鼠缺血性卒中后神经功能康复的差异 |
| 3.2 缺血性卒中后青、老年沙鼠CA1区NeuN免疫染色的差异 |
| 3.3 缺血性卒中后青、老沙鼠DG区细胞增殖的差异 |
| 3.4 缺血性卒中后青、老沙鼠DCX免疫染色的差异 |
| 3.5 青、老年沙鼠DG区NeuN/BrdU免疫荧光染色差异 |
| 3.6 青、老年沙鼠海马区Erk信号通路的蛋白表达水平 |
| 3.7 青、老年沙鼠海马区自噬的蛋白表达水平 |
| 3.8 Erk或自噬抑制剂处理对青年沙鼠缺血性卒中后神经功能康复的影响 |
| 3.9 Erk或自噬抑制剂处理对青年沙鼠CA1区NeuN免疫染色的差异 |
| 3.10 Erk或自噬抑制剂处理对青年沙鼠DG区细胞增殖的影响 |
| 3.11 Erk或自噬抑制剂处理对青年沙鼠DG区DCX免疫表达的影响 |
| 3.12 Erk或自噬抑制剂处理对青年沙鼠DG区NeuN/BrdU免疫表达的影响 |
| 3.13 Erk抑制剂处理对青年沙鼠海马区Erk信号通路蛋白表达水平的影响 |
| 3.14 自噬抑制剂处理对青年沙鼠海马区自噬相关蛋白表达水平的影响 |
| 4 讨论 |
| 第二章 紫杉叶素抗缺血性卒中的保护作用及分子机制 |
| 前言 |
| Part.1 紫杉叶素通过调控Erk信号通路对青年沙鼠前脑缺血性卒中损伤神经保护作用 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物与试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 沙鼠短暂性前脑缺血模型制备 |
| 2.2 实验分组及给药 |
| 2.3 神经功能评分 |
| 2.4 脑组织处理 |
| 2.5 免疫组织化学染色 |
| 2.6 蛋白印迹实验 |
| 2.7 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 Tax对Isch后沙鼠神经功能康复的情况 |
| 3.2 Tax对Isch后沙鼠海马CA1区细胞的形态变化 |
| 3.3 Tax对Isch后沙鼠海马CA1区神经元死亡的影响 |
| 3.4 Tax对Isch后沙鼠海马CA1区DCX的影响 |
| 3.5 Tax对Isch后沙鼠海马CA1区星形胶质细胞(GFAP~+)的影响 |
| 3.6 Tax对Isch后沙鼠海马CA1区PECAM-1的影响 |
| 3.7 Tax对Isch后沙鼠海马CA1区ZO-1的影响 |
| 3.8 Tax对Isch后沙鼠海马Erk相关通路蛋白水平的影响 |
| 4 讨论 |
| Part.2 紫杉叶素通过调控Nrf2/HO-1信号通路对小鼠局灶性缺血性卒中损伤神经保护作用 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物与试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 小鼠大脑中动脉模型制备 |
| 2.2 实验分组及给药 |
| 2.3 神经功能缺失体征评分 |
| 2.4 脑梗死体积的测定 |
| 2.5 脑组织处理 |
| 2.6 免疫组织化学染色 |
| 2.7 蛋白印迹实验 |
| 2.8 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 Tax降低了MCAO后神经功能缺失评分和脑梗死体积 |
| 3.2 Tax明显改善了MCAO所致的神经元损伤 |
| 3.3 Tax降低了MCAO后Iba1免疫活化的小胶质细胞(Iba1~+)的增殖和活化 |
| 3.4 Tax降低了MCAO后GFAP免疫活化的(GFAP~+)星形胶质细胞的增殖和活化 |
| 3.5 Tax提高了MCAO后半暗带Nrf2、HO-1蛋白表达水平 |
| 3.6 Tax改善了MCAO后半暗带Caspase-3、Bcl-2、Bax的蛋白表达的水平 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 综述: 多酚类化合物抗脑缺血再灌注后氧化应激损伤作用机制的研究进展 |
| 前言 |
| 1. 多酚类化合物的分类 |
| 2. 氧化应激和脑缺血再灌注 |
| 2.1 缺血再灌注中氧化应激的相关反应 |
| 2.2 Nrf2与缺血再灌注中氧化应激的关系 |
| 3. 多酚类化合物在缺血再灌注中抗氧化应激损伤的药理证据 |
| 3.1 紫杉叶素 |
| 3.2 姜黄素 |
| 3.3 白藜芦醇 |
| 3.4 儿茶素 |
| 3.5 迷迭香酸 |
| 3.6 水飞蓟素 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（4）脂多糖诱导小鼠形成免疫耐受后对缺血性脑中风的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 急性缺血性脑中风对中枢神经系统的影响 |
| 1.1.1 缺血性脑中风诱导神经元凋亡的机制 |
| 1.1.2 小胶质细胞与缺血性脑中风 |
| 1.1.3 星形胶质细胞与缺血性脑中风 |
| 1.1.4 少突胶质细胞与缺血性脑中风 |
| 1.1.5 急性缺血性脑中风的治疗策略 |
| 1.2 小胶质细胞的激活 |
| 1.2.1 缺血脑中风与小胶质细胞的激活 |
| 1.2.2 缺血脑中风中小胶质细胞与炎症因子的相互关系 |
| 1.2.3 缺血脑中风中小胶质细胞与趋化因子的相互作用 |
| 1.2.4 小胶质细胞的极化 |
| 1.2.5 缺血性脑中风发生时小胶质细胞与神经元间的相互作用 |
| 1.2.6 小胶质细胞的吞噬功能 |
| 1.3 LPS介导免疫耐受的研究概况 |
| 1.3.1 免疫记忆 |
| 1.3.2 小胶质细胞与免疫记忆 |
| 1.3.3 LPS诱导小胶质细胞形成免疫训练与免疫耐受 |
| 1.3.4 小胶质细胞形成免疫记忆的表观遗传学机制 |
| 1.3.5 炎症因子调控小胶质细胞的免疫记忆状态 |
| 1.4 D-2-脱氧葡萄糖与代谢重编程 |
| 1.5 IFN-γ与代谢重编程 |
| 1.6 本课题研究的目的及意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 BV-2细胞系 |
| 2.1.3 实验试剂 |
| 2.1.4 实验仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 LPS诱导小鼠免疫耐受模型构建 |
| 2.2.2 小鼠急性缺血性脑中风模型构建 |
| 2.2.3 小鼠灌流与取材 |
| 2.2.4 尼氏染色 |
| 2.2.5 Fluoro-jade C(FJC)染色 |
| 2.2.6 免疫荧光染色 |
| 2.2.7 原代小胶质细胞的培养 |
| 2.2.8 BV-2细胞的培养 |
| 2.2.9 LPS诱导小胶质细胞免疫耐受模型构建 |
| 2.2.10 氧糖剥夺与再灌注模型的建立 |
| 2.2.11 实时荧光定量PCR对炎症因子表达量的检测 |
| 2.2.12 细胞吞噬能力的测定 |
| 2.2.13 细胞迁移能力的测定 |
| 2.2.14 Brd U染色法测定细胞增殖 |
| 2.3 数据统计与分析 |
| 2.3.1 小鼠脑梗塞体积的统计 |
| 2.3.2 FJC阳性细胞数目的统计 |
| 2.3.3 免疫荧光染色细胞数目的统计 |
| 2.3.4 实验数据的分析 |
| 第三章:实验结果 |
| 3.1 LPS诱导小胶质细胞形成免疫耐受后对缺血性脑中风的影响 |
| 3.1.1 急性缺血性脑中风模型的构建 |
| 3.1.2 梗死体积的变化 |
| 3.1.3 梗死边界区退行性神经元的密度变化 |
| 3.1.4 梗死边界区小胶质细胞的激活情况 |
| 3.1.5 梗死边界区iNOS的表达量 |
| 3.1.6 梗死边界区ARG-1的表达量 |
| 3.2 体外诱导小胶质细胞形成免疫耐受后其生理状态的变化 |
| 3.2.1 原代小胶质细胞的培养与纯化 |
| 3.2.2 LPS处理原代小胶质细胞后细胞因子表达量随时间的变化 |
| 3.2.3 LPS诱导BV-2细胞形成免疫耐受 |
| 3.2.4 BV-2细胞形成免疫耐受后对其形态的影响 |
| 3.2.5 BV-2细胞形成免疫耐受后对细胞吞噬能力的影响 |
| 3.2.6 BV-2细胞形成免疫耐受后对迁移能力的影响 |
| 3.2.7 BV-2细胞形成免疫耐受后对细胞增殖能力的影响 |
| 3.3 体外诱导小胶质细胞形成免疫耐受后对氧糖剥夺再灌注的影响 |
| 3.3.1 原代培养小胶质细胞炎症因子在m RNA水平表达量变化 |
| 3.3.2 BV-2细胞炎症因子在m RNA水平表达量变化 |
| 3.3.3 BV-2细胞形态发生的变化 |
| 3.3.4 BV-2细胞吞噬能力的变化 |
| 3.3.5 BV-2细胞迁移能力的变化 |
| 3.3.6 BV-2细胞增殖水平的改变 |
| 3.4 LPS诱导小胶质细胞形成免疫耐受后代谢状态的变化 |
| 3.4.1 抑制糖酵解对BV-2细胞炎症因子表达的影响 |
| 3.4.2 抑制糖酵解对BV-2胞吞噬能力的影响 |
| 3.4.3 抑制糖酵解对BV-2细胞迁移能力的影响 |
| 3.4.4 抑制糖酵解对BV-2细胞增殖能力的影响 |
| 3.4.5 增强氧化磷酸化对BV-2细胞炎症因子表达的影响 |
| 3.4.6 增强氧化磷酸化对BV-2细胞吞噬能力的影响 |
| 3.4.7 增强氧化磷酸化对BV-2细胞迁移能力的影响 |
| 3.4.8 增强氧化磷酸化对BV-2细胞增殖能力的影响 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 LPS诱导的小鼠形成免疫耐受后对缺血性脑中风的影响 |
| 4.2 小胶质细胞形成免疫耐受后进行氧糖剥夺再灌注对小胶质细胞生理功能的影响 |
| 4.3 糖酵解与氧化磷酸化小胶质细胞免疫状态的影响 |
| 第五章:结论 |
| 5.1 研究结论 |
| 5.2 研究展望 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
（5）基于炎症反应、氧化应激、miRNA-124/BACE1/Aβ通路探讨涤痰汤治疗血管性痴呆模型大鼠的作用机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词汇表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1.古代中医对血管性痴呆的认识 |
| 1.1.秦汉时期 |
| 1.2.晋—宋时期 |
| 1.3.明清时期 |
| 2.现代中医对血管性痴呆的认识 |
| 2.1.从虚论治 |
| 2.2.从实论治 |
| 2.3.虚实夹杂 |
| 3.涤痰汤治疗血管性痴呆的理论依据 |
| 3.1.痰浊阻窍是血管性痴呆认知障碍的病机中心环节 |
| 3.2.涤痰汤的组方分析及药味的现代药理研究 |
| 4.参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1.实验一涤痰汤对血管性痴呆模型大鼠行为及海马组织病理的影响 |
| 1.1.实验材料 |
| 1.2.实验方法 |
| 1.3.统计学处理 |
| 1.4.结果 |
| 1.5.讨论 |
| 1.6.参考文献 |
| 2.实验二涤痰汤对血管性痴呆模型大鼠氧化应激反应的影响 |
| 2.1.实验材料 |
| 2.2.实验方法 |
| 2.3.统计学处理 |
| 2.4.结果 |
| 2.5.讨论 |
| 2.6.参考文献 |
| 3.实验三涤痰汤对血管性痴呆模型大鼠炎症反应的影响 |
| 3.1.实验材料 |
| 3.2.实验方法 |
| 3.3.统计学处理 |
| 3.4.结果 |
| 3.5.讨论 |
| 3.6.参考文献 |
| 4.实验四基于mi RNA-124/BACE1/Aβ信号通路探讨涤痰汤对VD模型大鼠的治疗机制 |
| 4.1.实验材料 |
| 4.2.实验方法 |
| 4.3.统计学处理 |
| 4.4.结果 |
| 4.5.讨论 |
| 4.6.参考文献 |
| 结语 |
| 1.结论 |
| 2.创新 |
| 3.不足 |
| 附录 |
| 附录一 综述 |
| 参考文献 |
| 附录二 在校期间发表论文 |
| 致谢 |
（6）基于网络药理学的洋川芎内酯H治疗缺血性脑卒中的作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 第1章 洋川芎内酯H对缺血性脑卒中保护作用机制的网络药理学研究 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 数据库 |
| 1.1.2 软件 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 洋川芎内酯H的靶点预测 |
| 1.2.2 缺血性脑卒中相关靶点收集 |
| 1.2.3 蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络构建和网络拓扑参数分析 |
| 1.2.4 洋川芎内酯H治疗缺血性脑卒中关键靶标富集分析 |
| 1.3 结果 |
| 1.3.1 洋川芎内酯H的潜在靶点 |
| 1.3.2 缺血性脑卒中的相关靶点 |
| 1.3.3 洋川芎内酯H靶点的PPI网络 |
| 1.3.4 缺血性脑卒中靶点的PPI网络 |
| 1.3.5 交集网络 |
| 1.3.6 洋川芎内酯H治疗缺血性脑卒中的关键靶点 |
| 1.3.7 洋川芎内酯H治疗缺血性脑卒中的关键靶点GO富集分析 |
| 1.3.8 洋川芎内酯H治疗缺血性脑卒中的关键靶点KEGG富集分析 |
| 1.4 讨论 |
| 第2章 洋川芎内酯H对MCAO/R小鼠的影响及其机制研究 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 实验药物 |
| 2.1.3 实验试剂 |
| 2.1.4 实验仪器 |
| 2.1.5 主要试剂配制 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 小鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型制备 |
| 2.2.2 实验分组及给药 |
| 2.2.3 神经功能评分 |
| 2.2.4 TTC染色及脑梗死体积测量 |
| 2.2.5 免疫组织化学染色 |
| 2.2.6 蛋白免疫印迹 |
| 2.2.7 统计学方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 洋川芎内酯H对缺血再灌注后小鼠神经功能的影响 |
| 2.3.2 洋川芎内酯H对缺血再灌注后小鼠脑梗死体积的影响 |
| 2.3.3 洋川芎内酯H对缺血再灌注后小鼠NeuN免疫染色的影响 |
| 2.3.4 洋川芎内酯H对缺血再灌注后小鼠凋亡相关蛋白的影响 |
| 2.3.5 洋川芎内酯H对缺血再灌注后小鼠PI3K/AKT/NF-κB信号通路的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 第3章 洋川芎内酯H对OGD/R PC12细胞的影响及其机制研究 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 细胞株 |
| 3.1.2 实验药物 |
| 3.1.3 实验试剂 |
| 3.1.4 实验仪器及耗材 |
| 3.1.5 主要试剂配制 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 细胞培养 |
| 3.2.2 细胞氧糖剥夺再灌注(OGD/R)模型建立 |
| 3.2.3 实验分组及给药 |
| 3.2.4 CCK-8法 |
| 3.2.5 蛋白免疫印迹 |
| 3.2.6 统计学方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 洋川芎内酯H对氧糖剥夺再灌注后PC12细胞活性的影响 |
| 3.3.2 洋川芎内酯H对氧糖剥夺再灌注后PC12细胞凋亡的影响 |
| 3.3.3 洋川芎内酯H对氧糖剥夺再灌注后PC12细胞PI3K/AKT/NF-KB信号通路的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 参考文献 |
| 附录 文献综述 中药及其活性成分防治缺血性脑卒中损伤的机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（7）探讨生物信息学筛选的miR216/124靶向CADM2对小鼠再灌注脑损伤细胞凋亡的作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 非编码RNA与脑卒中的关系及研究进展 |
| 1.3 本课题的研究内容 |
| 技术路线图 |
| 第2章 大脑中动脉闭塞小鼠的MIRNAS芯片数据挖掘建模及数据验证 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料 |
| 2.2.1 选用数据库下载脑卒中相关的mi RNAs芯片数据 |
| 2.2.2 mi RNAs数据分析及建模软件 |
| 2.2.3 筛选mi RNAs的靶基因及富集分析软件 |
| 2.2.4 双荧光素酶报告验证实验的材料 |
| 2.3 研究方法与内容 |
| 2.3.1 下载缺血性脑卒中基因芯片数据及预处理 |
| 2.3.2 脑卒中进展相关的意义mi RNAs数据建模 |
| 2.3.3 脑卒中差异表达mi RNAs的靶基因预测及生物信息学分析 |
| 2.3.4 双荧光素酶实验验证建模的意义mi RNAs与靶标基因的关系 |
| 2.4 研究结果 |
| 2.4.1 标准化处理脑卒中进展相关的mi RNAs芯片数据 |
| 2.4.2 脑卒中进展相关的意义miRNA数据筛选及建模 |
| 2.4.3 预测脑卒中差异表达mi RNAs模型的靶基因及生物信息学分析 |
| 2.4.4 双荧光素酶报告实验验证意义mi RNAs与靶基因的关系 |
| 2.5 讨论 |
| 参考文献 |
| 第3章 MIR-216/124对小鼠氧糖剥夺再灌注损伤N2A细胞的保护作用及其机制研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.3 研究方法 |
| 3.3.1 小鼠神经母瘤细胞(N2a细胞)的培养 |
| 3.3.2 细胞的转染及OGD模型建立、实验分组 |
| 3.3.3 CCK-8法检测细胞存活率 |
| 3.3.4 细胞成管能力的检测 |
| 3.3.5 流式细胞仪检测细胞凋亡状态 |
| 3.4 数据处理及统计分析 |
| 3.5 结果 |
| 3.5.1 N2a细胞转染mi R-216/124 mimics/inhibitor后的有效性检测 |
| 3.5.2 转染miR-216/124模拟物或抑制物对N2a细胞活力的影响 |
| 3.5.3 mi R-216、mi R-124 对细胞成管能力的检测 |
| 3.5.4 流式细胞术检测mi R-216、mi R-124对N2a细胞凋亡的影响 |
| 3.5.5 mi R-216与mi R-124 对靶基因CADM2 及细胞凋亡蛋白Bcl-2、Bax的影响 |
| 3.5.6 mi R-216、mi R-124 抑制氧糖剥夺诱导的N2a细胞凋亡与PI3K/AKT信号通路相关 |
| 3.6 讨论 |
| 参考文献 |
| 第4章 MIR-216/124对小鼠缺血再灌注脑损伤的保护作用及其机制研究 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料 |
| 4.2.1 动物 |
| 4.2.2 主要试剂 |
| 4.2.3 主要仪器 |
| 4.2.4 主要溶液的配制 |
| 4.3 研究方法 |
| 4.3.1 构建小鼠脑缺血的适宜再灌注时间 |
| 4.3.2 制备miR-216/124过表达慢病毒 |
| 4.3.3 小鼠正式实验及Zea Longa神经功能评分 |
| 4.3.4 脑片TTC染色评价脑梗死体积的变化 |
| 4.3.5 TUNEL法检测缺血脑组织中细胞凋亡情况 |
| 4.3.6 实时定量PCR检测缺血脑组织中mi RNA/靶基因的表达 |
| 4.4 统计分析 |
| 4.5 结果 |
| 4.5.1 选择小鼠脑缺血的适宜再灌注时间 |
| 4.5.2 评估miR-216/124慢病毒 |
| 4.5.3 小鼠Zea Longa神经行为学评分 |
| 4.5.4 脑片TTC染色评价脑梗死体积的变化 |
| 4.5.5 TUNEL法检测缺血脑组织中细胞凋亡情况 |
| 4.5.6 实时定量PCR检测缺血脑组织中mi RNA及 CADM2 的表达 |
| 4.5.7 Western Blot检测缺血脑组织中CADM2 的表达量 |
| 4.6 讨论 |
| 第5章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 创新点 |
| 5.3 展望 |
| 参考文献 |
| 附录1 攻读博士学位期间取得的科研成果 |
| 附录2 攻读博士学位期间参加的科研项目 |
| 致谢 |
（8）基于GluN2B/m-Calpain/p38 MAPK路径研究电针预处理对脑缺血再灌注大鼠的神经保护机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语表 |
| 前言 |
| 第一部分 电针预处理对大鼠实验性脑缺血再灌注损伤的脑保护效应研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 第二部分 电针预处理对大鼠实验性脑缺血再灌注损伤后兴奋毒性的调控作用 |
| 实验一 电针预处理对脑缺血再灌注损伤后胞外谷氨酸浓度的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 实验二 电针预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠GluN2B受体的调控作用 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 第三部分 电针预处理促进缺血再灌注大鼠神经元保护的机制研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 小结 |
| 讨论 |
| 1 卒中病理生理概述 |
| 2 “预处理” |
| 3 实验配穴及针刺参数探讨 |
| 4 结果讨论 |
| 5 不足与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 兴奋毒性与缺血性卒中的关系及针刺干预研究进展 |
| NMDA受体和神经元生存信号通路 |
| NMDA受体和神经元死亡信号通路 |
| 针刺治疗兴奋毒性的机制研究 |
| 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（9）SIRT2对脑缺血再灌注损伤的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 急性缺血性卒中血清外泌体SIRT2表达的临床研究 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 实验样本、试剂和仪器 |
| 1.1.2 实验方法 |
| 1.1.3 数据分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 TEM下 AIS患者血清外泌体体积大于对照组 |
| 1.2.2 AIS组血清外泌体SIRT2 水平高于对照组 |
| 1.2.4 SIRT2水平与神经功能缺损严重程度独立相关 |
| 1.2.6 SIRT2 水平与AIS预后不独立相关 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 结论 |
| 第二部分 抑制SIRT2的活性对缺血再灌注动物脑损伤的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验动物、手术器械、试剂、抗体及仪器 |
| 2.1.2 试剂配制 |
| 2.1.3 动物实验 |
| 2.1.4 实验分组 |
| 2.1.5 数据分析 |
| 2.2 实验结果 |
| 2.2.1 小鼠大脑中动脉阻塞模型的复制与鉴定 |
| 2.2.2 脑缺血再灌注损伤影响SIRT2亚型表达变化 |
| 2.2.3 抑制SIRT2 活性可减轻MCAO小鼠神经功能缺损 |
| 2.2.4 抑制SIRT2 的活性可显着减小MCAO小鼠的梗死体积 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 结论 |
| 第三部分 抑制SIRT2活性改善脑缺血再灌注损伤的机制研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验细胞、实验动物、质粒、试剂、抗体、手术器械及仪器 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.1.3 动物实验 |
| 3.1.4 实验分组 |
| 3.1.5 数据分析 |
| 3.2 实验结果 |
| 细胞实验结果 |
| 3.2.1抑制SIRT2的活性可激活P38 |
| 3.2.2敲减SIRT2可激活P38 |
| 3.2.3 敲减SIRT2后AK-7 不能激活P38 |
| 3.2.4 P38与SIRT2蛋白的相互作用 |
| 3.2.5 OGD/R可使SIRT2 活性增强 |
| 3.2.6 在OGD/R状态下,AK-7 抑制SIRT2 的活性 |
| 3.2.7 在OGD/R状态下,P38被激活 |
| 动物实验结果 |
| 3.2.8 脑缺血再灌注损伤激活P38 |
| 3.2.9 脑缺血再灌注损伤后,抑制SIRT2活性可使P38进一步激活 |
| 3.2.10 抑制SIRT2 可减轻神经功能缺损,同时抑制SIRT2和P38 活性,则保护作用减弱 |
| 3.2.11 抑制SIRT2 可减少脑梗死体积,同时抑制SIRT2和P38 的活性,则保护作用减弱 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 结论 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 综述 SIRT2对神经系统疾病的调节作用 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 |
| 致谢 |
（10）P38MAPK抑制剂、雌二醇和TPX2对痴呆鼠模型海马神经细胞损害的保护作用及认知功能的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 中文部分 |
| 第一部分 雌二醇治疗对小鼠阿尔茨海默病模型海马神经元发生及认知功能障碍的早期保护作用 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 第二部分 P38MAPK抑制剂对血管性痴呆大鼠海马细胞凋亡的保护作用及学习记忆能力的影响 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 第三部分 TPX2对阿尔茨海默病模型大鼠神经细胞凋亡的保护作用机制的研究 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
| 英文部分 |
| Chronic estradiol administration during the early stage ofAlzheimer's disease pathology rescues adult hippocampalneurogenesis and ameliorates cognitive deficits in Ap"2 mice |
| Introduction |
| Materials and Methods |
| Results |
| Discussion |
| Summary |
| Reference |
| Figure legends |
| The Effect of P38MAPK Inhibitors on Hippocampus Apoptosisand Learning Memory Ability in Vascular Dementia Rat |
| 1. Introduction |
| 2. Materials and Methods |
| 3. Results |
| 4. Discussion |
| Conflict of Interests |
| Authors, Contribution |
| Reference |
| Figure legend |
| Protective Effects and Mechanism Researches of TPX2 onNeurocytes Apoptosis of Rats with Alzheimer's Disease Model |
| Introduction |
| Materials and methods |
| Results |
| Discussion |
| References |
四、大鼠局部脑缺血再灌注后淀粉样前置蛋白基因的表达（论文参考文献）
- [1]MicroRNA-155对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用[D]. 薛玉英. 延安大学, 2021(09)
- [2]大鼠脑缺血后TDP-43变化及人参皂苷Rg1对其调节机制研究[D]. 张鹏飞. 昆明医科大学, 2021(01)
- [3]青年缺血性脑卒中后海马齿状回神经分化及紫杉叶素干预缺血性脑卒中的作用及机制研究[D]. 王福星. 扬州大学, 2021(08)
- [4]脂多糖诱导小鼠形成免疫耐受后对缺血性脑中风的影响[D]. 瞿源. 兰州大学, 2021(09)
- [5]基于炎症反应、氧化应激、miRNA-124/BACE1/Aβ通路探讨涤痰汤治疗血管性痴呆模型大鼠的作用机制[D]. 杨超. 湖北中医药大学, 2020(08)
- [6]基于网络药理学的洋川芎内酯H治疗缺血性脑卒中的作用机制研究[D]. 张洁. 扬州大学, 2020
- [7]探讨生物信息学筛选的miR216/124靶向CADM2对小鼠再灌注脑损伤细胞凋亡的作用[D]. 胡玲. 武汉科技大学, 2020(01)
- [8]基于GluN2B/m-Calpain/p38 MAPK路径研究电针预处理对脑缺血再灌注大鼠的神经保护机制[D]. 张宝瑜. 天津中医药大学, 2020(03)
- [9]SIRT2对脑缺血再灌注损伤的影响及机制研究[D]. 吴丹红. 南京医科大学, 2020(06)
- [10]P38MAPK抑制剂、雌二醇和TPX2对痴呆鼠模型海马神经细胞损害的保护作用及认知功能的影响[D]. 梁克山. 山东大学, 2019(02)