一、新一代抗病毒制剂——MAP30（论文文献综述）
夏柯[1]（2006）在《苦瓜甙A的含量分析和苦瓜籽总甙体外抗病毒活性研究》文中研究表明苦瓜是一种药食同源的植物，具有很高的营养价值和药用价值，其根、茎、叶、花、果实和种子均有入药记载。其性寒味苦，入心脾胃，清暑解热，明目解毒。近年来，已从苦瓜中分离到一些很有价值的药用化合物，如具有抗肿瘤活性的苦瓜甙A和B（momordicoside A，B），具有抗癌作用的α-苦瓜素（a-momorcharin），具有抗HIV活性的MAP30蛋白（momordica anti-HIV protein of 30kDa）。同时还克隆到一些重要成分相关基因的cDNA，如α-苦瓜素、MAP30蛋白和α-桐酸（a-eleostearic acid）等。 本文围绕苦瓜甙做了两个方面的基础研究，研究结果如下： （A） 建立了检测苦瓜甙A含量的快速、简便且稳定的方法 苦瓜甙A属于葫芦科植物中普遍存在的葫芦苦素（hexanorcucurbitacin）家族，是一种四环三萜的糖甙，为无色方晶。本实验所用苦瓜甙A分离自苦瓜中含甙量较高的组织种子，经过定性鉴定和定量分析，确认是纯度＞99％的苦瓜甙A，可作为对照品使用。 定量称取样品（苦瓜种子、果肉，或苦瓜相关产品，如苦瓜茶、苦瓜粉、苦瓜精等），经石油醚回流脱脂，甲醇提取苦瓜总甙，然后以苦瓜甙A为参照，进行高效液相色谱（HPLC）定性和定量检测，便可快速、准确地测定样品中苦瓜甙A的含量。HPLC采用惠普C18柱分离，柱温25℃，检测波长208nm，流动相为20：25：60（v／v）甲醇-乙腈-50mM KH2PO4缓冲液，流速1mL／min。
王临旭,孙永涛,杨为松,白雪帆,黄长形,王福祥,王九平,羿伟[2]（2003）在《植物蛋白MAP30等药物抗HBV的体外实验》文中提出目的 :体外观察植物蛋白MAP30 （Momordicaanti HIVproteinof 30ku）、α 干扰素 （α IFN）、无环鸟苷 （ACV）及叠氮胸苷 （AZT）的抗HBV作用 .方法 :以HepG2 .2 .15细胞为靶细胞 ,实验共进行 9d .采用ELISA法及荧光定量PCR法 ,测定药物对细胞培养上清HBsAg ,HBeAg及细胞内外HBVDNA的抑制作用 .结果 :MAP30具有明显抗HBV的作用 ,其抑制HBsAg,HBeAg及细胞内外HBVDNA的 5 0 %抑制浓度 （IC50 ）分别为 0 .8,0 .6 ,0 .6及 0 .5 μmol·L-1,治疗指数 （TI） >4～ 7.α IFN也有抑制HBV的作用 ,但抑制作用较弱 ,而ACV及AZT对HBV无抑制作用 .结论 :抗HIV植物蛋白MAP30具有体外抑制HBV的作用
王临旭,孙永涛,杨为松,白雪帆,黄长形,牟丹蕾,张颖,梁雪松[3]（2003）在《抗HIV植物蛋白MAP30等药物的体外抗单纯疱疹病毒作用》文中提出目的 :研究抗人类免疫缺陷病毒 （HIV）植物蛋白MAP30、无环鸟苷 （ACV）、α 干扰素 （IFN α）及叠氮胸苷（AZT）等药物对单纯疱疹病毒 （HSV）的体外抑制作用。 方法 :以Vero细胞为靶细胞 ,观察药物作用 4 8h后对HSV致细胞病变的抑制作用 ,并采用ELISA法测定药物对培养上清HSV 1和HSV 2抗原分泌的抑制作用。 结果 :MAP30和ACV均可使HSV的致细胞病变效应减轻。MAP30对HSV 1和HSV 2抗原分泌的 5 0 %抑制浓度 （IC50 ）分别是 0 .5 μmol L和 0 .4 μmol L ,ACV分别是 2 .8μmol L和 2 .2 μmol L ,而IFN α和AZT对HSV无明显抑制作用。 结论 :MAP30除具有抗HIV活性外 ,还具有抗HSV的作用。
王临旭[4]（2003）在《植物蛋白MAP30的制备及其体外抗病毒活性的实验研究》文中研究表明二十多年来，人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染所引起的艾滋病，即获得性免疫缺陷综合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS），已给人类健康带来了极大危害，采取一切有力措施防治HIV／AIDS已逐渐成为各国政府的共识。目前公认的高效抗逆转录病毒治疗（highly active anti-retroviral therapy,HAART）—即采用两种或两种以上的逆转录酶抑制剂和蛋白酶抑制剂进行有效的抗HIV联合治疗已取得了一定成效。但该疗法也存在不能完全清除病毒、易产生耐药性、毒副作用大及药价昂贵等一系列问题，迫切需要寻求更加高效、安全的抗HIV治疗措施。近年来，在丰富的植物资源中挖掘新的抗病毒制剂已成为令人瞩目的新领域，对苦 第四军医大学博士学位论文瓜子抗 HIV蛋白 30（momordica ni－HIV protein of30kDa，MAP30）的开发研究即是其研究内容之一。 植物蛋白 MAP30是 90年代 Sylvia Lee羽uang等从葫芦科植物苦瓜种子中提取的一种核糖体失活蛋白 （ribosom－nachvating pfoteins，ltD S），此类蛋白普遍存在于高等植物中，可作用于真核细胞核糖体使之失活。研究表明，MAP30具有抗病毒、抗肿瘤等多种生物学活性，尤其对HIV有显着的抑制作用，它不仅可抑制T淋巴细胞内的HIV复制，对单核／巨噬细胞内的HIV也有抑制作用，而对正常细胞无明显毒性，同时它还具有不易产生耐药性、成本低廉等优点，为艾滋病的治疗带来了新的希望。目前，有关MAP30的研究国外还处于体外实验及初步的动物实验阶段，在国内尚未见报道。我国有着丰富的天然药物资源，充分发挥我国传统医药及资源优势，结合现代高科技手段挖掘新的抗HIV药物，应是我国新药研究的一个重要方向和优势所在。本研究从苦瓜子中分离提纯了MAP30，并对其体外抗HIVI活性作了初步研究，同时还测定了其针对单纯疮疹病毒（HSV）以及乙肝病毒（HBV）的抗病毒活性，以期为MAP30的进一步开发研究奠定基础，也为我国抗HIV新药研制提供一些思路与启示。 本研究包括以下内容： 1．MAP30的分高纯化：将苦瓜子去皮、粉碎，离心过滤，经硫酸按沉淀、透析后，进行离子交换层析及凝胶过滤层析纯化。 2．MAP30纯度的鉴定：紫外分光光度仪测定其吸收峰及浓度；SDS聚丙烯酸胺凝胶电泳uDS－PAGE)法鉴定分子量大小及纯度；Western七lot法鉴定其抗原性。 7 第四军医大学博士学位论文 3．MAP30对超螺旋 DNA的切割作用：以质粒 pUC为底物，与不同浓度的MAP30反应，以琼脂糖凝胶电泳观察其对DNA的作用。 4．MAP30等药物体外抗HIVI的作用：以MT4为靶细胞，采用ELISA a测定MAP30以及临床上常用的抗病毒药物叠氮胸苦（AZT）、无环鸟音（ACV）及干扰素一a（IFN－a）对细胞培养上清HIVI P24抗原的抑制作用，并观察药物对 HIV致细胞病变效应的抑制效果。 5．MAP30等药物体外抗HSV的作用：以Vero为靶细胞，采用ELISA fX及间接免疫荧光法测定MAP30、ACV、IFN－a及AZT等药物对细胞培养上清HSVI、HSVZ囊膜糖蛋白抗原的抑制作用，并观察药物对HSV致细胞病变效应的抑制效果。 6．MAP30等药物体外抗 HBV的作用：以 2．2刁 5为靶细胞，采用ELISA ti、DNA免疫印迹法（Southern－blot）及荧光定量 PCR法，测定MAP30JFN－a、ACV及AZT等药物对细胞培养上清HBsAg、HBeAg及细胞内外 HBV DNA的抑制作用。 结果： l．从苦瓜子中分离提纯了 MAP30，证实它是分于量为 30 kDa的均一的蛋白质，并具有使超螺旋DNA断裂为缺口环状及线状DNA的活性。 2．MAP30具有明显抗HIVI的活性，其 IC”为 0．gpmol．L”l，与一线抗HIV药物AZT活性相近。 3．MAP30除具有抗HIVI作用外，还具有抑制HSVI及HSVZ的作用，IC利分别为 0．5卜mol／L和 0．4卜mol·L”‘，其抗 HSV效应略高于常规制剂ACV，对HSVZ的抑制作用更明显。 8 第四军医大学博士学位论文 4．MAP30还具有明显抗HBV的活性，其K。为0．5～0．sapol·L”‘，IFN－0也有抑制HBV的作用，但活性较弱。 5．经MTT法测定药物的细胞毒性，结果表明，MAP30对正常细胞无明显毒性。 本研究从苦瓜子中分离纯化了MAP30 并证实它是分子量为30kDa的均一的蛋白质，它不仅具有抗 HIV的活性，还对 HSV、HBV有抑制作用。目前有关MAP30抗HBV的作用国内外尚未见报导，还需进一步研究。MAP30的抗病毒机理也有待进一步研究，本文结果提示，其切割DNA的活性可能是其发挥生物学效应的主要机制之一。 总之，本文就MAP30的制备及抗病毒活性作了初步研究，为今后进一步的深入研究提供了有用的资料。
王临旭,孙永涛,杨为松[5]（2002）在《新一代抗HIV植物蛋白-MAP30》文中进行了进一步梳理 当前,在逆转录酶及蛋白酶抑制剂抗HIV治疗中存在诸多缺陷,如不能完全抑制病毒复制,产生依赖药物剂量的毒性以及迅速出现耐药性等,寻求有效的抗HIV药物已迫在眉睫,而在丰富的植物资源中挖掘新的抗病毒制剂则成为令人瞩目的新领域。苦瓜子抗HIV蛋白30（Momordica anti-HIV proteinof 30kD,MAP30）以其显着的抗HIV活性及抗人肿瘤细胞系的作用引起了广泛关注,现综述如下:
孙永涛,白雪帆,SylviaLee-huang[6]（2001）在《新一代抗病毒制剂——MAP30》文中进行了进一步梳理
二、新一代抗病毒制剂——MAP30（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、新一代抗病毒制剂——MAP30（论文提纲范文）
（1）苦瓜甙A的含量分析和苦瓜籽总甙体外抗病毒活性研究（论文提纲范文）
| 图片目录 |
| 表格目录 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 研究论文 |
| 前言 |
| 第一章 苦瓜甙A的分离制备 |
| 引言 |
| 1 材料、试剂和仪器 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 样品准备 |
| 2.2 脱脂和提甙 |
| 2.3 提取液处理 |
| 2.4 柱层析 |
| 2.5 洗脱液处理析晶 |
| 2.6 晶体收集 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 产率 |
| 3.2 产物鉴定 |
| 3.2.1 Libermann burchard反应 |
| 3.2.2 熔点 |
| 3.2.3 HPLC |
| 3.3 分析讨论 |
| 3.3.1 实验操作过程中的注意事项 |
| 3.3.2 产物鉴定结果 |
| 3.3.3 收率 |
| 4 结论 |
| 第二章 苦瓜甙A的含量分析 |
| 引言 |
| 1 材料、试剂和仪器 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 样品准备 |
| 2.1.1 取样 |
| 2.1.2 脱脂和提甙 |
| 2.1.2.1 索氏提取 |
| 2.1.2.2 冷浸 |
| 2.1.2.3 超声波振荡 |
| 2.1.3 样品液定容 |
| 2.2 高效液相色谱(HPLC) |
| 2.2.1 配置标准品溶液 |
| 2.2.2 HPLC |
| 2.2.2.1 色谱条件 |
| 2.2.2.2 方法学考察 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 标准曲线 |
| 3.2 方法学考察 |
| 3.2.1 线性关系 |
| 3.2.2 精密度、准确度和检测限 |
| 3.2.3 回收率 |
| 3.3 样品的检测结果 |
| 3.3.1 数据处理 |
| 3.3.2 三种总甙提取方法的比较 |
| 3.4 样Ⅲ含量分析 |
| 3.4.1 方法 |
| 3.4.2 结果与分析 |
| 3.4.2.1 样品的重新准备 |
| 3.4.2.2 制作标准曲线 |
| 3.4.2.3 样品检测 |
| 3.4.2.4 数据分析 |
| 3.5 八个苦瓜品种种子中苦瓜甙A含量的分析 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第三章 苦瓜籽总甙体外抗病毒活性研究 |
| 引言 |
| 1 材料、试剂和仪器 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 苦瓜子 |
| 1.1.2 病毒株及细胞株 |
| 1.1.3 其它 |
| 1.2 试剂 |
| 1.2.1 普通试剂 |
| 1.2.2 阳性对照药 |
| 1.2.3 细胞培养液 |
| 1.3 仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 苦瓜籽总甙的提取 |
| 2.2 体外抗HSV-Ⅰ病毒 |
| 2.2.1 确定苦瓜籽总甙对Vero细胞的最大无毒浓度 |
| 3.2.2 苦瓜籽总甙抗HSV-Ⅰ病毒的抑制试验 |
| 2.3 体外抗RSV病毒 |
| 2.3.1 确定苦瓜籽总甙对Hep-2细胞的最大无毒浓度 |
| 2.3.2 苦瓜籽总甙对RSV病毒的抑制试验 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 苦瓜籽总甙的提取与鉴定 |
| 3.2 对Vero细胞毒性及抗HSV-Ⅰ活性 |
| 3.3 对Hep-2细胞毒性及抗RSV活性 |
| 3.4 讨论 |
| 4 结论 |
| 论文参考文献 |
| 文献综述 苦瓜化学成分的研究进展 |
| 1 萜类 |
| 1.1 苦瓜甙A |
| 1.2 苦瓜甙B、C、D |
| 1.3 苦瓜甙F1、I、G |
| 1.4 胡萝卜甾醇 |
| 1.5 其它萜类化合物 |
| 2 蛋白质类 |
| 2.1 MAP30蛋白 |
| 2.2 α-苦瓜素和β-苦瓜素 |
| 2.3 其他苦瓜蛋白 |
| 3 有机酸类 |
| 4 生物碱类 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的论文 |
（2）植物蛋白MAP30等药物抗HBV的体外实验（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 药物对细胞的毒性试验 |
| 1.2.2 药物抑制试验 |
| 1.2.3 HBsAg,HBeAg测定 |
| 1.2.4 细胞内外HBV DNA测定 |
| 2 结果 |
| 2.1 细胞毒性测定 |
| 2.2 药物对HepG2.2.15细胞培养上清HBsAg,HBeAg的抑制作用 |
| 2.3 药物对HepG2.2.15细胞培养上清HBV DNA的抑制作用 |
| 2.4 药物对HepG2.2.15细胞内HBV DNA的抑制作用 |
| 3 讨论 |
（3）抗HIV植物蛋白MAP30等药物的体外抗单纯疱疹病毒作用（论文提纲范文）
| 0 引 言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 药物及主要试剂 |
| 1.2 细胞及毒株 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.3.1 病毒滴度的测定 |
| 1.3.2 药物对细胞的毒性试验 |
| 1.3.3 药物抑制试验 |
| 1.3.4 HSV抗原 (囊膜糖蛋白) 检测 |
| 2 结 果 |
| 2.1 细胞毒性试验结果 |
| 2.2 药物对HSV致细胞病变作用的抑制效果 |
| 2.3 药物对HSV抗原的抑制效果 |
| 3 讨 论 |
（4）植物蛋白MAP30的制备及其体外抗病毒活性的实验研究（论文提纲范文）
| 英文缩略语 |
| 摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾1 |
| 核糖体失活蛋白及其生物活性研究进展 |
| 文献回顾2 |
| 新一代抗HIV植物蛋白-MAP30 |
| 研究报告1 |
| 植物蛋白MAP30的分离纯化及其切割超螺旋DNA的活性研究 |
| 研究报告2 |
| 植物蛋白MAP30等药物体外抗HIV-1的实验研究 |
| 研究报告3 |
| 植物蛋白MAP30等药物体外抗单纯疱疹病毒的实验研究 |
| 研究报告4 |
| 植物蛋白MAP30等药物体外抗HBV的实验研究 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 博士在读期间发表与待发表的文章 |
（5）新一代抗HIV植物蛋白-MAP30（论文提纲范文）
| 1 一般性状 |
| 2 酶活性研究 |
| 3 生物学活性 |
| 3.1 抗病毒活性 |
| 3.2 抗肿瘤活性 |
| 3.3 免疫原性及其他 |
| 4 结语 |
四、新一代抗病毒制剂——MAP30（论文参考文献）
- [1]苦瓜甙A的含量分析和苦瓜籽总甙体外抗病毒活性研究[D]. 夏柯. 四川大学, 2006(03)
- [2]植物蛋白MAP30等药物抗HBV的体外实验[J]. 王临旭,孙永涛,杨为松,白雪帆,黄长形,王福祥,王九平,羿伟. 第四军医大学学报, 2003(09)
- [3]抗HIV植物蛋白MAP30等药物的体外抗单纯疱疹病毒作用[J]. 王临旭,孙永涛,杨为松,白雪帆,黄长形,牟丹蕾,张颖,梁雪松. 医学研究生学报, 2003(04)
- [4]植物蛋白MAP30的制备及其体外抗病毒活性的实验研究[D]. 王临旭. 中国人民解放军第四军医大学, 2003(03)
- [5]新一代抗HIV植物蛋白-MAP30[J]. 王临旭,孙永涛,杨为松. 传染病信息, 2002(01)
- [6]新一代抗病毒制剂——MAP30[J]. 孙永涛,白雪帆,SylviaLee-huang. 肝脏, 2001(S1)