一、白细胞介素-12单独或联合白细胞介素-2对人脐血单个核细胞抗肿瘤活性的研究(论文文献综述)
谈洁[1](2021)在《白细胞介素-6、白细胞介素-12对结核性胸腔积液的诊断价值》文中研究说明目的:通过测定不同类型胸腔积液中IL-6和IL-12的浓度水平,探究其对结核性胸腔积液的诊断价值。方法:根据纳入标准,从2019年9月至2021年1月间在吉林大学第二医院呼吸与危重症医学科住院治疗的不明原因胸腔积液患者中,选取行胸腔穿刺引流术或内科胸腔镜检查取得明确病理诊断的患者66例,排除2例不符合本次研究标准的患者,最终纳入64例患者进入本研究。收集患者胸腔积液,采用酶联免疫吸附法测定胸腔积液中IL-6和IL-12浓度。根据结果进行统计学分析,画出受试者工作特殊曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC),根据曲线下面积对比检测指标的诊断效能,并计算出最佳诊断阈值以及相应的灵敏度和特异度,来评价检测指标对疾病诊断价值。结果:1.对4组胸腔积液中的IL-6水平进行比较,其中脓胸组最高为685.447(548.55,811.36)pg/m L,其次为结核性胸腔积液组(简称为结核组)为492.728(330.60,653.16)pg/m L,恶性胸腔积液组(简称为恶性组)134.88(71.72,253.32)pg/m L,类肺炎性胸腔积液组(简称为类肺炎组)为48.55(35.82,68.95)pg/m L。结核组与恶性组、类肺炎组相比差异有统计学意义(p<0.001;p<0.001),结核组与脓胸组相比差异无统计学意义(p=0.063)。ROC曲线结果提示:IL-6的曲线下面积为0.767,通过计算得出胸水中诊断结核性胸腔积液IL-6的最佳临界值为281.031 pg/m L(结核组与类肺炎组、恶性组相比,除外脓胸组),灵敏度和特异度分别为80.77%和87.10%。2.对4组胸腔积液中的IL-12浓度进行比较,其中结核组最高,为4.62(3.90,5.64)pg/m L,其次是脓胸组为4.257(1.37,5.32)pg/m L、类肺炎性组为2.369(0.46,4.07)pg/m L、恶性组为1.319(0.44,2.480)pg/m L,其中结核组与恶性组、类肺炎性组相比差异有统计学意义(p<0.001;p=0.005),结核组与脓胸组相比无统计学意义(p=0.261)。ROC曲线结果提示:IL-12曲线下面积为0.843,通过计算得出胸水中诊断结核性胸腔积液IL-12的最佳临界值为3.758 pg/m L(结核组与恶性组、类肺炎组相比,除外脓胸组),灵敏度和特异度分别为80.77%和90.32%。3.对测得的胸腔积液IL-6、IL-12水平结果进行平行联合检测,其敏感度、特异度是96.15%、65.38%,进行系列联合检测时的灵敏度和特异度分别是80.65%、96.77%。与单独测定胸腔积液中IL-6、IL-12的灵敏度相比,平行联合检测的灵敏度升高,差异具有统计学意义(c2=11.586,p=0.001;c2=11.586,p=0.001);与单独测定胸腔积液中IL-6、IL-12水平相比,系列联合检测时的特异度升高,其中系列联合检测时的特异度与单独测定IL-6水平的特异度相比差异具有统计学意义(c2=6.306,p=0.012);与单独测定IL-12水平的特异度相比差异无明显统计学意义(c2=3.445,p=0.063)。结论:1.结核性胸腔积液中IL-6水平明显高于恶性及类肺炎性胸腔积液组,但与脓胸组差异不明显,若作为结核性胸腔积液的诊断价值的辅助实验室指标时应注意除外脓胸。2.结核性胸腔积液中IL-12水平明显高于恶性组及类肺炎性胸腔积液组,但与脓胸组差异不显着,若作为结核性胸腔积液的诊断价值的辅助实验室指标时应注意除外脓胸。3.胸腔积液中IL-6和IL-12的诊断价值进行平行联合检测时,更有助于诊断结核性胸腔积液;进行系列联合检测时,更有助于排除结核性胸腔积液的诊断,因此,此两项指标对于诊断结核性胸腔积液有意义。
蒋锐沅[2](2021)在《敷和备化方联合TACE术治疗原发性肝癌临床疗效及对血清CHI3L1、IL-6、IL-8等炎症因子影响的观察》文中指出目的:通过文献计量学的方法分析出原发性肝癌相关的炎症因子,以数据挖掘技术证实敷和备化方中的中药均为各名老中医治疗肝郁脾虚型原发性肝癌的高频药物,以网络药理学技术证实敷和备化方中的中药治疗原发性肝癌的作用机制是通过改善原发性肝癌相关炎症微环境实现的,以临床前瞻性研究的方法观察敷和备化方联合肝动脉化疗栓塞术治疗中晚期不可手术的肝郁脾虚型HCC患者的近期疗效、生活质量评分、术后栓塞综合征情况等相关临床疗效指标、安全性指标并观察对原发性肝癌相关炎症因子改善情况。方法:1、以中国知网等中文数据库中收录的对原发性肝癌相关炎症微环境的相关文献作为研究对象,采用文献计量学的方法解析与原发性肝癌关系密切的炎症因子,并以此作为临床研究的靶点。2、采集中国知网等中文数据库中治疗肝郁脾虚型原发性肝癌及原发性肝癌化疗栓塞术后的相关中药方剂,采用数据挖掘的方法分析中国知网等中文数据库中治疗肝郁脾虚型原发性肝癌及原发性肝癌化疗栓塞术的高频中药、中药配伍规律等。3、采用网络药理学的方法分析敷和备化方中治疗原发性肝癌的作为靶点,证实敷和备化方中的中药能够通过改善肝癌炎症微环境的方式治疗原发性肝癌。4、按照纳入标准,选取90例2019年1月至2019年12月间在广西中医药大学第一附属医院肿瘤科及肝病科住院治疗,证型属于肝郁脾虚证并行肝动脉化疗栓塞术治疗的患者,采用随机对照临床试验研究方法,将90例患者随机分为治疗组和对照组,每组各45例,治疗组予敷和备化方联合肝动脉化疗栓塞术治疗,对照组单用肝动脉化疗栓塞术治疗。观察对比两组患者的近期疗效情况、术后栓塞综合征情况、中医证候积分、无进展生存期、血清甲胎蛋白水平、血清肝纤四项水平、FACT-Hep肝胆肿瘤治疗功能评分等近期疗效指标及血清白细胞介素-2、白细胞介素-6等血清炎症因子指标变化情况。结果:1、通过文献计量学的研究方法发现,目前在原发性肝癌相关的炎症因子中,较为热门且关系密切的炎症因子为白细胞介素-2、白细胞介素-6、白细胞介素-8、白细胞介素-12、肿瘤坏死因子-α,目前的体外实验及体验实验均以这些靶点作为主要的研究对象。2、共计收集到153篇中国知网等中文数据库中治疗肝郁脾虚型原发性肝癌及原发性肝癌化疗栓塞术后的相关中药方剂,共计涉及203味中药,使用频次前10味的中药分别是柴胡、白术、白芍、枳实、当归、鳖甲、莪术、甘草、半夏、香附均为敷和备化方中的药物;使用频率前5的药对分为是柴胡—白术、柴胡—白芍、白术—白芍、白芍—当归、白芍—鳖甲;置信度排名前5的药物关联组合为柴胡—白术→白芍、白术—茯苓→白芍、柴胡—白芍→鳖甲、枳实—白芍→党参、枳实—莪术→鳖甲,分析所得数据均与敷和备化方的方剂配伍、药物组成基本相同。3、通过以敷和备化方中的17味中药作为研究对象,应用网络药理学的方法对敷和备化方中药物的有效成分与原发性肝癌的作用靶点相匹配,共匹配到57个潜在靶点,其中部分靶点为白细胞介素-2、白细胞介素-6、白细胞介素-8、白细胞介素-12或其上游蛋白。因此,敷和备化方治疗原发性肝癌的作用机制可能是通过改善炎症微环境中的白细胞介素-2、白细胞介素-6、白细胞介素-8、白细胞介素-12等炎症因子表达水平实现的。4、两组患者在术前1天的年龄、性别、TNM分期、肝功能分级、有无乙肝、有无血管侵犯、有无动脉静脉瘘等基线资料相比无明显差异(P>0.05)。(1)近期疗效情况:治疗组患者的客观缓解率为43.4%,疾病控制率为86.7%;对照组患者客观缓解率为32.2%,疾病控制率88.9%为88.9%,两组患者的客观缓解率差异有统计学意义(P<0.05)。(2)术后栓塞综合征情况:两组患者术后未发生严重或致死的栓塞综合征案例,治疗组患者的发热、胃肠道反应、一过性肝功能损害的发生率均显着低于对照组(P<0.05)。(3)血清肝纤四项及甲胎蛋白水平:两组患者术后3月的血清肝纤四项及甲胎蛋白表达水平均较前显着降低(P<0.05);且治疗组术后3月血清肝纤四项及甲胎蛋白表达水平均较同期对照组显着降低(P<0.05)。(4)FACT-Hep肝胆肿瘤治疗功能评分情况:两组患者术后3月的生理领域、心理领域、社会领域、功能领域、肿瘤领域及总积分均较术前1天显着降低(P<0.05);且治疗组术后3月生理领域、心理领域、社会领域、功能领域、肿瘤领域及总积分较同期对照组显着降低(P<0.05)。(5)中医证候积分:两组患者术后3月的各项肝郁脾虚相关中医证候积分及总积分均较术前1天有显着降低(P<0.05);且治疗组患者术后的肝郁脾虚相关中医证候积分及总积分均较同期对照组降低更显着(P<0.05)。(6)无进展生存时间及治疗失败时间:治疗组中位PFS为6.2[95%CI(2.5,4.6)]个月;对照组中位PFS为4.2[95%CI(3.9,7.8)]个月。治疗组TTUP为14.2[95%CI(11.9,15.3)]个月,对照组TTUP为13.7[95%CI(12.8,14.2)]个月。两组患者无进展生存时间具有统计学差异(P<0.05),治疗失败时间差异无统计学意义(P>0.05)。(7)血清炎症因子水平情况:两组患者术后血清白细胞介素-2、血清白细胞介素-12水平均较术前1天显着提高(P<0.05),血清白细胞介素-6、白细胞介素-8、血清肿瘤坏死因子-α及血清壳多糖酶3样蛋白1均较术前1天显着减低(P<0.05);且与同期对照组相比,治疗组术后3月的血清白细胞介素-2水平提高更显着(P<0.05),血清血清白细胞介素-6、血清白细胞介素-8、血清白细胞介素-12、血清肿瘤坏死因子-α及血清壳多糖酶3样蛋白1降低更显着(P<0.05)。结论:1、通过文献计量学研究发现,原发性肝癌相关的炎症微环境中研究较为热门的炎症因子为白细胞介素-2、白细胞介素-6、白细胞介素-8、白细胞介素-12及肿瘤坏死因子-α,并以此为靶点开展中医药改善原发性肝癌炎症微环境的相关实验研究。2、通过数据挖掘研究发现,治疗肝郁脾虚型肝癌及原发性肝癌化疗栓塞术的药物主要以健脾疏肝、清热利湿、化瘀解毒为根本大法,在组方时采用核心药对能够实现提高临床疗效的目的。3、通过网络药理学研究发现,敷和备化方中的相关中药能够通过对白细胞介素-2、白细胞介素-6、白细胞介素-8、白细胞介素-12等炎症因子及其上游蛋白的治疗效果达到改善原发性肝癌炎症微环境的目的,实现对原发性肝癌的治疗效果。4、敷和备化方联合肝动脉化疗栓塞术治疗中晚期不可手术的原发性肝癌能够有效提高客观缓解率,改善患者的中医症状,降低FACT-Hep肝胆肿瘤治疗功能评分,减少术后栓塞综合征的发生情况,降低血清肝纤四项及甲胎蛋白水平,改善血清白细胞介素-2、血清白细胞介素-6、血清白细胞介素-8、血清白细胞介素-12、血清肿瘤坏死因子-α及血清壳多糖酶3样蛋白1的表达水平,具有较高的临床疗效和应用前景。
莫灿龙[3](2020)在《毛兰素对角质细胞增殖和凋亡的影响及树状介孔硅透皮给药系统的研究》文中指出银屑病作为一种慢性的,反复发作的,难以根治的皮肤疾病,它的病理特征主要表现为角质细胞的过度增殖以及异常的分化。毛兰素作为一种提取自鼓槌石斛的联卞类小分子量天然化合物,在肿瘤方面显示了强大的增殖抑制和抗血管生成的功能。然而,关于毛兰素在对于银屑病致病当中具有重要地位的角质细胞的相关作用,目前仍然没有相关的报道。于此同时,越来越多的纳米药物载体应用于皮肤局部给药方面,大大增加了药物在皮肤疾病上的治疗效果和减少了药物进入到系统循环而引起的不必要毒性。而无机材料中的介孔硅纳米载体,由于其具有比表面积大,易于修饰,高度的生物相容性和良好的生物降解性等特点,在近几年尤其是皮肤递送方面,出现了不少的报道。因此,本文一方面探讨毛兰素对人永生化角质细胞HaCaT细胞的增殖功能和凋亡方面的作用,以及探讨其潜在的药理机制,另一方面为了增强毛兰素的抑制细胞增殖能力,以及解决毛兰素水溶性差,难以到达皮肤组织发挥作用的缺点,我们构建了树状介孔硅透皮递送纳米载体。本文使用MTT试验评价毛兰素对HaCaT细胞的细胞活力影响,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞凋亡分析法分析毛兰素对HaCaT细胞的凋亡影响,使用DCFH-DA荧光探针检测了HaCaT细胞的细胞内活性氧ROS的水平变化,使用western blot法测定毛兰素对HaCaT细胞的凋亡相关蛋白cleaved PARP与cleaved caspase-3的生成水平影响,以及检测了JNK/c-Jun信号通路和AKT/m TOR信号通路的蛋白表达水平变化。我们通过一步双相方法合成两种具有相似粒径但不同孔径的中心放射性中空通道的树状介孔硅,并对其理化性质进行表征,包括平均粒径、zeta电位、高分辨率透射电子显微镜TEM下的外观形貌、氮气吸附脱附曲线等。我们利用旋转蒸发方法将毛兰素载入到树状介孔硅里,并对其进行上述表征,通过傅里叶变换红外光谱FTIR和固定X射线衍射光谱XRD,以探讨毛兰素与树状介孔硅的结合方式,通过热重分析TGA和超高效液相色谱UPLC测量毛兰素的含量,利用透析袋法测定树状介孔硅载毛兰素的体外释放行为,并利用垂直式Franz扩散池法测定载药树状介孔硅卡波姆胶的透过猪皮的性能。我们通过合成FITC荧光标记的树状介孔硅,利用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分析其细胞摄取的行为,并探讨其可能的细胞摄取途径。然后通过MTT法、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞凋亡分析法、JC-1染色法和fluo-4 AM染色法比较负载毛兰素的树状介孔硅和单纯的毛兰素对HaCaT细胞的存活率、细胞凋亡率、线粒体膜电位和细胞内钙离子浓度的影响。并通过western blot法继续比较两者对线粒体介导的凋亡信号通路(Bcl-2、Bax、cytochrome c,cleaved caspase-3和cleaved PARP)和内质网应激信号通路(PERK、ATF6、IRE1α和CHOP)的影响。最终我们发现,毛兰素对HaCaT细胞的增殖能力具有抑制作用,并且能够促进HaCaT细胞的凋亡,增加凋亡相关蛋白cleaved PARP和cleaved caspase-3的生成,上调HaCaT细胞内的活性氧ROS水平,可能通过活性氧ROS介导的JNK/c-Jun信号通路和AKT/m TOR信号通路来发挥抑制增殖和促进凋亡的作用。合成出来的两种树状介孔硅的平均粒径均在160nm左右,孔径分别为3.5nm和4.6nm,载药率大约都在50%左右,并且通过表征分析得知毛兰素不仅分布在树状介孔硅的孔道里面,也有部分处于树状介孔硅的表面。和纯毛兰素组相比,树状介孔硅组能够很好地增加毛兰素的皮肤滞留量,并且树状介孔硅组能够降低毛兰素的皮肤透过量。体外药物释放实验表明毛兰素从树状介孔硅里释放出来主要分为两个阶段,爆发释放和缓慢释放阶段,最终药物累积释放量均达到70%以上。在细胞摄取行为方面,大孔径树状介孔硅的细胞摄取量比小孔径树状介孔硅的细胞摄取量大概高出3倍左右。小孔径树状介孔硅能够分别通过网格蛋白介导的细胞内吞途径,细胞膜陷穴蛋白介导的细胞内吞途径和Na+/H+离子交换受体介导的大胞饮三条途径进入到HaCaT细胞里,而大孔径树状介孔硅则通过网格蛋白介导的细胞内吞途径进入到HaCaT细胞里。和毛兰素组比较,载药树状介孔硅能够增强毛兰素的抗增殖和促凋亡作用,并且大孔径的效果相对明显。毛兰素能够影响HaCaT细胞里线粒体膜电位变化和胞内钙离子浓度,可能通过调控线粒体信号通路和内质网应激信号通路来发挥促进HaCaT细胞的凋亡作用,并且树状介孔硅作为药物载体,能够增强此过程。
刘中兵[4](2020)在《川陈皮素抑制IL-21/IL-21R介导类风湿关节炎的炎症反应研究》文中研究表明第一部分:川陈皮素抑制IL-21/IL-21R介导类风湿关节炎的炎症反应体外研究目的:充分探讨川陈皮素靶向IL-21调控类风湿关节炎免疫应答过程,确定其与IL-21/IL-21R及JAK1/STAT3信号通路在调控过程中的介导关系,确定川陈皮素在类风湿关节炎发生、发展过程中的价值性,为后期临床治疗类风湿关节炎提供研究方向。材料与方法:我们使用的是RASFs细胞系,即MH7A细胞,它来自RA患者,被认为是RA的主要效应细胞。MH7A细胞系使用含10%胎牛血清的1640完全培养基于37℃、5%CO2、100%的恒温培养箱中培养,具体分组如下:Control组(不做处理);IL-21组(50 ng/ml IL-21处理MH7A细胞);IL-21+Nobiletin 25μM组(50ng/ml IL-21+25μmol/L Nobiletin处理MH7A细胞);IL-21+Nobiletin 50μM组(50ng/ml IL-21+50μmol/L Nobiletin处理MH7A细胞);MH7A细胞干预结束后,继续培养48小时后进行相关项目分析:细胞因子分析:ELISA检测各组细胞中IL-6、TNF-α、HMGB1、MMP-3、MMP-13表达浓度分析;各组MH7A细胞ROS(活性氧)检测;各组MH7A细胞4-HNE(4-羟基壬烯醛)检测;RT-PCR检测IL-21R、IL-6、TNF-α、MMP-3、MMP-13表达浓度分析;Western-blot检测IL-21R及JAK1/STAT3信号通路关键蛋白表达分析;统计数据,给出结论。结果:ELISA化学检测:IL-6、TNF-α:各组MH7A细胞中的表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,各组数据比较,P<0.05,差异具有统计学意义;HMGB1蛋白:各组MH7A细胞中的表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,各组数据比较,P<0.05,差异具有统计学意义;MMP-3、MMP-13:各组MH7A细胞中的表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,各组数据比较,P<0.05,差异具有统计学意义;4-HNE检测:各组MH7A细胞中的表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,各组数据比较,P<0.05,差异具有统计学意义;ROS检测:各组MH7A细胞中的ROS表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,各组数据比较,P<0.05,差异具有统计学意义;RT-PCR检测:IL-21R:各组MH7A细胞m RNA表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,各组数据比较,P<0.05,差异具有统计学意义;IL-6、TNF-α:各组MH7A细胞中的表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,各组数据比较,P<0.05,差异具有统计学意义;MMP-3、MMP-13:各组MH7A细胞中的表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,各组数据比较,P<0.05,差异具有统计学意义;Westwen-blot检测:IL-21R:各组MH7A细胞蛋白浓度表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,各组数据比较,P<0.05,差异具有统计学意义;JAK1/STAT3信号通路:各组MH7A细胞中JAK1、STAT3蛋白表达差异性较小,P>0.05,差异不具有统计学意义;在其磷酸的表达过程中,各组MH7A细胞中的表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin25μM<IL-21,各组数据比较,P<0.05,差异具有统计学意义。结论:(1)川陈皮素可以靶向IL-21受体对MH7A细胞做出免疫应答过程,明显降低MH7A滑膜细胞内白细胞介素以及基质金属蛋白酶等浓度变化,缓解MH7A滑膜细胞的炎性进展过程,促进其修复过程,且随着川陈皮素浓度增加,这种趋势更加明显。(2)川陈皮素可以靶向IL-21受体对细胞经典信号通路JAK1/STAT3进行调控应答,降低细胞信号通路关键蛋白JAK1及STAT3等蛋白的磷酸化水平,减缓炎症过程,与上文的结论具有一致性。由此可以得知,川陈皮素在类风湿关节炎的发生、发展过程中可能具有潜在的研究价值,为后期临床治疗类风湿关节炎提供靶向研究导向。第二部分:川陈皮素抑制IL-21/IL-21R介导类风湿关节炎的炎症反应体内研究目的:在体外研究的基础上,体内研究进一步探讨了川陈皮素靶向IL-21调控类风湿关节炎的免疫应答过程,从而明确了其与IL-21/IL-21R及JAK1/STAT3信号通路在调控过程中的介导关系,表明了川陈皮素在抗类风湿关节炎症作用方向的价值性,为后期临床治疗类风湿关节炎提供研究方向。材料与方法:选取48只Wistar大鼠适应性饲养1周后将其随机分成4组,除去对照组大鼠,其余建立CIA模型;具体分组如下:Control组(大鼠不做处理);IL-21组(CIA模型+50 ng/ml IL-21,腹腔注射);IL-21+Nobiletin 25μM组(CIA模型+50 ng/ml IL-21+25μmol/L Nobiletin,腹腔注射);IL-21+Nobiletin 50μM组(CIA模型+50 ng/ml IL-21+50μmol/L Nobiletin,腹腔注射);继续饲养6周后将大鼠处死,进行相关项目分析:各组大鼠模型成功率检测:大体观察、体重指数、关节炎、关节指数分析;形态学分析:各组大鼠HE染色分析;ELISA检测分析:IL-21R、TNF-α、IL-6、HMGB1、MMP-3及MMP-13蛋白;RT-PCR检测分析IL-21R、TNF-α、IL-6、MMP-3及MMP-13m RNA表达分析;Western-blot检测分析IL-21R、TNF-α、IL-6、MMP-3及MMP-13及JAK1/STAT3通路分析,分析数据,给出结论。结果:模型成功率检测:临床表现:对照组大鼠精神状态较好,体重体现出稳步增长的趋势,毛发光泽性较差;模型组大鼠意志沉迷,进食量逐渐减少,毛发光泽性,2周后处于无法负重的状态;体重变化:两周后各组大鼠的体重变化趋势为IL-21<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21+Nobiletin 50μM<Control,各组之间体重比较,差异具有统计学意义(P<0.05);关节炎发病率/关节指数:各组关节炎发病率比较趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,数据分析差异具有统计学意义(P<0.05).形态学分析:HE染色:对照组大鼠踝关节组织细胞排列密集,形态规则,轮裹明显;模型组大鼠踝关节组织细胞层变厚,白细胞和淋巴细胞大量充斥,连续性减弱;川陈皮素干预后,大鼠的踝关节组织细胞排列密集性加强,细胞形态趋于正常。ELISA化学检测:IL-6、TNF-α:表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,P<0.05,差异具有统计学意义;HMGB1蛋白:表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,P<0.05,差异具有统计学意义;MMP-3、MMP-13:表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,P<0.05,差异具有统计学意义。RT-PCR检测:IL-21R:表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin25μM<IL-21,P<0.05,差异具有统计学意义;IL-6、TNF-α:表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,P<0.05,差异具有统计学意义;MMP-3、MMP-13:表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,P<0.05,差异具有统计学意义。Westwen-blot检测:IL-21R:表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,P<0.05,差异具有统计学意义;IL-6、TNF-α:各组MH7A细胞中的表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,P<0.05,差异具有统计学意义;MMP-3、MMP-13:表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,P<0.05,差异具有统计学意义;JAK1/STAT3信号通路:各组MH7A细胞中JAK1、STAT3蛋白表达差异性较小,P>0.05,差异不具有统计学意义;在其磷酸的表达过程中,表达趋势为Control<IL-21+Nobiletin 50μM<IL-21+Nobiletin 25μM<IL-21,P<0.05,差异具有统计学意义。结论:(1)川陈皮素可以较好的改善模型组大鼠关节炎效应,明显改善大鼠的精神状态,降低大鼠的类风湿关节炎症的程度及关节指数,为后续的研究提供帮助。(2)与体外研究结果一致,川陈皮素改善大鼠类风湿关节炎症的作用主要是通过靶向机体IL-21R浓度变化进而调控JAK1/STAT3的活性状态,充分降低白细胞介素、肿瘤坏死因子-α、高迁移率蛋白表达,逐渐恢复关节软骨基质合成及分解的平衡状态,加速类风湿关节炎疾病的康复过程,达到对类风湿关节炎的治疗效果,给予临床一定启发。
郑义[5](2019)在《东方栓孔菌多糖的分离纯化、结构解析与生物活性研究》文中研究说明多糖为大型真菌的主要活性成分,因具有免疫调节、抗肿瘤和抗氧化等生物活性而被广泛关注。东方栓孔菌作为传统中药材,主治肺炎、咳嗽痰喘、肺结核、支气管炎等多种肺部疾病,目前有关东方栓孔菌多糖的研究鲜有报道。本论文从提取工艺、分离纯化、理化性质、结构表征、抗氧化、免疫调节、抗炎和抗肿瘤活性等方面,深入研究了东方栓孔菌多糖。通过响应面法优化了东方栓孔菌多糖的超声辅助提取工艺和超声-微波辅助提取工艺。超声辅助提取东方栓孔菌多糖的最佳工艺参数为30 mL/g,超声功率110 W,提取温度40℃,提取时间42 min,在此条件下多糖得为7.49±0.14%(n=3)。超声-微波辅助提取东方栓孔菌多糖的最佳工艺参数为液料比28 mL/g,超声功率114 W,提取时间11 min,在此条件下多糖得率为7.52±0.12%(n=3)。与其他提取方法相比,超声-微波辅助提取法用时最短,得率最高,更适用于东方栓孔菌多糖的提取。通过DEAE-纤维素和Sephadex G-100色谱纯化东方栓孔菌粗多糖,得到了一个主要的纯化组分,命名为TOP-2。理化性质与红外光谱分析表明TOP-2为含有硫酸基的酸性多糖;高效凝胶渗透色谱测得TOP-2相对分子质量为6.3×104;GC-MS法测得TOP-2由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,摩尔比为1:3.45:5.77:5.79;刚果红试验及透射电子显微镜分析表明TOP-2具有三股螺旋构象。理化性质及结构分析提示TOP-2可能具有良好的生物活性。以清除1,1-二苯基-2-苦基肼基(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基能力、还原力、清除超氧阴离子能力和螯合铁离子能力为指标,评价了TOP-2的体外抗氧化活性;采用急性酒精性肝损伤小鼠模型评价了TOP-2的保肝作用。结果表明,TOP-2具有较好的体外抗氧化活性。TOP-2能降低酒精性肝损伤小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST)活性,拮抗酒精所致小鼠肝脏超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)活性的下降,降低丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量,抑制肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平。结果提示TOP-2可能是通过提高体内抗氧化酶活性、抑制TNF-α和IL-1β等促炎因子表达、直接清除自由基和螯合金属离子等途径发挥其对急性酒精性肝损伤小鼠的保护作用。构建环磷酰胺致免疫抑制小鼠模型评价了TOP-2对环磷酰胺致免疫抑制小鼠的保护作用。结果表明,TOP-2能够恢复环磷酰胺致免疫抑制小鼠的脾脏、胸腺、心脏、肝脏和肾脏等脏器系数,改善免疫抑制小鼠巨噬细胞的吞噬能力,激活巨噬细胞NO的释放,增加T、B淋巴细胞增殖,增强自然杀伤(natural killer,NK)细胞和细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)的毒性作用,恢复血清细胞因子白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)和免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)水平,提高总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、SOD、CAT和GSH-Px活性,降低MDA含量。TOP-2通过免疫调节和抗氧化活性发挥其对环磷酰胺致免疫抑制小鼠的保护作用。评价了TOP-2对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抗肿瘤与免疫调节活性。TOP-2对Lewis肺癌有较好的抑制作用,能够恢复Lewis肺癌小鼠体重、脾脏系数和胸腺系数,活化Lewis肺癌荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞,刺激脾淋巴细胞增殖,提高细胞因子IL-2、白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)和TNF-α表达水平,通过与Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)结合,激活核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路。TOP-2通过免疫调节活性发挥其对Lewis肺癌小鼠的抗肿瘤作用。构建大气细颗粒物(fine particulate matter,PM2.5)致肺损伤小鼠模型,采用细胞学、分子生物学和生化分析方法,评价了TOP-2对PM2.5致肺损伤小鼠的保护作用。TOP-2能够减轻PM2.5致肺损伤小鼠的肺水肿程度,缓解肺损伤小鼠炎性损伤,减少中性粒细胞募集,缓解PM2.5对巨噬细胞的毒效应,维持肺泡毛细血管膜完整性,减少支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)和酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase,ASM)渗漏,抑制TNF-α、IL-1β和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的释放,缓解PM2.5致肺损伤小鼠的氧化应激,提高肺组织SOD、CAT和GSH-Px活性,降低MDA、蛋白质羰基(protein carbonyl group,PCG)和8-羟基-2’-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHdG)含量,增加肺组织核因子NF-E2相关因子(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)和血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白的表达,抑制NLR家族蛋白3(NLR family pyrin domain-containing 3,NLRP3)炎症小体活化。TOP-2通过抗氧化和抗炎活性发挥其对PM2.5致肺损伤小鼠的保护作用,其保护机制与激活Nrf2/HO-1通路和抑制NLRP3炎症小体活化相关。该论文有图60幅,表29个,参考文献398篇。
李梅慧[6](2019)在《《下一代肿瘤治疗的新方法:放疗与免疫治疗的结合》翻译报告》文中进行了进一步梳理医学英语在医学国际交流扮演重要的角色。对最新医学英语文章的翻译,有助于推进中国现代医学的发展。对医学英语的研究可以促进医学英语翻译。目前大多数医学翻译报告以奈达的功能对等理论为指导,从词汇,句子语法,语篇层面上分析如何用翻译技巧译成目的语。不过存在以下不足:一,缺乏对医学英语词汇系统的分析;二,对于如何翻译医学英语词汇中的两栖词汇,则无详细介绍;三,缺乏对医学英语中常见的非谓语动词与定语从句的特点和翻译分析。针对这一现状,该报告研读现有医学英语翻译研究,基于汉译一篇英语论文的翻译实践,系统总结医学英语词汇以及句子的特点和难点,并探讨解决医学英语翻译难点的方法。该翻译实践报告运用纽马克的文本类型理论,分析医学文本属于信息类型文本,其主要的功能是客观准确地传递医学信息,促进医学信息的交流。为了做到准确客观地传递医学信息,最基本的是要正确翻译词汇与句子。从词汇层面分析,医学英语词汇分为普通词汇,两栖词汇以及纯医学词汇。这三类词汇当中,翻译难点在于两栖词汇与纯医学词汇。两栖词汇指可用于医学领域的普通词汇。两栖词汇用于医学领域时,具有独特的医学含义。纯医学词汇指仅用于医学领域的词汇,并且经常以缩略语出现。从句型层面分析,医学英语句子的特点是被动语态,非谓语动词与定语从句的频繁使用。这三个特点里面,难点在于对非谓语动词以及定语从句的翻译。由于一个句子可以有多个非谓语,非谓语动词的翻译难点在于用汉语清晰地将各成分之间的逻辑关系表达出来。定语从句的翻译难点是确定其修饰的先行词。为了快速准确翻译纯医学词汇,使用的翻译工具是电子词典。部分两栖医学词汇的医学含义可以通过知网翻译软件查找。有些两栖医学词汇的医学含义需要通过电子词典和相关的医学网站进行确定。非谓语动词和定语从句的翻译难点则需要结合语法知识与医学知识。这些翻译工具和翻译方法有助于提高医学翻译的效率。
吕洋超[7](2019)在《半夏泻心汤对过表达IL-12基因BMSCs靶向治疗胃癌的增效作用研究》文中研究表明目的构建慢病毒介导过表达IL-12基因的BMSCS,观察IL-12基因转染的BMSCs对胃癌移植瘤模型裸鼠的抑瘤作用,探讨半夏泻心汤与IL-12基因转染BMSCs联合对胃癌移植瘤模型裸鼠的抑瘤作用是否有协同增效作用。方法1、无菌条件下取裸鼠股骨,充分冲洗骨髓腔,加入适量含10%胎牛血清的低糖DMEM,离心5~10 min弃上清,加完全培养基培养。当细胞汇合达90%以上时0.25%胰酶-EDTA消化传代。取融合良好的P3代BMSCs,消化、离心,弃上层液体,加入一抗、二抗,孵育,重悬细胞后上FCM检测。2、采用LV5空载慢病毒及IL-12过表达LV5慢病毒转染BMSCs细胞,48h及72小时后,用倒置荧光显微镜观察BMSCs细胞转染的情况,计算慢病毒转染BMSCs的效率。经嘌呤霉素加压筛选,并用荧光定量PCR检测BMSCs细胞中IL-12的表达,建立稳定过表达IL-12基因的BMSCs细胞。3、取SPF级健康BALB/C裸鼠,于裸鼠腋窝皮下接种人胃癌BCG-823细胞,建立人胃癌移植瘤裸鼠模型。4、将人胃癌移植瘤裸鼠随机分为成瘤组(模型组)、LV5空载慢病毒转染BMSCs组(空载组)、LV5-IL-12过表达慢病毒转染BMSCs组(转染组)、半夏泻心汤干预组(药物组)、半夏泻心汤联合LV5-IL-12过表达慢病毒转染BMSCs组(联合组)。模型组给予裸鼠生理盐水灌胃,空载组将空载慢病毒转染的BMSCs给予裸鼠尾静脉注射,转染组将IL-12基因过表达慢病毒转染BMSCs给予裸鼠尾静脉注射,药物组将半夏泻心汤灌胃给药,联合组在尾静脉注IL-12过表达慢病毒转染BMSCs的同时,给予半夏泻心汤灌胃给药,连续干预13d。5、各组经干预后,观察裸鼠一般情况,隔日计算各组胃癌移植瘤裸鼠肿瘤体积、体重及生长情况的变化,计算抑瘤率。6、将各组胃癌移植瘤瘤体组织进行包埋、切片、贴片处理,通过免疫荧光染色,采用激光共聚焦显微镜下观察BMSCs在肿瘤组织的分布,进行细胞计数,计算BMSCs在肿瘤组织的分布。7、将各组胃癌移植瘤瘤体组织进行包埋、切片,制备TUNEL反应混合液,添加细胞核染色液,苏木素染色,封固,光镜下观察肿瘤细胞凋亡情况,并计算凋亡指数(AI)。8、将各组胃癌移植瘤瘤体组织进行包埋、切片,加入一抗、二抗,孵育,中性树胶封片。采用免疫组织化学法检测瘤体组织Bax、Bcl-2蛋白表达,并进行平均光密度值测定分析。结果1、BMSCs培养7天后细胞以达70%-80%融合,细胞为典型的长梭形,并呈集落生长。传代以后,细胞增殖活力强,细胞形态比较均一的长梭形、多角形细胞,其他形态的细胞极少见,达到传代标准。第3代BMSCs的CD44阳性表达为96.68%,而CD34阳性表达极低,仅为1.25%。2、BMSCs细胞转染48h以后,普通光镜下细胞形态规则,生长良好,荧光显微镜下空载慢病毒转染的BMSCs及IL-12基因过表达转染的BMSCs绿色荧光强度增强。72h以后细胞融合现象明显,绿色荧光强度达到最高,转染效率可达90%。3、Q-PCR结果表明,经慢病毒转染后IL-12 m RNA稳定表达于BMSCs中,IL-12m RNA的表达较正常BMSCs、空载慢病毒转染BMSCs组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),而正常BMSCs和空载慢病毒转染BMSCs组IL-12 m RNA的表达无显着差异(P>0.05)。4、裸鼠成瘤显示,第3d后裸鼠腋下逐渐出现肿块,并逐渐增大,57d肿块无明显变化,第9d后肿块明显增加,第13d各组裸鼠瘤块均显着增加。与模型组及空载组比较,转染组、药物组及联合组瘤块增加较小,有显着统计学意义(P<0.05)。与转染组、药物组比较,联合组瘤块增加最小,有显着统计学意义(P<0.05)。与模型组及空载组比较,转染组、药物组及联合组的抑瘤率分别为36.9%、42.3%、60.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。5、通过免疫荧光染色,激光共聚焦结果显示,空载组、转染组及联合组的肿瘤组织中均可观察到蓝色荧光,分布比较密集。与空载组比较,转染组及联合组肿瘤组织BMSCs的分布明显增多,差异有显着统计学意义(P<0.05);与转染组比较,联合组显着增多,差异有显着统计学意义(P<0.05)。6、TUNEL结果显示,转染组、药物组及联合组胃癌荷瘤裸鼠瘤体组织中出现大量细胞凋亡小体(褐色颗粒),模型组及空载组仅出现少量细胞凋亡小体。与模型组及空载组比较,转染组、药物组及联合组凋亡指数均明显增加,差异有统计学意义(P>0.05)。与转染组及药物组比较,联合组细胞凋亡小体明显增多,凋亡指数明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)7、免疫细胞化学结果显示,模型组及空载组有少量Bax阳性细胞,胞浆呈现浅黄褐染色,细胞形态呈圆形。转染组、药物组及联合组Bax阳性细胞明显增多,可见成片的Bax阳性细胞,胞浆呈黄褐色。与模型组及空载组比较,Bax蛋白表达量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。联合组Bax蛋白表达量明显高于转染组及药物组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组及空载组有大量Bcl-2阳性细胞,可见成片的阳性细胞表达,胞浆呈现浅黄褐染色,细胞形态呈圆形。转染组、药物组及联合组Bcl-2阳性细胞明显减少。与模型组及空载组比较,Bcl-2蛋白表达量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),联合组Bcl-2蛋白表达量明显低于转染组及药物组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1、本实验成功构建了慢病毒介导过表达IL-12基因转染的BMSCs。2、慢病毒空载的BMSCs及过表达IL-12基因的BMSCs均可靶向归巢到胃癌裸鼠移植瘤瘤体组织。3、过表达IL-12基因的BMSCs及半夏泻心汤干预对胃癌裸鼠移植瘤均有一定的抑制作用,二者联合干预有明显的协同增效作用,其抑制作用与降低Bcl-2基因表达,升高Bax基因表达,诱导胃癌细胞凋亡有关。
王冬明[8](2019)在《单个核细胞分离及CIK细胞诱导培养的方法优化》文中研究说明细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine Induced Killer,CIK),是由多种细胞因子如白细胞介素-2(IL-2)、干扰素(IFN)和CD3单克隆抗体等诱导而成的对多种肿瘤具有杀伤活性的细胞毒性T细胞。近年来,随着现代医学的发展,医疗技术不断的取得振奋人心的进步,以生物技术为基础的新兴治疗手段,尤其是细胞治疗发展迅速,其中CIK细胞治疗的应用更为广泛。等密度离心法是一种在细胞生物学中广泛用于富集特定细胞的技术方案,由于所选择的液体介质的密度等于或略大于欲富集的目的细胞,因此目的细胞在离心作用下,无论离心时间长短,都将无法穿透液体介质的界面沉到离心容器的底部,进而在液体介质的界面处(即平衡位置)得到富集。典型的等密度离心法是利用单次密度梯度离心法纯化血液或骨髓样本中的淋巴细胞,其中所采用的液体介质通常是含有聚蔗糖-碘化物组合配方的具有生理渗透压的水溶液。本研究通过收集脐带血样本,研究单个核细胞得率和纯度以及CIK细胞得率,优化单个核细胞分离方案,并系统性地优化CIK细胞制备方案。主要完成以下工作。1.建立脐带血样本库。根据脐带血血量的不同,选择性地收集新生儿脐带血样本近30例,其中脐带血血量不超过50 m L的样本10例,血量在50 m L至100m L之间的样本10例,血量大于100 m L的样本10例。将以上样本进行分组,考察不同样本量对单个核细胞分离的影响,为后续分离条件优化及CIK细胞诱导条件优化奠定了坚实的基础,具有重要意义。2.采用密度离心法收集脐带血中单个核细胞。发现Ficoll-PaqueTM PLUS对单个核细胞分离效果优于Nyco PrepTM 1.077,与DH分离介质的分离效果无明显差异;按照稀释脐血样本与分离液1:1的比例铺血,采用800×g,15 min的离心参数,能够减少时间成本;脐带血血量与血液保存液比例越大,单个核细胞的得率和纯度越高。3.采用CIK细胞诱导培养,在6孔板内加入3*10^6细胞,加入含1000 U/m L INF-γ无血清培养基,37℃,5%CO2培养24 h,加入50 ng/m L anti-CD3、300U/m L IL-2,继续培养,3天后,进行传代,每孔接种细胞3*10^6个,补充IL-2至300 U/m L。分别在第6天和第14天对CIK细胞进行流式分析,发现脐带血血量与血液保存液比例对诱导培养后的CIK细胞纯度无明显影响。以上结果表明羟乙基淀粉和泛影酸钠组合的分离液,更容易实现临床治疗用途,在采集脐带血时,提高脐带血血量与血液保存液比例,可以提高单个核细胞的得率和纯度,进而诱导培养出更多的CIK细胞用于治疗,能够明显改善治疗效果,对临床应用有重大意义。
王锋[9](2018)在《原位基因修饰联合过继性T细胞在治疗黑色素瘤治疗中的机制及抗肿瘤作用》文中研究表明一、目的:为了增加肿瘤疫苗的免疫原性,打破机体对肿瘤的免疫耐受,将异种蛋白基因导入肿瘤细胞可以增加肿瘤的免疫原性。虽然我们的前期研究在动物实验中显示活瘤苗诱导的免疫保护效果确切,但活瘤苗因为具有在体内发生移植瘤的可能性,因而其临床应用受到了极大的限制,故此,本研究旨在找到一种既能避免应用活瘤苗,又能发挥出活瘤苗疗效的方法。二、方法:1、ESAT-6和IL-21穿梭载体的构建。合成ESAT-6和IL-21基因全长,合成物经Sanger测序证实。2、腺病毒重组腺病毒载体的构建。通过使用QiaGa-MaXi预处理试剂盒提取PAD简易载体,然后加入 pStuth-ESAT-6 载体、pStuthTy-IL-21 载体和pStuthTel-ESAT-6IRES-IL-21 载体。3、腺病毒的制作:(1)原代腺病毒的产生:解冻一瓶293A细胞,常规传代293A细胞两次,将放入培养皿在37℃培养箱中培养。(2)腺病毒的增殖:解冻一瓶293A细胞,培养基培养。隔夜,用5种MOI原代腺病毒抗原转导细胞。将病毒放在培养基中,轻轻摇动培养皿,使病毒均匀扩散,然后提取病毒。(3)腺病毒的纯化:将病毒上清液转移到超离心管中,重复离心浓缩腺病毒,储存于-80℃。4、腺病毒滴定法:用抗六邻体抗体进行免疫细胞化学方法对本研究所制备的腺病毒进行免疫细胞化学滴定,并计算每个孔中阳性细胞的平均数目,计算每孔中的感染单位(PFU)/ml如下:(?)5、腺病毒介导B16F10细胞的转导。使用不同的MOI应用于B16F10细胞进行转导,过48小时后,荧光显微镜下观察GFP的表达。并应用Western blot技术检测转染细胞IL-21、ESAT-6蛋白表达情况。6、ESAT-6-T细胞的制作:使用试剂盒从鼠脾脏提取的树突状细胞分离出小鼠DC。应用含有ESAT-6的腺病毒转导小鼠DC细胞,同时进行小鼠分离T细胞。最后用ESAT-6加载DC启动T细胞试验。计算T细胞和DC的数目,以10:1的比例与ESAT-6负载的DC混合细胞。收获所有T细胞进行检测。7、ESAT-6-T细胞对靶细胞的裂解:使用ESAT-6、IL-21或ESAT-6/IL-21转导的B16F10作为靶细胞,按不同比例加入ESAT-6引物T细胞观察靶细胞裂解情况,用ELISA法测定细胞因子分泌情况。8、将小鼠黑色素瘤细胞系B16F10皮下接种到C57BL/6小鼠体内,在肿瘤内注射IL-21和ESAT-6重组腺病毒及小鼠体内输注ESAT-6-T细胞后每天监测肿瘤细胞的生长情况及不同细胞因子分泌情况,用ELISA法测定血清白细胞介素2和干扰素Y水平。三、结果:1、用超长离心管纯化后,用抗六邻体蛋白行免疫细胞化学方法对本研究所制备的腺病毒进行免疫细胞化学滴定,结果表明腺病毒滴度在1010pFU/ml以上。2、用表达GFP的腺病毒转导B16F10细胞系,以确定最佳的转导MOI。MOI低于20的腺病毒不能转导B16F10细胞。当MOI达到200时,几乎所有的B16F10细胞均显示GFP表达。所有下游转导试验使用MOI为200。B16F10-ESAT-6、B16F10-IL-21 和 B16F10-ESAT-6I/L-21 细胞能够稳定表达 ESAT-6 蛋白和 IL-21 蛋白。3、ESAT-6修饰的T细胞能有效地靶向作用于表达ESAT-6的重组B16F10细胞,而对B16F10-IL-21细胞的杀伤作用较小。4、ESAT-6修饰的T细胞在与靶肿瘤细胞结合时,都能产生IL-2和IFN-γ,IL-2和IFN-γ的分泌水平随着E:T比值的增加而持续增高。5、注射IL-21和ESAT-6重组腺病毒的小鼠,血清中的细胞因子水平在整个测定过程中均显着高于其他处理的小鼠。注射腺病毒后,血清IFN-Y分泌持续增加,而携带IL-21或ESAT-6的腺病毒,激发了更强的免疫应答。瘤内注射22天后,血清IL-2水平显着下降。6、注射ESAT-6修饰的T细胞,可抑制ESAT-6表达的肿瘤细胞的增殖。小鼠生存率的比较显示:瘤细胞在注射GFP腺病毒对照组的小鼠体内生长迅速。以GFP腺病毒注射小鼠为对照,单纯瘤内注射白细胞介素-21(IL-21)后,小鼠瘤内的肿瘤大小均有增长缓慢,而IL-21+ESAT-6或ESAT-6增长缓慢明显。瘤内注射GFP腺病毒后22天后小鼠逐渐死亡,接受IL-21或ESAT-6重组腺病毒的小鼠存活时间较长,肿瘤体积增长缓慢。四、结论:通过腺病毒转导异种抗原ESAT-6细胞因子IL-2的B16F10细胞具有高免疫原性,能有效激活体内的特异性抗肿瘤免疫应答。打破机体对肿瘤疫苗的免疫耐受,同时,联合过继回输ESAT-6修饰的特异性T细胞,用以协同肿瘤原位瘤苗化改造治疗,能更好的发挥免疫治疗效果,它将可能为黑色素瘤的免疫治疗提供一种先进的技术解决方案。
王颍翠,潘兴华[10](2017)在《间充质干细胞对系统性红斑狼疮T、B细胞的免疫调节机制》文中提出背景:研究表明,干细胞能分泌可溶性因子调节免疫平衡,抑制炎症反应,定向分化为特定组织类型的功能细胞参与组织修复,促进血管再生,改善血液循环、抗氧化应激等,可用于治疗自身免疫性疾病,尤其是系统性红斑狼疮。目的:总结间充质干细胞治疗系统性红斑狼疮的T、B淋巴细胞免疫调节机制。方法:由第一作者应用计算机检索Pub Med,中国期刊全文数据库(CNKI)2006年1月至2016年8月相关文献。以"mesenchymal stem cell,systemic lupus erythematosus,immunoregulation"和"间充质干细胞,系统性红斑狼疮,免疫调节"为检索词进行检索。选择间充质干细胞治疗系统性红斑狼疮对免疫调节影响的文章,同一领域文献选择近期发表在权威杂志的文章。结果与结论:初检得到207篇文献,纳入53篇文献进行综述。间充质干细胞具有自我更新和多向分化潜能,是免疫替代治疗的理想种子细胞;具有免疫调节能力,可从根本上治疗自身免疫疾病。目前间充质干细胞治疗系统性红斑狼疮的动物实验已证实了其安全性及有效性,并且能避免药物治疗带来的不良反应,具有广阔应用前景,但在临床应用中仍有很多问题亟待解决。
二、白细胞介素-12单独或联合白细胞介素-2对人脐血单个核细胞抗肿瘤活性的研究(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、白细胞介素-12单独或联合白细胞介素-2对人脐血单个核细胞抗肿瘤活性的研究(论文提纲范文)
(1)白细胞介素-6、白细胞介素-12对结核性胸腔积液的诊断价值(论文提纲范文)
中文摘要 |
abstract |
中英文缩略词表 |
第1章 引言 |
第2章 综述 |
2.1 结核病及结核性胸腔积液的介绍 |
2.2 结核性胸腔积液产生机制 |
2.3 细胞因子在结核性胸腔积液诊断中的应用 |
2.4 结核性胸腔积液中白细胞介素的分类及研究 |
2.4.1 白细胞介素-1 |
2.4.2 白细胞介素-2 |
2.4.3 白细胞介素-6 |
2.4.4 白细胞介素-8 |
2.4.5 白细胞介素-10 |
2.4.6 白细胞介素-12 |
2.4.7 白细胞介素-17 |
2.4.8 白细胞介素-18 |
2.4.9 白细胞介素-22 |
2.4.10 白细胞介素-23 |
2.4.11 白细胞介素-27 |
2.4.12 白细胞介素-33 |
2.4.13 白细胞介素-35 |
2.5 展望 |
第3章 实验对象与研究方法 |
3.1 研究对象 |
3.1.1 研究对象及纳入标准 |
3.1.2 研究对象排除标准 |
3.2 研究方法 |
3.2.1 胸腔穿刺术操作方法 |
3.2.2 内科胸腔镜操作方法 |
3.2.3 标本采集 |
3.2.4 实验试剂与器材 |
3.2.5 胸腔积液中IL-6 的水平测定 |
3.2.6 胸腔积液IL-12 的水平测定 |
3.3 统计学方法 |
第4章 结果 |
4.1 研究人群基本资料 |
4.2 不同类型胸腔积液的镜下表现、病理结果及术中、术后并发症 |
4.2.1 内科胸腔镜下表现及病理检查结果 |
4.2.2 内科胸腔镜术中及术后并发症情况 |
4.3 不同类型胸腔积液中IL-6、IL-12 检测结果及比较 |
4.3.1 不同类型胸腔积液中IL-6、IL-12 水平的分析 |
4.3.2 不同类型胸腔积液中IL-6、IL-12 检测结果比较 |
4.3.3 不同类型胸腔积液中IL-6、IL-12 结果的ROC曲线及诊断效能 |
4.4 胸腔积液中IL-6、IL-12 对于诊断结核性胸腔积液的结果 |
4.5 胸腔积液中IL-6、IL-12 联合检测诊断结核性胸腔积液的效果评价 |
第5章 讨论 |
5.1 内科胸腔镜对不同类型胸腔积液的诊断价值 |
5.2 IL-6 水平测定对于结核性胸腔积液的诊断价值 |
5.3 IL-12 水平测定对于结核性胸腔积液的诊断价值 |
5.4 IL-6、IL-12 联合检测对TPE的诊断价值 |
5.5 实验研究的创新与不足 |
第6章 结论 |
参考文献 |
作者简介及在学期间所取得的研究成果 |
致谢 |
(2)敷和备化方联合TACE术治疗原发性肝癌临床疗效及对血清CHI3L1、IL-6、IL-8等炎症因子影响的观察(论文提纲范文)
中文摘要 |
abstract |
引言 |
第一部分 背景及理论研究 |
1 原发性肝癌相关炎症微环境的文献计量学研究 |
1.1 材料与方法 |
1.2 结果 |
1.3 讨论 |
2 肝郁脾虚型原发性肝癌及肝动脉化疗栓塞术后辅助用药的数据挖掘研究 |
2.1 资料来源 |
2.2 结果 |
2.3 讨论 |
3 敷和备化方的网络药理学研究 |
3.1 材料与方法 |
3.2 结果 |
3.3 讨论 |
第二部分 临床研究 |
第一节 研究方法 |
1 研究资料 |
1.2 诊断标准 |
1.3 纳入标准 |
1.4 排除标准 |
1.5 脱落及剔除标准 |
1.6 样本量估算 |
2 研究方案 |
2.1 随机分组方法 |
2.2 治疗方法 |
2.3 随访检查 |
2.4 观察指标 |
3 统计学方法 |
4 伦理学要求 |
4.1 伦理规范 |
4.2 质量保证 |
5 数据保存和处理 |
第二节 临床研究结果 |
1.基线资料 |
2.近期有效率情况对比 |
3.术后栓塞综合征情况对比 |
4.肝纤四项及AFP水平情况对比 |
5.FACT-Hep肝胆肿瘤治疗功能评分情况对比 |
6.中医证候积分对比 |
7.无进展生存时间及治疗失败时间对比 |
8.外周血血清炎症因子对比 |
第三节 临床研究结果讨论 |
1.一般资料分析 |
2.近期有效率情况分析 |
3.术后栓塞综合征发生情况分析 |
4.血清肝纤四项及甲胎蛋白水平分析 |
5.FACT-Hep肝胆肿瘤治疗功能评分情况对比 |
6.PFS及 TTUP情况对比 |
7.中医证候积分对比 |
8.外周血血清炎症因子对比 |
9.问题与展望 |
第四节 结论 |
参考文献 |
附录 |
附录1 肝癌西医诊断及分期标准 |
附录2 肝功能Child-Pugh分级标准 |
附录3 敷和备化方联合TACE治疗肝郁脾虚型原发性肝癌的临床观察知情同意书 |
附录4 基于肝癌TACE术后改造的实体瘤疗效评价标准 |
附录5 中医肝郁脾虚证候积分表 |
附录6 FACT-Hep肝胆肿瘤治疗功能评分量表 |
附录7 WHO抗癌药急性及亚急性毒性反应分度标准 |
附录8 敷和备化方联合TACE术治疗原发性肝癌患者CRF |
缩略词表 |
综述 壳多糖酶3样蛋白1在肿瘤中作用机制的研究进展 |
参考文献 |
致谢 |
个人简历及攻读学位期间获得的科研成果 |
(3)毛兰素对角质细胞增殖和凋亡的影响及树状介孔硅透皮给药系统的研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 绪论 |
1.1 银屑病 |
1.1.1 发病机制 |
1.1.2 角质细胞扮演的角色 |
1.1.3 治疗策略 |
1.2 毛兰素 |
1.2.1 来源 |
1.2.2 药理作用 |
1.3 细胞凋亡的分子机制 |
1.3.1 死亡受体介导的细胞凋亡途径 |
1.3.2 线粒体介导的细胞凋亡途径 |
1.3.3 内质网应激(ER srtress,ERS)介导的细胞凋亡途径 |
1.4 纳米透皮给药系统 |
1.5 本课题的研究意义及主要内容 |
1.5.1 本课题的研究意义 |
1.5.2 本课题的研究内容 |
第二章 毛兰素对角质细胞的增殖、凋亡及其机制的初步研究 |
2.1 前言 |
2.2 材料与仪器 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 细胞培养 |
2.3.2 细胞增殖实验 |
2.3.3 细胞凋亡实验 |
2.3.4 细胞内活性氧ROS含量检测 |
2.3.5 Western blot实验 |
2.3.6 统计分析 |
2.4 结果与讨论 |
2.4.1 毛兰素抑制HaCaT细胞的增殖 |
2.4.2 毛兰素诱导HaCaT细胞的凋亡 |
2.4.3 毛兰素诱导HaCaT细胞的活性氧ROS生成 |
2.4.4 毛兰素通过活性氧ROS抑制HaCaT细胞的增殖和促进其凋亡 |
2.4.5 毛兰素影响JNK/c-Jun和 AKT/mTOR信号通路 |
2.4.6 毛兰素可能通过活性氧ROS调控JNK/c-Jun和 AKT/m TOR信号通路 |
2.5 本章小结 |
第三章 树状介孔硅透皮给药系统的构建与评价 |
3.1 前言 |
3.2 材料与仪器 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 树状介孔硅纳米粒的合成 |
3.3.2 载药 |
3.3.3 药物定量 |
3.3.4 表征 |
3.3.5 体外透皮试验 |
3.3.6 统计分析 |
3.4 结果与讨论 |
3.4.1 装载毛兰素的树状介孔硅的表征 |
3.4.2 体外透皮试验 |
3.5 本章小结 |
第四章 树状介孔硅纳米给药载体对角质细胞的影响及其机制的研究 |
4.1 前言 |
4.2 材料与仪器 |
4.3 实验方法 |
4.3.1 树状介孔硅纳米粒的合成 |
4.3.2 载药 |
4.3.3 药物定量 |
4.3.4 表征 |
4.3.5 体外药物释放 |
4.3.6 细胞培养 |
4.3.7 细胞摄取实验 |
4.3.8 细胞增殖实验 |
4.3.9 细胞凋亡实验 |
4.3.10 线粒体膜电位检测 |
4.3.11 胞内钙离子浓度检测 |
4.3.12 Western blot实验 |
4.3.13 统计分析 |
4.4 结果与讨论 |
4.4.1 体外药物释放和细胞摄取 |
4.4.2 载药树状介孔硅抑制HaCaT细胞的增殖和促进其凋亡 |
4.4.3 载药树状介孔硅可能通过线粒体信号通路促进HaCaT细胞的凋亡 |
4.4.4 载药树状介孔硅可能通过调控内质网应激来促进HaCaT细胞的凋亡 |
4.5 本章小结 |
结论与展望 |
参考文献 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 |
致谢 |
附表 |
(4)川陈皮素抑制IL-21/IL-21R介导类风湿关节炎的炎症反应研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
abstract |
前言 |
1.类风湿关节炎 |
1.1 疾病介绍 |
1.2 滑膜成纤维细胞代谢与类风湿关节炎 |
1.3 细胞因子与类风湿关节炎 |
2.IL-21/IL-21R信号转导途径 |
2.1 IL-21/IL-21R产生及来源 |
2.2 IL-21/IL-21R对疾病的调节 |
2.3 IL-21/IL-21R与类风湿关节炎 |
3.JAK/STAT信号通路与类风湿关节炎 |
3.1 JAK/STAT信号通路 |
3.2 基本过程及调节 |
3.3 JAK/STAT与类风湿关节炎 |
4.川陈皮素药理性作用 |
4.1 名称介绍 |
4.2 药代动力学 |
4.3 药理作用 |
5.本研究的目的和内容 |
第一部分 :川陈皮素抑制IL-21/IL-21R介导类风湿关节炎炎症反应体外研究 |
材料与方法 |
1.1 研究对象 |
1.2 实验试剂及设备 |
1.3 实验过程 |
1.4 实验分析 |
1.5 统计学分析 |
结果 |
2.1 川陈皮素对MH7A细胞活力的影响 |
2.2 川陈皮素能够抑制IL-21受体的表达 |
2.3 川陈皮素抑制IL-21诱导的氧化应激反应 |
2.4 川成皮素抑制促炎细胞因子的表达 |
2.5 川陈皮素抑制IL-21 诱导的基质金属蛋白酶(MMPs)表达 |
2.6 川陈皮素的作用通过JAK1/STAT3 信号通路介导 |
讨论 |
研究结论 |
第二部分 :川陈皮素抑制IL-21/IL-21R介导类风湿关节炎炎症反应体内研究 |
材料与方法 |
1.1 研究对象 |
1.2 实验试剂及设备 |
1.3 实验试剂配置 |
1.4 实验过程 |
1.5 统计学分析 |
结果 |
2.1 模型成功率检测 |
2.2 形态学分析表明川陈皮素对类风湿关节炎的改善作用 |
2.3 ELISA检测IL-21R、TNF-α、IL-6、HMGB1、MMP-3及MMP-13 提示川陈皮素对类风湿关节炎炎症的的抑制效应 |
2.4 RT-PCR检测IL-21R、TNF-α、IL-6、MMP-3、MMP-13从m RNA水平进一步表明川陈皮素抑制类风湿关节炎炎症的水平 |
2.5 Western-blot检测IL-21R、TNF-α、IL-6、MMP-3、MMP-13、JAK1/STAT3从蛋白水平进一步充分表明川陈皮素的类风湿关节炎炎症抑制作用 |
讨论 |
研究结论 |
参考文献 |
综述 白细胞介素21在类风湿关节炎中的作用研究进展 |
参考文献 |
中英文缩略词 |
攻读学位期间公开发表的论文 |
致谢 |
(5)东方栓孔菌多糖的分离纯化、结构解析与生物活性研究(论文提纲范文)
致谢 |
摘要 |
abstract |
缩略语注释表 |
1 绪论 |
1.1 课题研究背景 |
1.2 多孔菌多糖的研究进展 |
1.3 东方栓孔菌的研究概况 |
1.4 研究意义及内容 |
2 实验部分 |
2.1 材料与试剂 |
2.2 仪器与设备 |
2.3 东方栓孔菌多糖提取工艺优化的方法 |
2.4 多糖分离纯化、理化性质与初步结构表征的方法 |
2.5 TOP-2 的体外抗氧化活性及对酒精性肝损伤小鼠的保护作用的研究方法 |
2.6 TOP-2 对环磷酰胺致免疫抑制小鼠的保护作用的研究方法 |
2.7 TOP-2对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抗肿瘤与免疫调节活性的研究方法 |
2.8 TOP-2对PM2.5 致肺损伤小鼠的保护作用的研究方法 |
2.9 统计分析 |
3 东方栓孔菌多糖的提取工艺优化 |
3.1 葡萄糖标准曲线的制作 |
3.2 超声辅助提取工艺优化 |
3.3 超声-微波辅助提取工艺优化 |
3.4 不同提取方法的比较 |
3.5 讨论 |
3.6 小结 |
4 东方栓孔菌多糖的分离纯化、理化性质与初步结构表征 |
4.1 东方栓孔菌多糖的分离纯化 |
4.2 TOP-2 的理化性质 |
4.3 TOP-2 的初步结构表征 |
4.4 讨论 |
4.5 小结 |
5 TOP-2 的体外抗氧化活性及对酒精性肝损伤小鼠的保护作用 |
5.1 TOP-2 的体外抗氧化活性 |
5.2 TOP-2 对酒精性肝损伤小鼠的保护作用 |
5.3 讨论 |
5.4 小结 |
6 TOP-2 对环磷酰胺致免疫抑制小鼠的保护作用 |
6.1 TOP-2 对小鼠脏器系数的影响 |
6.2 TOP-2 对小鼠巨噬细胞吞噬能力的影响 |
6.3 TOP-2 对小鼠巨噬细胞NO生成的影响 |
6.4 TOP-2 对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 |
6.5 TOP-2 对小鼠NK细胞和CTL细胞毒性作用的影响 |
6.6 TOP-2 对小鼠血清细胞因子和免疫球蛋白的影响 |
6.7 TOP-2 对小鼠抗氧化能力的影响 |
6.8 讨论 |
6.9 小结 |
7 TOP-2对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抗肿瘤与免疫调节活性 |
7.1 TOP-2 对小鼠瘤重和抑瘤率的影响 |
7.2 TOP-2 对小鼠体重和免疫器官系数的影响 |
7.3 TOP-2 对小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响 |
7.4 TOP-2 对小鼠巨噬细胞吞噬能力的影响 |
7.5 TOP-2 对小鼠血清细胞因子的影响 |
7.6 TOP-2对TLR4 介导的NF-κB信号通路的影响 |
7.7 讨论 |
7.8 小结 |
8 TOP-2对PM2.5致肺损伤小鼠的保护作用 |
8.1 TOP-2 对小鼠肺组织湿重/干重比 |
8.2 TOP-2 对小鼠BALF中炎性细胞的影响 |
8.3 TOP-2 对小鼠BALF中 TP、ALB和 CRP含量的影响 |
8.4 TOP-对小鼠BALF中 MPO、LDH、AKP和 ASM活性的影响 |
8.5 TOP-2 对促炎因子TNF-α、IL-1β 和IL-6 含量的影响 |
8.6 TOP-2 对SOD、CAT和GSH-Px活性的影响 |
8.7 TOP-2 对MDA、PCG和 8-Ohd G含量的影响 |
8.8 TOP-2 对Nrf2 和HO-1 表达的影响 |
8.9 TOP-2 对NLRP3 炎症小体活化的影响 |
8.10 讨论 |
8.11 小结 |
9 结论与创新点 |
9.1 结论 |
9.2 创新点 |
9.3 展望 |
参考文献 |
作者简历 |
学位论文数据集 |
(6)《下一代肿瘤治疗的新方法:放疗与免疫治疗的结合》翻译报告(论文提纲范文)
Abstract (In English) |
Abstract (In Chinese) |
Chapter One Introduction |
1.1 Background of the Report |
1.2 Significance of the Report |
1.3 Structure of the Report |
1.4 Introduction to the Source Text |
1.5 Translation Tools |
Chapter Two Pre-Translation Preparations |
2.1 Informative Text |
2.2 Difficulties in Translating the Medical Information of the Source Text |
2.3 Necessity of Analyzing the Linguistic Features of Medical English |
Chapter Three Linguistic Features of Medical English |
3.1 Features of Medical English Vocabularies |
3.1.1 Pure Medical Vocabularies |
3.1.2 Semi-Medical Vocabularies |
3.1.2.1 Features of Semi-Medical Vocabularies |
3.1.2.2 Types of Semi-Medical Vocabularies |
3.2 Features of Sentences in Medical English |
3.2.1 Use of Non-Finite Verbs to Deliver Medical Information |
3.2.2 Use of Adjective Clauses to Deliver Medical Information |
Chapter Four Translation of Vocabularies and Sentences in Medical English |
4.1 Translation of Medical English Vocabularies |
4.1.1 Translation of Pure Medical Vocabularies |
4.1.2 Translation of Semi-Medical Vocabularies |
4.1.2.1 Translation of Semi-Medical Vocabularies with CNKI Translation APP |
4.1.2.2 Translation of Semi-Medical Vocabularies with E-dictionaries and Related Medical Websites |
4.2 Translation of Sentences in Medical English |
4.2.1 Translation of Non-Finite Verbs |
4.2.2 Translation of Non-Restrictive Adjective Clauses |
Chapter Five Conclusion |
References |
Appendices |
Appendix Ⅰ the Source Text |
Appendix Ⅱ the Target Text |
Acknowledgements |
(7)半夏泻心汤对过表达IL-12基因BMSCs靶向治疗胃癌的增效作用研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
中英文缩略词表 |
前言 |
1 材料 |
1.1 细胞 |
1.2 慢病毒载体 |
1.3 药物 |
1.4 动物 |
1.5 仪器 |
1.6 试剂 |
1.7 主要试剂配制 |
2 方法 |
2.1 半夏泻心汤实验用药的制备 |
2.2 裸鼠BMSCs的分离与鉴定 |
2.3 LV5 空载慢病毒及LV5-IL-12慢病毒转染BMSCs |
2.4 嘌呤霉素筛选LV5 空载慢病毒及LV5-IL-12慢病毒稳定转染的BMSCs |
2.5 Q-PCR验证BMSCs的 IL-12过表达 |
2.5.1 引物设计 |
2.5.2 RNA的提取 |
2.5.3 RNA逆转录cDNA |
2.5.4 Q-PCR扩增反应 |
2.5.5 数据分析 |
2.6 胃癌荷瘤裸鼠模型的建立及分组干预 |
2.7 免疫荧光染色检测IL-12转染BMSCs在肿瘤组织的分布 |
2.8 TUNEL法检测胃癌荷瘤裸鼠瘤体组织的细胞凋亡 |
2.9 免疫细胞化学法检测瘤体组织Bax、Bcl-2 蛋白表达 |
2.10 统计学处理 |
3.结果 |
3.1 裸鼠BMSCs的细胞形态及鉴定 |
3.2 荧光显微镜观察LV5-IL-12转染BMSCs的效率 |
3.3 Q-PCR检测LV5 慢病毒介导的IL-12mRNA在 BMSCs中的表达 |
3.4 各组胃癌荷瘤裸鼠瘤体及瘤重变化 |
3.5 BMSCs在肿瘤组织中的分布 |
3.6 各组胃癌荷瘤裸鼠瘤体组织的细胞凋亡 |
3.7 各组胃癌荷瘤裸鼠瘤体组织Bax、Bcl-2 蛋白表达 |
4 讨论 |
4.1 肿瘤的基因治疗及慢病毒转染系统 |
4.2 骨髓间充质干细胞对肿瘤的靶向性 |
4.3 IL-12在肿瘤基因治疗中的作用 |
4.4 中医学对胃癌的认识及半夏泻心汤的防治作用 |
参考文献 |
小结 |
综述 |
参考文献 |
致谢 |
在学期间主要研究成果 |
附录 |
(8)单个核细胞分离及CIK细胞诱导培养的方法优化(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第1章 绪论 |
1.1. 细胞因子诱导的杀伤细胞 |
1.2. 单个核细胞的分离方法 |
1.2.1. 物理吸附法 |
1.2.2. 细胞电泳法 |
1.2.3. 免疫磁珠法 |
1.2.4. 流式细胞术 |
1.2.5. 离心法 |
1.3. 密度分离介质配方优化 |
1.4. 本课题的研究内容及意义 |
第2章 实验材料与方法 |
2.1. 实验材料 |
2.1.1. 脐带血样本来源 |
2.1.2. 生化试剂 |
2.1.3. 主要仪器 |
2.2. 实验方法 |
2.2.1. 血液样本分组及离心处理方式分组 |
2.2.2. 红细胞裂解 |
2.2.3. 单个核细胞的分离 |
2.2.4. 细胞计数 |
2.2.5. 流式细胞分析 |
2.2.6. 单个核细胞得率的计算 |
2.2.7. CIK细胞诱导培养及得率分析 |
2.2.8. 统计学方法 |
第3章 实验结果 |
3.1. 单个核细胞分离条件优化 |
3.1.1. 市售分离液对脐带血单个核细胞分离对比结果 |
3.1.2. Ficoll-PaqueTM PLUS与DH分离液分离对比结果 |
3.1.3. 离心条件分离对比结果 |
3.1.4. 不同样本分组的脐带血分离对比结果 |
3.1.5. 单个核细胞富集状态对比 |
3.1.6. 单个核细胞流式分析结果对比 |
3.1.7. Ficoll-PaqueTM PLUS与DH分离液分离富集红细胞聚集状态 |
3.2.CIK细胞诱导培养结果对比 |
第4章 讨论 |
结论与展望 |
参考文献 |
致谢 |
(9)原位基因修饰联合过继性T细胞在治疗黑色素瘤治疗中的机制及抗肿瘤作用(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
前言 |
参考文献 |
引言 |
材料与方法 |
结果 |
讨论 |
参考文献 |
全文总结 |
综述 |
参考文献 |
英文缩略词表 |
发表的论文 |
致谢 |
(10)间充质干细胞对系统性红斑狼疮T、B细胞的免疫调节机制(论文提纲范文)
文章快速阅读: |
文题释义: |
0引言Introduction |
1 资料和方法Data and methods |
1.1 资料来源 |
1.2 入选标准 |
1.3 纳入文献基本情况 |
1.4 文献筛选流程 |
2 结果Results |
2.1 系统性红斑狼疮存在间充质干细胞异常 |
2.2 间充质干细胞的非特异性免疫调节能力 |
2.3 间充质干细胞对系统性红斑狼疮的T、B淋巴细胞免疫调节机制 |
2.3.1 对T淋巴细胞的免疫调节 |
2.3.2 对B淋巴细胞的免疫调节 |
3 应用前景Prospects |
四、白细胞介素-12单独或联合白细胞介素-2对人脐血单个核细胞抗肿瘤活性的研究(论文参考文献)
- [1]白细胞介素-6、白细胞介素-12对结核性胸腔积液的诊断价值[D]. 谈洁. 吉林大学, 2021(01)
- [2]敷和备化方联合TACE术治疗原发性肝癌临床疗效及对血清CHI3L1、IL-6、IL-8等炎症因子影响的观察[D]. 蒋锐沅. 广西中医药大学, 2021(02)
- [3]毛兰素对角质细胞增殖和凋亡的影响及树状介孔硅透皮给药系统的研究[D]. 莫灿龙. 华南理工大学, 2020(01)
- [4]川陈皮素抑制IL-21/IL-21R介导类风湿关节炎的炎症反应研究[D]. 刘中兵. 苏州大学, 2020(06)
- [5]东方栓孔菌多糖的分离纯化、结构解析与生物活性研究[D]. 郑义. 中国矿业大学, 2019(04)
- [6]《下一代肿瘤治疗的新方法:放疗与免疫治疗的结合》翻译报告[D]. 李梅慧. 厦门大学, 2019(08)
- [7]半夏泻心汤对过表达IL-12基因BMSCs靶向治疗胃癌的增效作用研究[D]. 吕洋超. 甘肃中医药大学, 2019(03)
- [8]单个核细胞分离及CIK细胞诱导培养的方法优化[D]. 王冬明. 北京工业大学, 2019(07)
- [9]原位基因修饰联合过继性T细胞在治疗黑色素瘤治疗中的机制及抗肿瘤作用[D]. 王锋. 苏州大学, 2018(04)
- [10]间充质干细胞对系统性红斑狼疮T、B细胞的免疫调节机制[J]. 王颍翠,潘兴华. 中国组织工程研究, 2017(29)