一、对沉默的解剖(上)（论文文献综述）
丁智斌[1]（2021）在《法舒地尔促进小胶质细胞吞噬及其介导髓鞘再生的机制研究》文中研究指明多发性硬化（Multiple sclerosis,MS）是一种髓鞘脱失为主的中枢神经系统（Central nervous syestem,CNS）炎性疾病,其主要病变为血-脑屏障受损、外周的T细胞和巨噬细胞浸润中枢,引发炎性反应破坏髓鞘并继发轴索变性。完整的髓鞘是CNS生理机能正常运行的重要前提,而脱髓鞘病变后髓鞘再生对机体预后至关重要。再髓鞘化,即髓鞘再生,包括少突胶质细胞前体细胞（Oligodendrocyte precursor cells,OPCs）的动员和少突胶质细胞（Oligodendrocytes,OLs）的分化/成熟两个关键阶段,其受正、负因素的调节。脱髓鞘后产生的髓鞘碎片在加剧CNS炎症反应,诱发神经元的变性坏死及抑制髓鞘再生中发挥着重要的作用。因此,髓鞘碎片的清除就显得十分重要。作为CNS的固有免疫细胞,小胶质细胞在MS及其体内外模型中的研究主要集中在炎症状态下的极化,及其对OLs、星形胶质细胞（Astrocyte,AST）和神经元的影响。但较少有人研究小胶质细胞对髓鞘碎片的吞噬作用及吞噬发生后对髓鞘再生的影响。因此,寻找靶向小胶质细胞吞噬清除髓鞘碎片进而促进髓鞘再生等关键环节发挥作用的经济有效药物,对治疗CNS脱髓鞘疾病具有巨大的潜力。法舒地尔（Fasudil,FSD）作为血管扩张剂中的一员,对蛛网膜下腔出血导致的血管痉挛有较好的治疗效果。对脱髓鞘相关模型研究发现,Fasudil通过保护血管内皮,减少免疫细胞浸润,减轻CNS炎症,进而延缓髓鞘脱失并再生神经元突触。因此,在本研究中首先在细胞水平检验Fasudil对BV-2小胶质细胞吞噬髓鞘碎片的影响;其次,通过体内实验探究Fasudil对双环己酮草酰二腙（Cuprizone,CPZ）模型小鼠的疗效,并通过体内外实验探讨Fasudil对小胶质细胞M1/M2型的影响及M1/M2型细胞与吞噬之间的关系;继之,通过体内外实验明确Fasudil促进小胶质细胞吞噬髓鞘碎片的信号通路;最后,通过体内外实验探讨吞噬髓鞘碎片的小胶质细胞在髓鞘的保护以及再生中的作用。第一部分Fasudil对BV-2小胶质细胞吞噬功能的影响目的:观察Fasudil不同浓度和不同时间点对BV-2小胶质细胞吞噬髓鞘碎片的影响。方法:小鼠BV-2小胶质细胞培养后,以合适的细胞密度进行实验,首先各组加入5mg/ml荧光髓鞘碎片（Fluorescein-labeled myelin debris,FMD）,将细胞与不同浓度的Fasudil（0μg/ml,7.5μg/ml,15μg/ml,30μg/ml和60μg/ml）共培养48h。BV-2细胞吞噬功能测定采用流式细胞术、荧光显微镜和多功能微孔读板机。进而,分别用15μg/ml的Fasudil和等量PBS对BV-2细胞干预不同时间（0h,6h,12h,24h,48h和72h）,用流式细胞术分析Fasudil干预不同时间点BV-2小胶质细胞对FMD的吞噬情况。结果:1.与0μg/ml干预组相比,BV-2小胶质细胞吞噬FMD的能力并非随着Fasudil浓度的增加呈逐渐增强的趋势。相对而言,15μg/ml的Fasudil干预情况下吞噬FMD的BV-2小胶质细胞数量最多,且吞噬FMD的能力最强。2.随着时间的延长,PBS对照组和Fasudil干预组BV-2小胶质细胞对FMD的吞噬能力逐渐增强。与PBS对照组相比,Fasudil干预能够明显增强BV-2小胶质细胞对FMD的吞噬。结论:Fasudil诱导BV-2小胶质细胞吞噬FMD具有浓度非依赖和时间依赖的特征。第二部分Fasudil通过诱导小胶质细胞向M2表型极化发挥抗炎和增强吞噬的作用目的:观察Fasudil对髓鞘碎片诱导的小胶质细胞极化的影响,并探究极化状态的小胶质细胞与髓鞘碎片吞噬的关系。方法:体内实验:将C57BL/6雄鼠分至三组:正常组,标准喂食6周;模型组,喂食0.2%CPZ饲料6周;Fasudil治疗组,喂食0.2%CPZ饲料6周,第5周开始每日40mg/kg的Fasudil腹腔注入。正常组和模型组注入等量0.9%Na Cl。隔日称量小鼠体重,于6周末应用Morris水迷宫（MWM）、高架十字迷宫（EPM）和强迫游泳实验（FST）来检测小鼠的认知、焦虑和抑郁样行为表现。小鼠脑切片行Fluoro Myelin染色观察各组小鼠脑内脱髓鞘情况。通过免疫荧光染色评估小胶质细胞i NOS和Arg-1的表达,用Western blot对脑组织内i NOS和Arg-1蛋白进行定量分析。体外实验:将培养的BV-2小胶质细胞分为四组:Fasudil组加入15μg/ml的Fasudil,PBS组加入同体积的PBS,Myelin+Fasudil组加入5 mg/ml的FMD和15μg/ml的Fasudil,Myelin+PBS组加入5 mg/ml的FMD和同体积的PBS,培养箱孵育48 h。一部分通过免疫细胞荧光和Western blot法分析i NOS和Arg-1的表达。另一部分通过流式细胞术分析Fasudil对FMD刺激的小胶质细胞M1型（CD16/32、iNOS和IL-12）及M2型（CD206、Arg-1和IL-10）的影响。进一步通过门控FMD-和FMD+细胞来分析M1型和M2型小胶质细胞吞噬FMD的情况。采用ELISA法检测上清液中IL-6、TNF-α、IL-10和TGF-β的含量。结果:1.体内结果:（1）体重变化:各组小鼠0周称重无统计学差异（P>0.05）。实验过程中,正常组小鼠体重持续增加,6周末平均体重为28.85±0.67 g。与正常组（25.18±0.71 g）相比,模型组小鼠平均体重2周末明显下降（19.67±0.61 g,P<0.0001）,然后缓慢增加,在第6周末较0周有所增加（22.78±0.74 g）,但仍与正常组存在明显差异（P<0.0001）。与模型组比较,Fasudil治疗2周可改善CPZ小鼠体重下降（P=0.0027）。（2）行为学改变:MWM结果显示,与正常组相比,CPZ鼠逃避潜伏期和上台前路程出现延长（P<0.001,P<0.01）,目标象限活动时间占比下降（P<0.05）,而Fasudil能够逆转这些行为学的变化（P<0.05,P<0.01和P<0.05）。EPM结果显示,与正常组相比,CPZ鼠在闭合臂停留时间和活动距离均出现增加（P<0.01）,而Fasudil能缩短CPZ鼠在闭合臂停留时间和活动距离（P<0.05）。FST结果显示,与正常组比较,CPZ鼠游泳的平均速度和总距离均缩短（P<0.001,P<0.01）,游泳休息时间延长（P<0.0001）,而Fasudil既可延长CPZ小鼠游泳的平均速度和总时间（P<0.05和P<0.001）,又可缩短游泳休息时间（P<0.001）。（3）病理学检测:同正常组比较,CPZ小鼠胼胝体区髓鞘的脱失明显增加（P<0.001）,而Fasudil能明显抑制小鼠脑胼胝体区髓鞘的丢失（P<0.05）。（4）免疫荧光染色结果显示,模型组小鼠胼胝体区域Iba-1+i NOS+细胞数量显着高于正常组,而Fasudil可有效抑制Iba-1+i NOS+细胞的数量,并使胼胝体区域Iba-1+Arg-1+细胞数量明显增多。（5）Western blot显示,与正常组相比,CPZ鼠脑i NOS蛋白增多（P<0.01）,而Arg-1蛋白水平下降（P<0.05）。相反,Fasudil在抑制脑内i NOS蛋白表达的同时,升高Arg-1表达（P<0.05,P<0.001）。2.体外结果:（1）Western blot显示,与PBS组相比,FMD刺激BV-2小胶质细胞高表达i NOS蛋白（P<0.01）,而Fasudil抑制i NOS表达（P<0.01）的同时,升高Arg-1的表达（P<0.01）。（2）免疫细胞荧光染色显示,FMD诱导BV-2小胶质细胞i NOS表达增高,而Fasudil干预抑制i NOS并促进Arg-1的表达。（3）流式细胞术结果显示,同PBS组相比,FMD促使M1型小胶质细胞标志物CD16/32和i NOS的表达上调（均为P<0.0001）,而抑制M2型CD206和Arg-1的表达（P<0.05,P<0.01）。Fasudil干预抑制CD16/32和i NOS表达的同时（均为P<0.0001）,上调CD206和Arg-1表达（均为P<0.0001）。（4）ELISA法检测显示,与PBS组比较,FMD促使BV-2细胞产生TNF-α和IL-6（P<0.05,P<0.001）,而Fasudil干预可明显抑制这两种因子的产生（均为P<0.001）。同样,与Myelin+PBS组相比,Fasudil可促使FMD刺激后的BV-2细胞分泌IL-10和TGF-β（均为P<0.05）。（5）通过流式细胞术门控Myelin+Fasudil组FMD-和FMD+细胞发现,与FMD-细胞相比,FMD+细胞CD16/32、i NOS和IL-12的表达降低（P<0.001,P<0.0001,P<0.0001）,但CD206、Arg-1和IL-10的表达升高（P<0.001,P<0.01,P<0.0001）。结论:1.Fasudil改善CPZ脱髓鞘小鼠的体重变化和行为学异常;2.Fasudil既可促使体内外小胶质细胞向M2表型极化,又可促使M2表型细胞吞噬髓鞘碎片,进而改善CPZ小鼠脑内炎性微环境来保护髓鞘。第三部分Fasudil促进小胶质细胞吞噬髓鞘碎片的机制研究目的:探讨Fasudil促进小胶质细胞吞噬髓鞘碎片的相关分子机制。方法:体内实验:将C57BL/6雄鼠分至三组:正常组,标准喂食6周;模型组,喂食0.2%CPZ饲料6周;Fasudil治疗组,喂食0.2%CPZ饲料6周,第5周开始每日40mg/kg的Fasudil腹腔注入。正常组和模型组注入等量0.9%Na Cl。于6周末收集脑组织标本。应用免疫荧光染色观察小胶质细胞TREM2和DAP12的表达。Western blot检测脑内TREM2和DAP12蛋白的表达水平。体外实验:将培养的BV-2小胶质细胞分为四组:Fasudil组加入15μg/ml的Fasudil,PBS组加入同体积的PBS,Myelin+Fasudil组加入5 mg/ml的FMD和15μg/ml的Fasudil,Myelin+PBS组加入5 mg/ml的FMD和同体积的PBS,培养箱孵育48 h。应用RT-PCR、免疫细胞荧光和Western blot法分析BV-2细胞TREM2和DAP12的表达。随后,通过TREM2-Si RNA1-3转染BV-2小胶质细胞,RT-PCR分析选取最佳沉默效果的TREM2-Si RNA。进而,将BV-2细胞分为四组:Normal+FMD+Fasudil组加入5 mg/ml的FMD和15μg/ml的Fasudil,Normal+FMD组加入5 mg/ml的FMD和同体积的PBS,TREM2-Si RNA+FMD+Fasudil组使用TREM2-Si RNA沉默BV-2小胶质细胞TREM2后加入5 mg/ml的FMD和15μg/ml的Fasudil,TREM2-Si RNA+FMD组使用TREM2-Si RNA沉默BV-2小胶质细胞TREM2后加入5 mg/ml的FMD和同体积PBS。流式细胞术分析BV-2小胶质细胞对FMD的吞噬情况。结果:1.体内结果:免疫荧光染色结果显示,与正常和模型组相比,Fasudil促使CPZ小鼠胼胝体区域Iba-1+小胶质细胞高表达TREM2和DAP12。Western blot结果显示,与正常和模型组小鼠相比,Fasudil明显增加脑内TREM2和DAP12蛋白的表达（P<0.001,P<0.0001）。2.体外结果:（1）RT-PCR结果显示,与Myelin+PBS组相比,Myelin+Fasudil组BV-2小胶质细胞TREM2和DAP12 m RNA的相对表达增高（P<0.05,P<0.01）。进一步Western blot分析显示,Myelin+Fasudil组TREM2和DAP12蛋白表达较Myelin+PBS组明显增加（P<0.05,P<0.01）。同样,免疫细胞荧光染色结果显示,Myelin+Fasudil组BV-2小胶质细胞TREM2和DAP12的表达较Myelin+PBS组明显增强。（2）RT-PCR对沉默TREM2的BV-2细胞检测显示,TREM2-Si RNA1-3均使TREM2 m RNA的相对表达下降（P<0.0001,P<0.001,P<0.01）,尤以TREM2-Si RNA1抑制作用最强。（3）流式细胞术分析Fasudil对沉默TREM2的BV-2细胞吞噬能力的影响。结果显示,与Normal+FMD组相比,沉默TREM2的BV-2细胞对FMD的吞噬能力明显减弱（P<0.01）。Normal+FMD+Fasudil组相比,BV-2小胶质细胞TREM2的沉默可明显减弱Fasudil诱导的FMD吞噬（P<0.0001）。与TREM2-Si RNA1+FMD组相比,Fasudil也可增强沉默TREM2的BV-2小胶质细胞对髓鞘碎片的吞噬（P<0.05）。结论:Fasudil通过激活TREM2/DAP12通路促进内外源性小胶质细胞对髓鞘碎片的吞噬。第四部分Fasudil通过促进CPZ小鼠髓鞘碎片的吞噬和神经营养因子的表达影响髓鞘再生目的:观察CPZ脱髓鞘小鼠小胶质细胞对髓鞘碎片的吞噬,并探讨其对营养因子分泌和髓鞘再生的影响。方法:体内实验:将C57BL/6雄性小鼠分至三组:正常+髓鞘碎片组,标准喂食6周;模型+髓鞘碎片组:喂食0.2%CPZ饲料6周;模型+髓鞘碎片+法舒地尔组:喂食0.2%CPZ饲料6周,从第5周开始行脑立体定位注射FMD,并每日腹腔注入40mg/kg的Fasudil;正常+髓鞘碎片及模型+髓鞘碎片组于5周开始给予立体脑定位注射FMD,并腹腔注入等量0.9%Na Cl。于6周末收集脑组织标本。荧光显微镜观察胼胝体注射部位FMD的荧光强度。免疫荧光染色法检测非注射部位胼胝体区域小胶质细胞吞噬髓鞘碎片的情况及该区域小胶质细胞BDNF和GDNF的表达情况。Western blot对脑内BDNF和GDNF蛋白表达进行定量分析。通过免疫荧光染色和Western blot测定脑组织Oligo2、PDGFRα和MBP蛋白的表达。体外实验:将培养的BV-2小胶质细胞分为四组:Fasudil组加入15μg/ml的Fasudil,PBS组加入同体积PBS,Myelin+Fasudil组加入5 mg/ml的FMD和15μg/ml的Fasudil,Myelin+PBS组加入5 mg/ml的FMD和同体积PBS,培养箱孵育48 h。RT-PCR分析细胞BDNF和GDNF m RNA的相对表达。免疫细胞荧光染色和Western blot测定细胞BDNF和GDNF的表达。ELISA法测定BV-2细胞上清液BDNF和GDNF的浓度。进一步用体外BV-2细胞条件培养液培养OPCs,免疫细胞荧光染色观察MBP的表达情况。结果:1.与正常+髓鞘碎片组相比,模型+髓鞘碎片组脑注射部位FMD的荧光强度增高（P<0.01）,Fasudil治疗后注射部位FMD的荧光强度明显降低（P<0.01）。免疫荧光染色结果显示,模型+髓鞘碎片+法舒地尔组髓鞘周围Iba-1+MBP+细胞增多。2.BDNF和GDNF荧光染色显示,与模型+髓鞘碎片组相比,Fasudil治疗能明显上调CPZ小鼠脑胼胝体区域Iba-1+小胶质细胞BDNF和GDNF的表达。Western blot证实,与正常+髓鞘碎片组相比,CPZ喂食的小鼠脑内BDNF表达下降（P<0.05）,而Fasudil治疗可促使BDNF和GDNF蛋白表达增高（P<0.01,P<0.001）。3.RT-PCR分析显示,与Myelin+PBS组相比,Myelin+Fasudil组BV-2小胶质细胞BDNF和GDNF的m RNA相对表达增高（P<0.001,P<0.0001）。同样,Western blot结果显示,Myelin+Fasudil组BDNF和GDNF的蛋白表达较Myelin+PBS组也明显增多（P<0.05,P<0.001）。此外,FMD还可抑制BV-2小胶质细胞GDNF m RNA和蛋白的表达（P<0.01,P<0.05）。免疫细胞荧光染色可见Fasudil促使BV-2细胞高表达BDNF和GDNF。进一步分析发现,与FMD-的小胶质细胞相比,大部分BDNF和GDNF的表达定位于FMD+的小胶质细胞（P<0.0001）。通过ELISA分析BV-2细胞吞噬后的上清液发现,Myelin+Fasudil组细胞上清液中BDNF和GDNF浓度较Myelin+PBS组明显增高（P<0.01,P<0.001）。4.免疫荧光染色显示,同模型+髓鞘碎片组小鼠比较,Fasudil不仅使胼胝体区域表达Oligo2和PDGFRα的OPCs增多,还可使胼胝体区域表达MBP的OLs增多。同样,Western blot结果显示,与模型+髓鞘碎片组小鼠相比,Fasudil可明显上调OPCs标记物蛋白（Oligo2、PDGFRα）和OLs标记物蛋白（MBP）的表达（P<0.01,P<0.01,P<0.05）。5.免疫细胞荧光染色结果显示,与其他三组相比,Myelin+Fasudil组BV-2小胶质细胞条件培养液促使OPCs分支增多,并升高MBP的表达。结论:Fasudil在促进小胶质细胞吞噬髓鞘碎片的过程中,促使其分泌神经营养因子,进而再生髓鞘。结论1.Fasudil以浓度非依赖和时间依赖的方式促进小胶质细胞吞噬髓鞘碎片。2.Fasudil可改善CPZ模型小鼠的临床症状,促使小胶质细胞由M1向M2表型极化,并增强M2型小胶质细胞对髓鞘碎片的吞噬能力。3.Fasudil通过激活TREM2/DAP12通路增强小胶质细胞对髓鞘碎片的吞噬。4.Fasudil通过增强吞噬髓鞘碎片的小胶质细胞分泌神经营养因子,促使OPCs的分化和成熟,进而再生髓鞘。
郭文彬[2]（2021）在《盆腔泌尿疼痛动物模型的构建及腹下神经传导神经纤维构成的研究》文中进行了进一步梳理第一章临床男性盆腔疼痛（胡桃夹综合征并精索静脉曲张）患者疼痛物质的检测目的:大量的临床研究报道胡桃夹综合征与盆腔疼痛综合征/盆腔淤血综合征、性腺静脉淤血密切相关。有研究发现女性盆腔淤血综合征（卵巢静脉综合征）86%继发于胡桃夹综合征,且该患者的疼痛物质降钙素基因相关肽（CGRP）及P物质（SP）明显升高。男性胡桃夹综合征主要表现为腰腹部疼痛及精索静脉曲张继发的睾丸疼痛,该类患者的疼痛物质表达变化未见报道,本部分研究从临床样本出发,探讨临床男性胡桃夹综合征继发精索静脉曲张患者血清疼痛物质CGRP的表达变化。方法:取超声诊断胡桃夹综合征并精索静脉曲张患者及正常对照各40例,分为实验组及正常组。对精索静脉曲张主诉疼痛者行疼痛数字评分及生活质量影响评分。取各组外周血标本分别提取血清,购买商业化试剂盒,检测实验组及对照组血清CGRP的表达情况。结果:实验组患者疼痛评分平均5.6,生活质量评分平均7.4,平均年龄为28.6岁,对照组平均为31.0岁（差异无统计学意义）。实验组及对照血清CGRP表达存在显着差异,实验组CGRP平均为94.3±39.8,对照组为51.1±27.1,P<0.001。结论:男性盆腔泌尿系统疼痛（胡桃夹综合征并精索静脉曲张）患者疼痛物质（CGRP）明显升高,提示胡桃夹综合征继发的静脉曲张淤血可引起疼痛物质的释放,最终引起患者的盆腔泌尿系统疼痛表现,后期还需增加样本量研究疼痛程度与CGRP的相关性。第二章雄性大鼠盆腔疼痛（胡桃夹综合征法）动物模型的构建目的:为研究盆腔泌尿疼痛传导的机制,我们结合临床疾病特点,拟通过构建胡桃夹综合征的动物模型,为探讨盆腔疼痛综合征/盆腔淤血综合征相关泌尿生殖系统的疼痛机理打下基础。方法:本研究采用左肾静脉半缩窄构建胡桃夹综合征大鼠模型,以精索静脉曲张作为模型评价标准。尝试通过采用不同银夹内径缩窄肾动脉来构建大鼠肾性高血压的动物模型的方法构建银夹肾静脉缩窄胡桃夹动物模型。将购买的40只SPF级雄性SD大鼠分为5组,每组共8只:各组命名为假手术组,银夹组A（0.70 mm）、银夹组 B（0.80 mm）,银夹组 C（0.90mm）,传统组（0.85 mm）。结果:各组均不同程度成功构建了胡桃夹精索静脉曲张模型,各组实验数据如下:1.成功率方面,传统组、银夹组A、银夹组B、银夹组C成功率分别为75.0%,77.8%,37.5%及37.5。2.在并发症方面,在手术过程中传统组有2只大鼠由于结扎线过紧,术后出现了左肾静脉破裂出血,其中1只大鼠术中因误扎输尿管,术后导致左肾周围积水及脓肿;银夹组A术中没有出现明显出血、肾周积脓等并发症情况,银夹组B和C组由于银夹直径过大,部分银夹从左肾静脉发生脱落导致建模失败。结论:本课题组采用银夹缩窄左侧肾静脉法成功构建了雄性大鼠盆腔泌尿系统疼痛（胡桃夹综合征）模型。与传统方法对比,初步探讨了银夹法盆腔泌尿系统疼痛动物模型的可行性,本模型的成功构建为后续盆腔泌尿系统疼痛,尤其是胡桃夹综合征所致的疼痛机制研究奠定了基础。第三章雌性大鼠盆腔疼痛（胡桃夹综合征法）动物模型的构建目的:在临床上,女性的盆腔淤血综合征也叫卵巢静脉曲张综合征。有报道卵巢静脉曲张综合征86%继发于胡桃夹综合征,因而,构建胡桃夹综合征继发的卵巢静脉曲张综合征盆腔泌尿疼痛模型更符合临床研究需要。在成功构建雄性胡桃夹大鼠盆腔泌尿疼痛模型的基础上,我们拟应用丝线行左肾静脉半结扎构建雌鼠的盆腔泌尿生殖系统疼痛模型。方法:参考雄鼠左肾静脉半结扎的方法构建雌鼠胡桃夹动物模型,以卵巢静脉曲张作为模型评价标准。将购买的16只SPF级雌性SD大鼠取回,在实验研究所进行适应性饲养,一周后观察有无异常情况后,将大鼠随机分为2组,每组共8只:分别命名为假手术组,实验组（0.85 mm）,建模一个月后处死大鼠,检测两组大鼠卵巢静脉曲张程度、血清疼痛物质表达差异,即SP及CGRP。结果:实验组成功构建了胡桃夹模型,两组大鼠的存活率均为75%,其中SP的平均浓度分别为,假手术组0.21 umol/L,实验组0.32umol/L;CGRP平均浓度分别为,假手术组0.40umol/L,实验组0.58 umol/L。结论:本部分实验同样成果构建了盆腔泌尿系统疼痛动物模型,验证了左肾静脉半结扎（胡桃夹综合征）也可引起疼痛物质的释放,为后续研究雌鼠胡桃夹综合征所致的盆腔泌尿系统疼痛的机制研究奠定了基础。第四章醋酸诱导盆腔泌尿疼痛动物模型的构建目的:利用胡桃夹综合征继发盆腔淤血构建的模型为慢性盆腔泌尿疼痛模型,为了方便实验需要,课题组同时构建了急性诱发的盆腔泌尿疼痛模型,模拟膀胱激惹状态,更方便后期研究。方法:由于醋酸急性模型更简便,猫的神经传导机制更接近人类,课题组用醋酸膀胱灌注构建盆腔泌尿疼痛模型。将双侧腹下神经分离、结扎并离断,分别撕成神经细丝,将神经细丝搭在记录电极上,同时经尿道导管用生理盐水或0.5%醋酸（AA）灌注扩张膀胱,记录膀胱压力改变时腹下神经传入神经的动作电位发放响应,从而了解腹下神经纤维痛觉传导的纤维构成。结果:取成年猫3（2雄1雌）只做预实验,结果在3只猫均记录到了神经信号的发放,而且随着膀胱内压力的升高,神经信号发放逐渐增强。同时,醋酸灌注膀胱后,信号发放明细增强。提示腹下神经的信号与膀胱内压及激惹状态有关。结论:成功构建了醋酸膀胱痛觉腹下神经传导模型,为腹下神经痛觉信号传导的神经纤维构成研究打下了基础。第五章腹下神经膀胱痛觉应答传导的神经纤维构成研究目的:支配及传导盆腔泌尿疼痛的神经包括交感神经（腹下神经）、副交感神经（盆神经）及体神经（阴部神经）。已知盆神在靶器官（如膀胱）激惹后可激活“沉默”神经纤维从而传导低压痛觉,但腹下神经是否存在同样的“沉默”神经,其传导机制如何尚未清楚。由此,本部分研究拟借助访学单位实验条件,研究腹下神经传入纤维的各类神经纤维,以揭示腹下神经参与膀胱及盆腔脏器痛觉传导的机制。方法:由于盆腔泌尿系统包括多个器官,本课题以膀胱为载体来探讨盆腔泌尿腹下神经传导的机制。将双侧腹下神经分离、结扎并离断,分别撕成约15-25条神经细丝,尽量撕细到足以记录单个或多个传入神经纤维动作电位。将神经细丝搭在记录电极上,同时经尿道导管用生理盐水或0.5%醋酸（AA）灌注扩张膀胱,记录膀胱压力改变时腹下神经传入神经的动作电位发放响应。结果:本研究纳入17只猫,共记录到90条腹下神经对生理盐水或0.5%AA引起的膀胱灌注扩张有响应。最后共鉴定出三种腹下神经传入纤维。第一类是机械敏感的非伤害性纤维,能在正常生理压力（10-40 cmH2O）下对膀胱扩张作出响应。第二类是机械敏感的伤害性纤维,仅对有害（痛觉）的高压（50-80 cmH2O）膀胱灌注扩张有响应。第三种类型是化学敏感的伤害性纤维,也叫“沉默”纤维,即使在生理高压膀胱灌注扩张时也无响应,但可被0.5%AA刺激致敏从而对低压膀胱灌注扩张作出响应。结论:这些结果表明,除盆神经的传入神经外,腹下神经传入纤维在膀胱痛觉传导也起重要作用。腹下神经传入纤维在正常生理压力下膀胱灌注扩张时“沉默”,但在化学刺激后反应敏感,这对于理解盆腔泌尿疼痛中膀胱痛觉的可能病理生理机制有重要的意义。
张琳娜[3]（2017）在《肠道益生菌对非酒精性脂肪肝的肝肾代谢功能的影响》文中提出目的:探讨肠道菌益生菌对非酒精性脂肪肝的肝肾代谢功能的影响。方法:对青岛大学医学院附属医院从2015年12月至2016年12月收治的120名非酒精性脂肪肝患者作为研究对象,并随机分为干预组和对照组各60例;两组患者均给予NAFLD患者的传统治疗,干预组患者在此基础上增加肠道益生菌的治疗。对两组患者服药前后的非酒精性脂肪肝的消退情况,肝脏彩超衰减系数,相关肝脏生化指标包括三酰甘油、总胆固醇、尿素氮、转氨酶以及空腹血糖进行比较分析。结果:1.在常规治疗的基础上服用肠道益生菌,服药肠道益生菌前轻度脂肪肝患者31人,中度脂肪肝患者26人,重度脂肪肝患者3人,服用肠道益生菌后3个月轻度脂肪肝患者为26人,脂肪肝恢复5人,中度脂肪肝患者22人,脂肪肝恢复4人,重度脂肪肝患者2人,脂肪肝恢复1人,服用药物前后进行统计学分析,轻度患者（X2=0.133 P<0.05）具有统计学意义,中度患者（X2=0.0.01 P<0.05）具有统计学意义,脂肪肝共消退10人（P<0.05）,具有统计学意义,肠道益生菌对非酒精性脂肪肝患者的治疗有积极影响,常规治疗的基础上加用肠道益生菌后可以使部分非酒精性脂肪肝消退,2.在常规治疗联合肠道益生菌患者在服用肠道益生菌前,肝脏超声衰减系数为0.84±0.08,服药后0.53±0.06,明显下降。而对未服用肠道益生菌常规治疗前肝脏超声衰减系数为0.85±0.07,服药后肝脏超声衰减系数为0.80±0.08,有所变化,但不明显。经过服用肠道益生菌药物,患者的肝脏超声衰减系数相对于治疗前及未服用肠道益生菌患者有明显降低（P<0.05）。两组数据比较有统计意义,在常规治疗非酒精性脂肪肝的方案的过程中服用适量的肠道益生菌,对非酒精性脂肪肝患者肝脏彩超有一定的影响,使肠道益生菌的肝脏彩超表现明显好转。3.在常规治疗非酒精性脂肪肝的方案的过程中服用适量的肠道益生菌,联合使用肠道益生菌组患者在用药前后在尿素氮、三酰甘油、总胆固醇、转氨酶检测指标比较具有显着性差异（P<0.05）,未联合使用肠道益生菌患者在服用前后各项指标间的比较无统计学差异（P>0.05）。服用肠道益生菌的非酒精性脂肪肝的患者的胆固醇、甘油三酯、尿素氮、转氨酶较未服用益生菌常规治疗患者好转明显,在非酒精性脂肪肝的治疗过程中服用适量的肠道益生菌能使其肝肾相关生化指标得到改善。结论:在常规治疗的基础上联合肠道益生菌治疗可以改善非酒精性脂肪肝患者的肝肾代谢功能,使非酒精性脂肪肝患者的肝脏彩超表现好转,使部分非酒精性脂肪肝患者得到消退。对非酒精性脂肪肝的辅助性治疗和病情的预防具有一定的积极作用,为非酒精性脂肪肝的治疗提供了新的方法,值得临床推广。
咸会丽[4]（2016）在《转录因子FOXC2与上皮性卵巢癌血管生成拟态的相关性研究》文中进行了进一步梳理目的本实验旨在研究转录因子FOXC2与血管生成拟态（VM）在人类上皮性卵巢癌中的表达及临床意义,并分析两者之间的相关性。利用siRNA瞬时转染方法沉默卵巢癌细胞SKOV3中FOXC2的表达,检测卵巢癌细胞中VE-cadherin的表达及对其体外成管能力的影响,探讨转录因子FOXC2在上皮性卵巢癌的发生、发展及转移中的作用。方法1、应用免疫组化方法分别检测FOXC2蛋白在正常卵巢组织以及上皮性卵巢癌组织中的表达情况,并应用CD34与PAS双重染色方法检测上皮性卵巢癌组织中VM的存在情况,分析FOXC2蛋白的表达情况与VM的关系。2、选取卵巢癌细胞系SKOV3,采用siRNA技术瞬时转染SKOV3细胞,分别构建空转的SKOV3细胞和FOXC2siRNA转染的SKOV3细胞。3、应用RT-PCR方法检测卵巢癌细胞中FOXC2和VE-cadherin的mRNA的表达。4、应用Matrigel基质胶构建体外三维培养模型,培养卵巢癌细胞,观察细胞的体外成管能力。结果1、在正常卵巢组织中,FOXC2可呈现阴性或弱阳性表达,在上皮性卵巢癌组织中,FOXC2呈强阳性表达。FOXC2在上皮性卵巢癌组织的阳性表达率明显高于正常卵巢组织中的阳性表达率,差异有统计学意义（P<0.05）。2、FOXC2在上皮性卵巢癌中的表达强度与肿瘤分期有关（P<0.05）,但与患者年龄、卵巢癌的组织类型、分化程度及有无淋巴转移均无关。3、VM在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率明显高于在正常卵巢组织中的阳性表达率,差异有统计学意义（P<0.05）。4、VM的表达率与上皮性卵巢癌的分化程度及有无淋巴转移有关（P<0.05）,而与患者的年龄、卵巢癌的组织类型、分期均无关。5、上皮性卵巢癌中VM的表达与FOXC2的表达呈正相关（r=0.404）。6、FOXC2siRNA转染的SKOV3细胞中FOXC2 mRNA的表达明显降低,同时VE-cadherin mRNA的表达也呈降低趋势,差异具有统计学意义（P<0.05）。7、FOXC2siRNA转染的SKOV3细胞在体外三维培养模型中的成管能力明显减弱,差异有统计学意义（P<0.05）。结论1、FOXC2可能影响卵巢癌的发生。2、上皮性卵巢癌组织中有VM的存在,FOXC2的高表达可能在促进VM的形成过程中起一定的作用。3、FOXC2的高表达以及VM的存在可能与上皮性卵巢癌的侵袭、转移有关。4、应用siRNA技术抑制卵巢癌SKOV3细胞中FOXC2的表达后,VE-cadherin mRNA的表达明显下降,细胞的成管能力减弱,提示靶向沉默FOXC2表达可能会减少卵巢癌VM的形成。
陈秋媚,樊凌[5]（2014）在《“面口合谷收”的六大现代机理》文中认为对应用现代医学手段解释"面口合谷收"机制的文献进行归纳总结,从合谷穴的形态解剖、针刺时面口温度变化、神经电生理、头面部血供、大脑中枢激活、生物全息理论、神经突触可塑等7个方面理清合谷与面口部之间的关系。
燕燕[6]（2011）在《梅洛—庞蒂具身性现象学研究》文中研究指明认识论或说知识的形式一直是西方哲学所关注的重要问题之一。自笛卡尔开始的近代哲学一改对本体论的诉求居主导地位的哲学传统,而把对知识论的批判确立为是首要的哲学问题。正是笛卡尔的这一创举,引发了知识论批判运动。笛卡尔认为知识只能来自纯粹的形式。解决知识的批判问题,只能从确立一种纯形式始起。而只有解决了知识形式的问题,才能从这一确定的形式中推导出本体。现象学正是沿着笛卡尔的覆辙而前行。然而,胡塞尔的现象学始终是在意识的魔圈内打转,而终于错过身体的经验。海德格尔在胡塞尔的晦暗不明之处终于引导出胡塞尔不堪明了的纯形式,而把它归还给每一个具体在世的存在者。即纯形式是此在的存在。同时,现象学也在海德格尔那里真正呈现出实事显现的外观。虽然,在海德格尔那里,此在是无身的,但此在所获得的世界却是由此在的存在所打开的。具身性由此表现出来。然而,仅仅说此在的存在是不够的,更恰当地说,这种存在更具有先验的色彩。此在的存在还必须要进一步下降或说还原。这就是此在以它的身体在世。梅洛-庞蒂正是在身体的意向性展开的知性中具体展示了此在如何以它的存在在世并怎样获得了一个世界。正是通过梅洛-庞蒂向我们揭示的知性的身体才使现象学所苦苦追求的纯形式显露。知识的纯形式其实是身体之肉身的形式。肉身的经验与历史,以及它的可转换性是实现一切知识的根本条件。不仅知识论是肉身哲学的,而且,世界也因为它围绕着肉身,被肉身所触、所感并与肉身构成空间的深度,世界因而也有它的肉身。因此,在知识论的肉身形式哲学基础上,本体论哲学在梅洛-庞蒂那里也获得了新的释义。
燕乔敏[7]（2011）在《无望、荒诞世界中的悖谬 ——伊凡·克里玛作品的悖谬主题分析》文中进行了进一步梳理捷克是中欧的一个小国,由于其独特的地理位置而成为了多国利益争端的场所,经历了不同时代的极权统治,在这种情况下“捷克人是怎样熬过来的”就成了捷克作家创作的主要题材之一,作为一名捷克作家,克里玛也不例外。“他的创作植根于他个人的命运,而他个人的命运又植根于民族的命运。”①克里玛的创作体现了一个弱小却坚韧的民族在各个极权统治时期的生存状态。在政治风云瞬息万变的情况下,个人以及整个民族都难以掌握自己的命运,陷入了一个个悖谬存在的怪圈,克里玛的作品生动地体现了捷克人在这无望、荒诞的社会中的悖谬人生。本文分三部分,第一部分分析了克里玛的“布拉格精神”与昆德拉的“终极悖谬”理论;第二部分主要分析克里玛作品的悖谬主题,克里玛在其中为我们展现了一个无望、荒诞世界中的种种悖谬,如熟悉与陌生、记忆与遗忘、忠诚与背叛等;第三部分主要分析悖谬世界中人们自我拯救的终极悖谬,无望、荒诞、悖谬的世界中人们寄希望于爱情,然而无情的现实证明爱情只是一个虚假的希望,他们的自我拯救依然是一个悖谬的追求。
刘懿[8]（2009）在《RNA干扰抑制人肺癌细胞HMGB1基因表达的实验研究》文中指出背景和目的肺癌是严重威胁人类健康和生命的恶性肿瘤，其发病率将在相当长时期内呈现显着上升趋势，已成为引起世界上癌症死亡率最主要原因1。高迁移率族蛋白B1（high mobility group box B 1，HMGB1），是一种存在于真核生物细胞内的非组蛋白染色体结合蛋白，参与多种生物学过程包括诸如基因转录、DNA修复等功能。HMGB 1过表达有抑制细胞凋亡，诱导细胞分化、细胞迁移、细胞增殖等作用2。最近研究表明它不但是一种转录因子和促生长因子，而且是一种重要的炎性细胞因子，并与肿瘤的发生、浸润、转移等生物学行为关系密切，有很大的临床价值3。HMGB1在肺癌中的研究处于起步和探索阶段。国内外并无其他关于HMGB1在肺癌中全方位系统性研究的文献报道。本研究在人肺鳞癌细胞株YTMLC-9、人肺腺癌细胞株A549、人大细胞肺癌细胞株L9981及人小细胞癌细胞株NCI-H446中筛选高表达HMGB1的细胞株，作为人肺癌细胞HMGB1基因研究的理想材料，为下一步进行的RNAi实验研究的细胞模型的选择奠定了基础；设计针对HMGB1为靶点的siRNA，观察通过RNA干扰抑制HMGB1基因表达后，高表达HMGB1的人肺癌细胞株L9981增殖和侵袭能力的改变，体外验证HMGB1基因做为治疗靶点的可行性；为临床开发应用和探索肿瘤治疗的新途径提供实验和理论基础；应用RNA干扰联合基因芯片技术检测HMGB1表达下调后肺癌细胞基因表达谱的差异情况，筛选与HMGB1相互作用的基因及可能的信号通路，探讨HMGB1基因在肺癌中的作用机制。方法1、常规培养人肺鳞癌细胞株YTMLC-9、人肺腺癌细胞株A549、人大细胞肺癌细胞株L9981及人小细胞癌细胞株NCI-H446，采用实时荧光定量PCR和Westernblot方法对人肺癌细胞HMGB1基因在4株细胞中的mRNA和蛋白水平的表达进行检测，筛选出高表达HMGB1基因的人肺癌细胞株。2、根据siRNA设计原则，设计合成靶向HMGB1基因的siRNA，采用阳离子脂质体试剂瞬时转染已经筛选出的高表达HMGB1的人大细胞肺癌细胞株L9981，利用实时荧光定量PCR和Western blot检测RNA干扰后HMGB1基因的沉默效果，评价siRNA设计的合理性及RNA干扰抑制HMGB1表达的有效性；确定RNA干扰抑制HMGB1表达确实有效后，培养人大细胞肺癌细胞株L9981，分为3组进行RNA干扰研究，分别为转染靶向HMGB1基因的siRNA组，转染无关序列组和空白对照组，于RNA干扰后48小时，用细胞活力计数仪测定3组细胞活力；分别在RNA干扰后24、48、72和96小时应用MTT实验检测3组细胞生存状态，计算生长抑制率并绘制生长曲线；应用boyden chamber法检测3组侵袭能力的差异。3、采用阳离子脂质体试剂向人肺癌细胞L9981转染靶向HMGB1基因的siRNA，下调HMGB1的表达。应用Affymetrix HU133 plus 2基因芯片检测人肺癌细胞L9981 HMGB1基因表达下调后，全基因表达谱的变化，并应用GCOS（Gene-ChipOperation Software）软件分析筛查数据，对相关基因和信号通路进行综合分析。结果：1、人肺鳞癌细胞株YTMLC-9、人肺腺癌细胞株A549、人大细胞肺癌细胞株L9981及人小细胞癌细胞株NCI-H446中均有HMGB1基因表达，其中人大细胞肺癌细胞株L9981表达水平最高，mRNA是表达量最低的人肺腺癌细胞株A549mRNA表达量的10．3倍，人大细胞肺癌细胞株L9981与其它3种人肺癌细胞株比较差异有统计学意义（P＜0．01）2、靶向HMGB1的siRNA成功抑制人大细胞肺癌细胞株L9981中HMGB1基因及蛋白表达（P=0．000），细胞活力检测仪测定RNA干扰48小时后，空白对照组和阴性对照组细胞活力显着大于siRNA转染组；MTT测定siRNA转染组细胞生长抑制率显着大于空白对照组和阴性对照组；boyden chamber小室细胞侵袭实验结果siRNA转染组穿膜细胞数明显减少，与空白对照组和阴性对照组比较，差异有显着性（P＜0．05）。3、RNA干扰抑制人大细胞肺癌细胞株L9981HMGB1基因表达后，GCOS软件分析基因芯片分析其表达谱的变化。结果发现1433个探针表达明显改变，对应有明确名称的基因为879个，其中上调的基因有295个，下调的有584个；EST序列216个，其中上调96个，下调120个。差异基因共涉及131个信号通路，主要为肺癌、钙信号通路、细胞通讯、细胞因子受体相互作用、ErbB信号通路、细胞基质黏附、细胞迁移、细胞信号转导、Jak-STAT信号通路、MAPK信号通路、p53信号通路、细胞周期、细胞凋亡以及Wnt信号通路等相关通路。经过Milano网站分析，其中678个基因有报道。在这678个基因中，与肺癌（检索词lung cancer）有相关文献报道的有209个，与癌症（检索词cancer）有相关报道的有526个，与侵袭（检索词invasion）有相关报道的有170个，或转移（检索词metastasis）有相关报道的有194个。结论：1、本研究在国内外首次报道HMGB1在人肺鳞癌细胞株、腺癌细胞株、大细胞癌细胞株及小细胞癌细胞株等4株肺癌细胞中的表达水平，筛选出HMGB1高表达的人肺癌细胞株L9981，HMGB1低表达的人肺癌细胞株A549，人大细胞肺癌L9981细胞株为HMGB1高表达细胞株，可作为进行肺癌细胞中研究HMGB1的实验材料。2、成功设计了靶向HMGB1的siRNA，应用RNA干扰技术在国内外首次将靶向HMGB1的siRNA转染至筛选出的高表达HMGB1的肺癌细胞株中，并成功的高效地下调人肺癌细胞L9981HMGB1基因的表达，成功构建了转染HMGB1的siRNA的肺癌细胞株和转染无关序列的肺癌细胞株。人肺癌细胞L9981HMGB1基因下调后，细胞增值和侵袭能力显着被抑制，表明HMGB1可作为人肺癌基因治疗潜在的靶点。3、本研究在国内外首先应用表达谱芯片研究人肺癌细胞L9981HMGB1基因下调后，其细胞基因表达谱变化情况，确定表达差异基因879个，主要涉及肺癌、钙信号通路、细胞通讯、细胞因子受体相互作用、ErbB信号通路、细胞基质黏附、细胞迁移、细胞信号转导、Jak-STAT信号通路、MAPK信号通路、p53信号通路、细胞周期、细胞凋亡以及Wnt信号通路等方面。经过Milano网站分析，其中678个基因有报道。在这678个基因中，与肺癌（检索词lung cancer）、侵袭和转移（检索词metastasis）报道较多的基因中。筛选出与肺癌、侵袭和转移相关报道较多的基因进行分析，其中上调的基因功能主要有血管形成、细胞通讯、抗凋亡、细胞增殖正调控和细胞迁移正调控等；在下调的基因中，主要功能与信号转导、细胞之间信号联系、细胞粘附、细胞与基质黏附、细胞周期调控、DNA修复、DNA复制、细胞迁移、细胞分化、细胞生长、细胞增殖和钙离子通道有关。表明HMGB1基因表达受很多相关基因及信号通路的调控，与肺癌的侵袭、转移及肺癌形成等生物学过程密切相关，其分子机制有待进一步深入探讨。
徐斌,胡自力[9]（2007）在《RNA干扰技术及其在肾癌基因治疗中的进展》文中研究指明RNA干扰（RNAi）是指生物体内由双链RNA（dsRNA）介导同源序列mRNA的特异性降解,从而导致基因沉默的现象。近年来,随着对RNAi研究的不断深入,其作用机制逐步阐明;同时作为阻断基因表达的新手段,RNAi技术也日趋成熟。它具有高效性和特异性,为RNAi在肿瘤基因治疗方面的应用提供了有力的工具。本文对RNAi技术及其在肾癌基因治疗研究中的进展作一综述。
瓦茨拉夫·哈维尔,崔卫平[10]（2000）在《对沉默的解剖(上)》文中指出
二、对沉默的解剖(上)（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、对沉默的解剖(上)（论文提纲范文）
（1）法舒地尔促进小胶质细胞吞噬及其介导髓鞘再生的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 常用缩写词中英文对照表 |
| 前言 |
| 第一部分 Fasudil对BV-2小胶质细胞吞噬功能的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 结论 |
| 第二部分 Fasudil通过诱导小胶质细胞向M2 表型极化发挥抗炎和增强吞噬的作用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第三部分 Fasudil促进小胶质细胞吞噬髓鞘碎片的机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第四部分 Fasudil通过促进CPZ小鼠髓鞘碎片的吞噬和神经营养因子的表达影响髓鞘再生 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 综述 小胶质细胞在多发性硬化动物模型髓鞘保护和再生过程中的两面性 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）盆腔泌尿疼痛动物模型的构建及腹下神经传导神经纤维构成的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一章 临床男性盆腔疼痛(胡桃夹综合征并精索静脉曲张)患者疼痛物质的检测 |
| 前言 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二章 雄性大鼠盆腔疼痛(胡桃夹综合征法)动物模型的构建 |
| 前言 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 雌性大鼠盆腔疼痛(胡桃夹综合征法)动物模型的构建 |
| 前言 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 醋酸诱导盆腔泌尿疼痛动物模型的构建 |
| 前言 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五章 腹下神经传入神经膀胱疼痛应答神经纤维构成的研究 |
| 前言 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 4. 致谢 |
| 5. 利益冲突 |
| 参考文献 |
| 综述 胡桃夹综合征致盆腔泌尿疼痛的致痛机理 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 不足及研究展望 |
| 博士期间的成果 |
| 致谢 |
（3）肠道益生菌对非酒精性脂肪肝的肝肾代谢功能的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 研究 对象与方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 患者的纳入标准 |
| 3 患者的排除标准 |
| 4 脱落标准 |
| 5 治疗方法 |
| 6 观察指标及疗效判断 |
| 7 统计学方法 |
| 结果 |
| 1 肠道益生菌对非酒精性脂肪肝的影响 |
| 2 肠道益生菌对非酒精性脂肪肝患者肝脏彩超的影响 |
| 3 两组人群在服用药物前后的各项检测数值的比较 |
| 4 不良反应 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 肠道益生菌对在非酒精性脂肪肝的治疗过程中研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 缩略词表（附录） |
| 附表 |
| 致谢 |
（4）转录因子FOXC2与上皮性卵巢癌血管生成拟态的相关性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 一、FOXC2 在上皮性卵巢癌的表达及与血管生成拟态(VM)的关系 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 二、抑制FOXC2 的表达对卵巢癌细胞SKOV3 体外成管能力的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（5）“面口合谷收”的六大现代机理（论文提纲范文）
| 1 形态解剖学基础 |
| 1.1 基本解剖结构: |
| 1.2 动物实验: |
| 2 针刺合谷穴对面口温度的影响 |
| 3 针刺合谷穴时面部血供的变化 |
| 4 针刺合谷穴的生物电机制 |
| 5 针刺合谷穴的的中枢激活机制 |
| 5.1 在健康人身上: |
| 5.2 在面瘫患者身上: |
| 5.3 刺激健康人: |
| 6 沉默突触可塑性理论 |
（6）梅洛—庞蒂具身性现象学研究（论文提纲范文）
| 内容摘要 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 一、知识论含义的具身性 |
| 二、本体论含义的具身性 |
| 第1章 导言关于梅氏具身现象问题的提出 |
| 1.1 梅氏“现象学”其它理解的不能解释之“谜” |
| 1.2 为什么说梅洛-庞蒂的思想是关于具身现象的 |
| 1.3 关于梅洛-庞蒂具身思想的研究现状 |
| 1.4 本论文的研究目标以及研究方法 |
| 第2章 近代去身性哲学的困境与先验现象学的经略 |
| 2.1 心灵主义认知哲学 |
| 2.1.1 笛卡尔的我思 |
| 2.1.2 笛卡尔的机械身 |
| 2.2 我思自身同一性的知识形式 |
| 2.3 去身性哲学的困境：心灵何以有它的认知对象？ |
| 2.4 胡塞尔认识论批判的意识现象学 |
| 2.4.1 作为观念的纯形式 |
| 2.4.2 意识的意向性 |
| 2.4.3 纯粹意识概念 |
| 2.4.4 胡塞尔视角中的身体 |
| 2.5 从詹姆士的具身性思想看胡塞尔与之失之交臂 |
| 2.6 海德格尔的“此在”“在世”的具身性思想 |
| 2.6.1 此在的在世 |
| 2.6.2 此在的知 |
| 第3章 自然化先验现象学的梅氏具身性现象学 |
| 3.1 结构性行为的深意解读 |
| 3.1.1 亚里士多德的形式灵魂观 |
| 3.1.2 阿奎那论行为的结构 |
| 3.1.3 梅氏批判经典反射行为与行为主义 |
| 3.1.4 梅氏现象学地改造形式的灵魂与行为的结构 |
| 3.1.5 知觉以及知觉的现象学地位 |
| 3.2 现象的身体意向体验 |
| 3.2.1 去身性哲学的缺口：幻肢痛现象 |
| 3.2.2 从此在在世到身体在世 |
| 3.2.3 身体图式的概念 |
| 3.2.4 身体的意向性 |
| 3.3 肉身意向的知识形式 |
| 3.3.1 语言是身体的能力 |
| 3.3.2 从绘画艺术看具身现象 |
| 3.4 身体与灵魂 |
| 第4章 梅氏的本体论的肉身 |
| 4.1 身体与世界 |
| 4.1.1 身体是时间主观体验的原始体验 |
| 4.1.2 身体的空间是感知外在空间的原初的根基 |
| 4.2 世界的肉身 |
| 4.2.1 肉身的概念 |
| 4.2.2 野性的存在 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（7）无望、荒诞世界中的悖谬 ——伊凡·克里玛作品的悖谬主题分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 布拉格精神 |
| 1.1 无望、荒诞的布拉格世界 |
| 1.2 布拉格精神之“悖谬” |
| 第二章 克里玛小说的悖谬主题 |
| 2.1 熟悉与陌生 |
| 2.2 记忆与遗忘 |
| 2.3 忠诚与背叛 |
| 第三章 悖谬世界中自我拯救的终极悖谬 |
| 3.1 悖谬世界中的自我拯救——“爱” |
| 3.2 自我拯救之“爱”的悖谬 |
| 3.3 悖谬世界中人的存在 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（8）RNA干扰抑制人肺癌细胞HMGB1基因表达的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、HMGB1基因在人肺癌细胞株A549、L9981、NCI-H446和YTMLC-9中的表达研究 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 二、RNA干扰抑制HMGB1表达对人肺癌细胞株L9981的生物学行为影响 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 三、RNA干扰抑制人肺癌细胞株L9981HMGB1基因表达后基因表达谱变化的研究 |
| 3.1 对象和方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 |
| 肺癌淋巴结转移分子标志物检测研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
四、对沉默的解剖(上)（论文参考文献）
- [1]法舒地尔促进小胶质细胞吞噬及其介导髓鞘再生的机制研究[D]. 丁智斌. 山西医科大学, 2021
- [2]盆腔泌尿疼痛动物模型的构建及腹下神经传导神经纤维构成的研究[D]. 郭文彬. 南方医科大学, 2021
- [3]肠道益生菌对非酒精性脂肪肝的肝肾代谢功能的影响[D]. 张琳娜. 青岛大学, 2017(01)
- [4]转录因子FOXC2与上皮性卵巢癌血管生成拟态的相关性研究[D]. 咸会丽. 泰山医学院, 2016(06)
- [5]“面口合谷收”的六大现代机理[J]. 陈秋媚,樊凌. 内蒙古中医药, 2014(12)
- [6]梅洛—庞蒂具身性现象学研究[D]. 燕燕. 吉林大学, 2011(08)
- [7]无望、荒诞世界中的悖谬 ——伊凡·克里玛作品的悖谬主题分析[D]. 燕乔敏. 西北民族大学, 2011(06)
- [8]RNA干扰抑制人肺癌细胞HMGB1基因表达的实验研究[D]. 刘懿. 天津医科大学, 2009(11)
- [9]RNA干扰技术及其在肾癌基因治疗中的进展[J]. 徐斌,胡自力. 国际泌尿系统杂志, 2007(05)
- [10]对沉默的解剖(上)[J]. 瓦茨拉夫·哈维尔,崔卫平. 社会科学论坛, 2000(01)