猪慢性心肌缺血模型的构建

一、猪慢性心肌缺血模型的制作（论文文献综述）

丁永胜^[1]（2020）在《基于活血谱效相关的三七质量评价研究》文中研究指明目的三七为五加科植物三七Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen的干燥根及根茎,具有散瘀止血,消肿定痛的功效。因其有着活血止血双向作用的特性,在医疗保健中应用越来越广泛。中药质量评价方法是控制中药质量、保障药物疗效的有效手段。随着科学技术的发展,三七质量评价研究越来越深入,解决了三七质量控制中的大部分问题,但仍存在一些难题尚未解决,如:因三七有效成分群尚未完全明确,现建立的以化学成分含量为依据的质量评价方法无法完全反映三七真实药效;以传统性状特征为依据的三七商品规格等级划分方法缺乏系统的现代化学及药理学数据支撑。通过前期研究及文献查阅了解到三七活血有效成分主要为三七总皂苷,而三七总皂苷具体组成尚未完全阐释清楚,三七总皂苷含量与三七性状特征之间的关系也无统一定论,因此,仅以几个三七皂苷单体含量为评价指标的质量控制方法存在一定不足,以三七性状特征划分三七商品规格等级缺乏科学依据。基于上述背景,本研究拟收集50批次不同产地、不同商品规格的三七,以活血功效为切入点,利用谱-效相关法深入研究三七活血有效成分群组成,以三七有效成分群含量为依据,结合三七谱-效关系,利用灰色关联分析法建立能够反映三七真实药效的质量评价方法,建立以活血药效为依据的三七商品规格等级划分新方法。方法1三七资源调查及实验样品制备通过文献检索确定三七资源调查及实验样品收集范围,采取文献调查、实地调查及走访调查的方式了解三七种植资源分布和市场销售的情况并收集产地信息明确的三七样品,以70%乙醇为溶剂采用加热回流法提取所收集到的三七样品,为后续研究做准备。2三七药物谱研究取有代表性的14批次三七药材,有目的地制备谱图差异明显的14批次三七样品,在前期研究基础上,通过优化色谱条件,提升仪器分析检测化学成分的能力,建立三七的HPLC指纹图谱,并对其共有峰进行定量/半定量分析,得到三七的药物谱。3三七活血药效谱研究采用体外毛细管凝血实验,观察具代表性的14批次三七对大鼠毛细管凝血时间的影响,初步评价14批次三七活血作用强弱。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）缺血再灌注损伤模型,通过观测具有代表性的14批次三七药材对模型大鼠脑梗死面积百分比、脑失水率、脑体指数的影响,进一步评价三七活血作用强弱。最终得到三七抗毛细管凝血时间药效谱和抗脑缺血再灌注损伤药效谱。4三七活血有效成分群的筛选采用熵值法分别计算大鼠MCAO缺血再灌注损伤实验的综合药效指标、三七活血作用综合药效指标。运用偏最小二乘法,将药物谱分别与单一药效指标和综合药效指标进行关联分析,筛选得到三七的抗毛细管凝血有效成分群、抗脑缺血再灌注损伤作用的有效成分群和三七活血作用的有效成分群。5基于活血功效的三七质量评价方法的建立采用HPLC法检测50批次不同产地、不同商品规格的三七活血有效成分群含量,通过灰色关联法结合活血有效成分群各指标药效系数,构建三七质量评价模型,综合评价三七质量,并依据相对加权关联度大小,设置商品规格等级阈值,划分三七商品规格等级,建立三七质量评价及商品规格等级划分方法。结果1三七资源调查及实验样品制备三七种植地主要分布于云南文山州、红河州和玉溪地区,广西仅德保、坡洪等地有少量种植。市场销售三七主产于云南,集散于文山。本研究共收集到50批不同产地、不同商品规格的三七样品,对所收集到的样品采用加热回流提取法制备三七70%乙醇提取物干膏,发现所收集到的50批次三七样品出膏率范围为24.41%～50.31%,说明各批次三七化学成分含量或种类存在一定差异,可作为后续实验研究材料。2三七药物谱研究通过对14批次三七进行HPLC分析,建立了三七的HPLC指纹图谱,共确定了 23个共有成分,指认了其中 12 个成分（N-R1、G-Rg1、G-Re、20（R）N-R2、G-Rg2、G-Rh1、G-Rb1、G-Rc、G-Rb2、G-Rd、N-Ft1、20（R）G-Rh2）,均为皂苷类化合物。对已指认的 12个共有成分和11个未指认成分分别进行定量及半定量分析,获取了三七的药物谱。14批次三七12个共有皂苷类成分含量分别在0.61%～1.29%、3.90～5.90%、0.42%～1.23%、0.06%～0.11%、0.21%～0.61%、0.14%～0.27%、1.82%～3.70%、0.03%～0.07%、0.08%～0.21%、0.75%～1.30%、0.03%～0.15%、0.04%～0.15%范围内。以上结果说明14批次三七化学成分含量存在较大差异,可继续进行后续实验研究。3三七活血药效谱研究研究结果表明:14批次三七的活血效果确实存在显着性差异。体外毛细管凝血实验显示,14批次三七凝血时间范围为59.17～97.08 s,与空白组比较均可显着延长大鼠毛细管凝血时间;大鼠脑缺血再灌注实验结果显示,14批次三七脑梗死面积百分比、脑失水率及脑体指数范围分别为5.87%～32.08%、79.76%～81.45%、0.59%～0.66%,14批次三七给药组各药效指标与模型组比较,差异均具有统计学意义。以上结果为谱-效相关法研究三七活血有效成分群提供了丰富的药效学信息。4三七活血有效成分群的筛选采用熵值法,建立了三七的抗MCAO脑缺血再灌注损伤综合药效谱和活血作用综合药效谱。药物谱-抗毛细管凝血药效指标相关结果表明:23个共有化合物中,20个化合物对延长毛细管凝血时间起正向作用。已指认的化合物中,G-Rb1、G-Rb2和G-Re对延长毛细管凝血时间贡献度最高,（R）N-R2、G-Rh1对该指标有明显的负向作用。药物谱-抗MCAO脑缺血再灌注损伤药效指标相关结果表明:23个共有化合物中17个成分对降低大鼠脑梗死面积起正向作用;15个成分对降低大鼠脑失水率起正向作用;9个成分对降低大鼠脑体指数起正向作用。药物谱-抗脑缺血再灌注损伤综合药效谱相关结果表明,23个共有成分中18个成分对减轻脑缺血再灌注损伤起正向作用,已指认的化合物中,G-Rb2、G-Rc、G-Rd对抗脑缺血再灌注损伤贡献度最大,（R）N-R2、G-Rh1、N-Ft1对脑缺血再灌注损伤起负向作用。药物谱-活血作用综合药效指标相关结果表明:23个共有成分中17个化合物对活血综合药效指标起正向作用。已指认的化学成分中,G-Rb2、G-Rc、G-Rd、N-R1、G-Rb1五种成分对三七活血作用所作贡献较大,G-Rh1、（R）N-R2、N-Ft1对三七活血作用有明显的负向影响。无论体外、体内实验G-Rh1、（R）N-R2均对三七活血指标表现出明显的负向影响,N-Ft1对脑缺血再灌注损伤和综合药效也表现出明显的负向影响,说明G-Rh1、（R）N-R2、N-Ft1可能存在潜在的促凝作用。5基于活血功效的三七质量评价方法的构建利用HPLC法对50批次三七进行了活血有效成分的定量/半定量分析,采用灰色关联法成功构建三七质量评价模型,建立了三七商品规格等级划分新方法。50批次三七相对加权关联度大小范围为0.4170～0.5210,相对加权关联度越大,三七质量越优。人为设置三七商品等级相对加权关联度阈值,初步将50批次三七划分为4个等级（Ⅰ级:相对加权关联度≥ 0.5000;Ⅱ级:0.5000>相对加权关联度≥ 0.4600;Ⅲ级:0.4600>相对加权关联度≥0.4200;Ⅳ级:0.4200>相对加权关联度）,检测的50批三七中Ⅰ级8批次,Ⅱ级14批次,Ⅲ级26批次,Ⅳ级2批次。结论1.本研究建立了基于谱-效相关的三七活血作用有效成分群的快速筛选方法,为全面揭示三七有效成分群奠定了基础,也为其他中药材有效成分群的辨识提供了借鉴。2.首次采用熵值法综合体外、体内活血药效指标,利用谱-效相关法明确了三七活血有效成分群组成,为三七质量评价研究、临床合理使用和资源开发利用提供了参考。3.以有效成分的药效系数为权重、含量为依据,采用灰色关联分析法建立了能够反映三七药效的质量评价方法和三七商品规格等级划分新方法,为三七及其他多指标成分中药材的质量评价方法研究提供了参考。

张金铃,李亮,荣培晶,孟宏,田毅,何勋,贾术永,张今朝,李少源,赵斌,周晟芳,刘欢,孙铭鸿,张峰,雷洪涛,方继良^[2]（2019）在《基于ERK表达探讨针刺干预大型实验动物猪心肌缺血效应的初步观察》文中指出目的:观察埋置电针对慢性心肌缺血模型猪心肌ERK表达的影响,探讨针刺应用于干预大型实验动物猪心肌缺血的方法可行性。方法:实验采用普通级巴马小型猪,分为三组:正常对照组、慢性心肌缺血模型组、针刺组,造模方法为于中华小型猪左冠状动脉左前降支放置Ameroid缩窄环,造模术后4周进行穴位埋针2周并加2次20分钟的电针治疗。术后六周后心脏取材,进行ERK表达及电镜检测。结果:针刺组与模型组比较,ERK1/2的表达均显着增强（**P <0.01）;模型组和针刺组比较心肌细胞线粒体损伤评分没有显着性差异;模型组与正常组比较心肌细胞线粒体损伤评分升高（**P <0.01）。结论:手术放置蛋白缩窄环于左前降支制备大型实验动物猪心肌缺血模型方法可行,针刺可能通过调节ERK通路发挥增强机体保护细胞缺血损伤的能力。

张东,贾连群,杨关林,李阳,陈奋^[3]（2018）在《急慢性心肌缺血动物模型造模方法研究简况》文中提出急慢性心肌缺血动物模型的有效建立是中医药科研实验及临床研究的重要基础。建立急性心肌缺血模型方法有三种,（1）开胸手术:可构建最接近临床的急性心肌缺血模型,操作较为复杂,受实验动物状态、结扎部位、结扎程度等影响较大。（2）闭胸手术:主要针对小型猪、犬等小型动物造模,实验成本高,缺点同样是受不可控制因素影响较大。（3）药物干预:操作简单,心肌缺血状态持续时间较短,一般用于观测时间较短的急性心肌缺血研究。慢性心肌缺血模型复制有三种,（1）冠脉外慢性收缩:微创手术植入缩窄环,根据所选动物及缩窄环脂肪位置,缺血面积与死亡率不同。（2）冠脉内慢性狭窄:微创手术植入堵塞物或机械损伤使血管壁增厚,血流量减少,成模率较低。（3）高脂饲料:操作简单,多联合其他方法复制慢性心肌缺血,小型猪急性心肌缺血模型稳定性和重复性较好,适用于AS和冠心病防治、新药研究等。急慢性心肌缺血动物模型建立方法各有不同,各有优缺点,应根据实验目的、设备条件和经费等选择:需以小型猪为急性心肌缺血研究对象,宜选闭胸手术法造模;研究慢性心肌缺血,实验动物常选小型猪和犬等小型动物,高脂饲料联合其他药物造模为首选。中医药防治急慢性心肌缺血备受关注,实验研究动物模型选择无明显规律,观测中药复方干预对模型相关指标影响为主。未来期待探索更接近中医特色的急慢性心肌缺血动物模型,尤其是运用辨证施治思维,创建具有不同中医证型特点的动物模型。

李伟,Winston Ng Shim,Eugene Kwangwei Sim^[4]（2018）在《血管生成素-1对猪慢性缺血心肌中功能性新生血管增生的促进作用》文中指出目的对比血管生成素-1（angiopoietin-1,ANG-1）和血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在猪慢性心肌缺血模型中的促血管再生效果。方法利用Ameroid血管压缩环建立26只猪慢性心肌缺血研究模型,4周后分成3组:腺病毒携带ANG-1组（Ad ANG-1,n=9）,腺病毒携带VEGF组完全恢复灌注术后4周仍然保持缺血状态（Ad VEGF,n=10）和空载体对照组（n=7）。分别在腺病毒介导的基因移植4和12周后,利用荧光微球法测定缺血心肌的局部血流量,并同时进行免疫组化检测。结果基因移植后4周,Ad ANG-1组左心室心肌缺血区的灌注量[（3.25±0.16）m Lmin-1g-1]明显高于Ad VEGF组[（1.09±0.13）m Lmin-1g-1]和对照组[（1.20±0.03）m Lmin-1g-1]（P<0.05）。基因移植后12周,Ad ANG-1组和Ad VEGF组的左心室缺血区心肌微血管密度分别为（19.61±1.76）/0.572 mm2心肌组织和（18.17±1.43）/0.572 mm2心肌组织,均明显高于对照组的（13.53±0.92）/0.572 mm2心肌组织（P<0.05）。但就直径50100μm小动脉密度而言,Ad ANG-1组较空载体对照组显着增加[（1.9±0.4）/0.572 mm2心肌组织切面vs.（0.7±0.2）/0.572 mm2心肌组织切面,P<0.05],而VEGF组与空载体对照组相较则无明显差异。Ad ANG-1组增加了心肌微血管的密度进而提高了局部心肌灌注。结论 VEGF和ANG-1基因转移均可促进血管再生,但只有ANG-1可以促进功能性小血管的再生,从而稳定有效地增加了心肌灌注,并为心功能的改善提供了必要的组织解剖学基础。

曹邦明^[5]（2018）在《远隔缺血适应对心肌缺血再灌注损伤的基础和临床研究》文中研究说明研究背景:急性ST段抬高型心肌梗死（ST-Elevation Myocardial Infarction,STEMI）给人类造成沉重的健康与经济负担,迅速地开通闭塞冠状动脉“罪犯血管”（culprit vessel）,是限制梗死范围（infarction size,IS）的最有效方法,然而,缺血心肌再灌注可能导致额外的心肌损伤,称为缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury,IRI）。2003年,Zhao等提出缺血后适应（ischemic postconditioning,IPost C）概念,可挽救心肌,然而,最大的DANAMI-3-i POST试验和最新荟萃分析结果阴性。1993年Przyklenk最早提出远隔缺血适应概念（Remote ischemic conditioning,RIC）,RIC可以在心肌梗死发生后再灌注实施前（远隔缺血时适应remote ischemic perconditioning,RIPer C）、再灌注实施后（远隔缺血后适应remote ischemic postconditioning,RIPost C）实施。然而,Verouhis等人最近临床研究,使用多达7个下肢RIPost C周期,至少有一个周期在再灌注前开始,未能减少前壁STEMI梗死范围。RIPOST-MI研究RIPer C与IPost C联合没有进一步减少梗死面积。LIPSIA CONDITIONING研究,院内RIPer C与IPost C联合干预,RIPer C+IPost C提高心肌挽救指数。鉴于近年临床研究IPost C阴性报道,我们将目光转向RIC,尤其是RIPer C与RIPost C联合。魏盟等使用在体大鼠心肌梗死模型RIPer C和RIPost C组合未能进一步提供保护,该实验RIPer C与RIPost C时间紧密连接在一起,RIPer C与RIPost C时间间隔为零,类似于一种循环次数加强的远隔缺血适应过程,过度适应“hyperconditioning”可能是有害的。RIPer C与RIPost C有一定的时间间隔才符合临床,因此,需要探索RIPer C间隔一定时间再实施与RIPost C的联合,观察是否比一种RIC获益。细胞自噬在心肌IRI中起关键作用,魏超研究大鼠IR模型,活化的自噬在心肌缺血后适应中,对心肌起保护作用。韩志华研究,在正常小鼠而非糖尿病（DM）小鼠,RIPost C诱导心肌细胞自噬减轻IRI。然而,心肌IRI中RIPer C涉及到自噬的研究尚未见报道。基质衍生因子-1α（Stromal derived factor 1α,SDF-1α）、一氧化氮（NO）可能是缺血后适应保护性体液因子,RIPer C如何影响STEMI患者SDF-1α、NO表达尚无研究。鉴于以上研究背景,我们寻求证明:⑴RIPer C与RIPost C联合应用能否减轻IRI,对心脏具有保护作用?RIPer C与RIPost C联合是否优于一种RIC?⑵RIPer C如果有心脏保护作用,RIPer C诱导的心脏保护是否与自噬有关?⑶SDF-1α、NO是RIPer C对STEMI患者保护机制之一吗?第一部分远隔缺血适应对兔心肌缺血再灌注损伤的基础研究目的:在体兔心肌缺血再灌注模型评估远隔缺血时适应（RIPer C）与远隔缺血后适应（RIPost C）组合是否产生协同效应。RIPer C诱导的心脏保护作用是否涉及自噬?方法:雄性新西兰大白兔随机分成8组。1:假手术组（Sham组）。2:缺血再灌注模型组（IR组）（Model组）,心肌缺血40分钟,再灌注3小时。3:远程缺血时适应组（RIPer C）。4:远程缺血后适应组（RIPost C）。5:U1组-远程缺血时适应+远程缺血后适应,两组间隔0分钟。6:U2组-远程缺血时适应+远程缺血后适应,两组间隔5分钟。7:U3组-远程缺血时适应+远程缺血后适应（RIPost C）两组间隔10分钟。8:3MA组-3MA+远程缺血时适应（RIPer C）。RIC方案为-对左侧股动脉用微血管夹阻断血流5分钟,松开五分钟,重复三个循环。检测再灌注3小时血清肌钙蛋白I（c Tn I）,电镜观察心肌形态学和自噬活性改变,Real-time PCR法检测Beclin-1、LC3、P62、Bcl2、Bax、Caspase 3六个基因相对含量在兔心肌中表达水平。喂养四周后,超声心动图检查,测量左室舒张末内径（left ventricular end-diastolic diameter,LVEDd）,左心室收缩末期内径（LVIDs）,左室射血分数（left ventriculare jection fraction,LVEF）,左室短轴缩短率（fraction shortening,FS）。通过斑点追踪应变评估左心室整体纵向收缩期峰值应变（GLPS）,用2,3,5—氯化三苯基四氮唑（TTC）染色确定心肌梗死面积。结果:1.各组兔体重无差异（P>0.05）。七组在结扎冠状动脉后均有心电图II导联ST段弓背抬高,松开结扎线后10分钟ST段均回落,ST段回落无组间差异（P>0.05）2.血清肌钙蛋白I,与Sham组相比,IR、RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3、3-MA+RPer C组c Tn I均升高（P<0.05）,与IR组相比,RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3组c Tn I均减少（P<0.05）。RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3组之间c Tn I无统计学差异。3-MA+RPer C组c Tn I比RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3组升高。3.RIC对心肌梗死面积的影响Sham组TTC染色无梗死。心肌梗死面积（IS/LV）,IR组33.72±9.96%,RIPer C组21.37±11.11%,RIPost C组24.75±6.50%,U1组20.75±6.63%,U2组24.00±9.31%,U3组19.58±7.23%,3-MA+RPer C组38.86±8.66（P<0.05）。与IR组相比,RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3组梗死面积均减少（P<0.05）,3-MA+RPer C组心肌梗死面积无统计学差异。RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3组之间,梗死面积无统计学差异。4.RIC对左室功能的效应各组GLPS结果（负值）:Sham组21.5125±2.7378,IR组10.4667±1.5338,RIPer C组10.6222±3.9493;RIPost C组11.1444±3.2269,U1组13.9889±2.4882,U2组13.5667±3.1008,U3组12.6667±2.0304,3-MA+RPer C组12.2444±2.5274（P<0.05）。与Sham组相比,IR、RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3、3-MA+RPer C组GLPS绝对值均减小（P<0.05）;与IR组比较,U1、U2组GLPS绝对值增大,RIPer C、RIPost C、U3、3-MA+RPer C组组间无统计学差异。各组EF结果:Sham组63.5000±4.3753,IR组44.5556±3.5746,RIPer C组49.1111±7.3220;RIPost C组49.7778±4.2361,U1组50.3333±2.9580,U2组53.1111±5.1343,U3组49.6667±4.0927,3-MA+RPer C组48.6667±3.6742。与Sham组相比,IR、RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3、3-MA+RPer C组EF值均减小（P<0.05）;与IR组比较,RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3组EF值均增大（P<0.05）,IR组与3-MA+RPer C组组间无统计学差异。各组FS结果:与IR组比较,RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3组FS值均增大（P<0.05）,IR组与3-MA+RPer C组组间无统计学差异。各组LVEDd结果:与Sham组相比,IR、RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3、3-MA+RPer C组均无统计学差异;LVIDs结果:与Sham组相比,RIPer C、RIPost C、U2、3-MA+RPer C组LVIDs值增加（P<0.05）;与IR组比较,U3组LVIDs值增大（P<0.05）。5.Real-time PCR法检测Beclin-1、LC3、P62、Bcl2、Bax、Caspase 3六个基因相对含量。LC3 m RNA与Sham组相比,RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3、3-MA+RPer C组均升高（P<0.05）,IR组升高但无统计学差异（P<0.05）。与IR组比较,RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3、3-MA+RPer C组均升高,（P<0.05）。与3-MA+RPer C组比,RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3均高（P<0.05）。Beclin-1 m RNA与Sham组相比,RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3组均升高（P<0.05）,IR、3-MA+RPer C组无统计学差异（p>0.05）。与IR组相比,RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3组均升高（P<0.05）,3-MA+RPer C组无统计学差异（p>0.05）。RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3组组间无统计学差异（p>0.05）。P62 m RNA与Sham组相比,IR、RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3、3-MA+RPer C组均降低（P<0.05）;与IR组相比,RIPost C、U1、U2、U3组无统计学差异（p>0.05）。Bcl2/Bax与Sham组相比,RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3组均增大（P<0.05）;IR、3-MA+RPer C组组间无统计学差异（p>0.05）。caspase3 m RNA与Sham组相比,IR、RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3、3-MA+RPer C组均增大（P<0.05）;与IR组相比,RIPer C、RIPost C、U1、U2、3-MA+RPer C组均减小（P<0.05）,U3无统计学差异（p>0.05）。RIPer C、RIPost C、U1、U2、U3组组间无统计学差异（p>0.05）。6.透射电子显微镜检测自噬小体结果在IR组,心肌纤维排列整齐,线粒体可见水肿,线粒体膜完整,自噬小体数与Sham组相比显着增多,每1000μm2中的自噬小体数为39.67±4.93;在RIPer C组有多个双层膜包裹着发生皱缩的线粒体的吞噬小体,每1000μm2中自噬小体数为90.67±12.06;RIPost C组、U1组、U2组、U3组中,线粒体可见水肿,自噬小体数与RIPer C组一样,均明显增加,每1000μm2中自噬小体数分别为106.7±16.26、94±17.09、106.3±26.5、97.67±7.02,各组之间没有显着性差异。RIPer C组、RIPost C组、U1组、U2组、U3组与IR组相比,自噬小体数量有显着性差异（P<0.01）;在3MA组,线粒体部分肿胀,线粒体嵴清晰可见,膜完整,自噬小体数较少,每1000μm2中自噬小体数为57±7,与RIPer C组、RIPost C组、U1组、U2组、U3组相比,自噬小体数量有显着性差异（P<0.05）。结论1.RIPer C、RIPost C处理均减少梗死范围,减轻IRI,但RIPer C和RIPost C组合未能提供进一步的保护,不产生协同效应。2.RIPer C诱导了自噬,抑制细胞凋亡,活化的自噬在远隔缺血时适应中对心肌起保护作用。第二部分远隔缺血时适应对STEMI患者心肌缺血再灌注损伤的临床研究目的:探讨肢体远隔缺血时适应（Remote ischemic perconditioning,RIPer C）对急性ST段抬高性心肌梗死（ST-Elevation Myocardial Infarction,STEMI）患者心肌缺血再灌注损伤的影响。方法:研究对象为苏州大学附属第一医院2016年1月-2017年6月确诊STEMI并行急诊直接经皮冠脉介入治疗（Primary Percutaneous Coronary Intervention,PPCI）患者共78人。随机分为远隔缺血时适应组（PPCI+RIPer C组:n=40）和对照组（PPCI组:n=38）,两组均接受PPCI。远隔缺血时适应组在球囊扩张前针对左下肢行RIPer C。术前和术后0.5、8、24、48、72小时抽取患者静脉血测定血清肌酸磷酸激酶同工酶（creatine kinase-MB,CK-MB）、血清基质衍生因子-1α（stromal cell-derived factor-1alpha,SDF-1α）、一氧化氮（nitric oxide,NO）浓度。术后第7天心脏超声评估左心功能。结果:1.两组在性别、年龄、危险因素、入院时生命体征、缺血时间、冠脉病变情况、造影剂用量、植入支架情况等方面均无统计学差异。2.远隔缺血时适应组相较对照组术后CK-MB峰值明显减低（334.13±42.87ng/ml VS 387.21±64.12 ng/ml,P<0.01）。远隔缺血时适应组CK-MB曲线下面积中位数为728.36[365.63-931.98],对照组曲线下面积中位数为817.00[683.30-1126.00],远隔缺血时适应组较对照组CK-MB曲线下面积明显减低（P=0.02）。3.两组应用各时间点血清SDF-1α浓度绘制曲线,计算出曲线下面积。远隔缺血时适应组中位数为421.800[304.200-619.000],对照组为357.000[258.600-479.800],远隔缺血时适应组显着高于对照组（P=0.044）。4.两组应用各时间点血清NO浓度绘制曲线,计算出曲线下面积。远隔缺血时适应组中位数为5.726[3.924-13.173],对照组中位数为4.836[3.297-6.142],远隔缺血时适应组显着高于对照组（P=0.035）。5.两组术后心脏超声评估LVEF,PPCI+RIPer C组及PPCI组患者术后LVEF分别为51.56±6.57%,49.50±6.38%,（P=0.164）,两组无显着差异。结论:针对左下肢行RIPer C可以降低STEMI患者心肌酶评估的梗死面积,升高术后血清一氧化氮（NO）以及基质细胞衍生因子-1a（SDF-1a）水平。SDF-1a和NO可能参与RIPer C的心脏保护。动物实验和临床研究结论:RIPer C和RIPost C组合不产生协同效应,RIPer C诱导了自噬,活化的自噬在远隔缺血时适应中对心肌起保护作用。升高的SDF-1a和NO可能参与RIPer C对STEMI患者的保护。

张金铃,田毅,荣培晶,方继良,王瑜,石力,贾术永,何勋,雷洪涛,孟宏^[6]（2018）在《针刺治疗慢性心肌缺血小型猪模型系列方法的可行性探讨》文中指出目的探讨埋针治疗手术放置Ameroid缩窄环于左前降支的小型猪慢性心肌缺血模型系列方法的可行性。方法在巴马小型猪左冠状动脉左前降支放置Ameroid缩窄环制备小型猪慢性心肌缺血模型,随机分为治疗组（针刺"内关"穴）和对照组（针刺"足三里"穴）,分别进行"内关"和"足三里"穴埋针并电针治疗,6周后取材。结果术后大体病理显示两组均出现缺血区域,针刺"足三里"穴缺血面积大于"内关"穴,心肌细胞超微结构显示两组均有线粒体空泡化、纤维化现象。结论针刺心包经"内关"穴可以通过减轻心肌缺血起到保护心肌的效应,但不能抑制已经存在的心肌缺血损伤。说明手术放置Ameroid缩窄环于冠脉左前降支建立大型实验动物猪慢性心肌缺血模型,并采用埋针进行治疗的方法是可行的。

陈民利,潘永明,陈亮,徐孝平,王德军,杨玉伟,陈方明,蔡月琴,徐剑钦,朱科燕^[7]（2017）在《小型猪慢性心肌缺血模型的建立与无创遥测技术的应用》文中研究指明为建立小型猪慢性心肌缺血模型和应用无创遥测技术的评价方法,本研究采用维生素D3和异丙肾上腺素复合高脂饮食的方法建立了小型猪慢性心肌缺血模型;并利用无创遥测技术对小型猪慢性心肌缺血模型的症状进行检测与评价,同时对五指山小型猪、巴马小型猪和西藏小型猪的运输应激和高脂诱导发生动脉粥样硬化（AS）的危险因素进行评估。建立了巴马小型猪慢性心肌缺血模型与评价技术规范,明确了无创遥测技术可用于心肌缺血模型的症状检测和评价,界定了小型猪运输应激后需4周以上的适应恢复期。并发现了高脂环境下五指山小型猪、巴马小型猪和西藏小型猪发生高血脂、高血压、高胰岛素血症等AS危险因素的不同特征,这为小型猪在心血管疾病研究中的选择和应用提供参考。

应陈艇,樊紫瑜,牛小龙^[8]（2016）在《小型猪慢性心力衰竭模型研究进展》文中提出慢性心力衰竭是一种复杂的心血管综合征,建立合适的慢性心力衰竭动物模型是研究慢性心力衰竭发病机制及相关药物治疗的关键。小型猪因其在病理生理、解剖结构等方面更接近人类,故建立小型猪慢性心力衰竭模型已成为研究热点。目前较成熟的小型猪慢性心力衰竭模型制备方法主要有心肌梗死型、前负荷过载型、后负荷过载型、药源型和心动过速型等。

杨少玲,唐克强,陶均佳,顾芳芳,郭清奎^[9]（2014）在《胸骨正中切口与左侧肋间切口开胸制备心肌梗死动物模型的比较》文中认为背景:许多治疗冠心病的研究依赖于心肌梗死动物模型的建立。探索创伤小、易操作、安全、存活时间长、存活率高的心肌梗死动物模型制作方法具有重要意义。目的:比较两种开胸结扎冠状动脉制作心肌梗死动物模型方法的优劣。方法:健康雄性新西兰大耳白兔30只,随机分为3组,每组10只。胸骨正中切口组、胸骨左缘切口组开胸后结扎冠状动脉前降支,假手术组不结扎冠状动脉。监测手术时间、术中出血量、术后进食量、进食恢复时间。术后24 h内测心肌酶学指标,术后4周检测超声心动图。结果与结论:胸骨正中切口组及胸骨旁切口组结扎冠状动脉后心电图检查均出现不同程度的ST段弓背样抬高。胸骨正中切口组造模成功率为70%、胸骨左缘切口组造模成功率为80%。两组术后24 h内心肌酶学指标升高,与术前相比差异有显着性意义（P<0.05）;术后4周左室射血分数、左室短轴缩短率降低,与术前相比差异有显着性意义（P<0.05）。与胸骨左缘切口组比较,胸骨正中切口组造模成功所需的手术时间少,术中出血量少,术后恢复进食时间短,术后进食量较多,差异均有显着性意义（P<0.05）,结果表明采用胸骨正中开胸法结扎冠状动脉更适合用于制作心肌梗死动物模型。

张波,陈保富,马德华,王益兵,叶敏华,夏利龙,陈宇,王斌,王铮,朱成楚^[10]（2014）在《经胸腔镜建立巴马小型猪慢性心肌缺血模型》文中研究表明目的本研究目的在于探索采用胸腔镜微创技术建立小型猪慢性心肌缺血模型。方法选用实验用巴马小型猪,采用胸腔镜技术,在左冠状动脉回旋支（left circumflex coronary artery）主干放置Ameroid缩窄环,术后第6周经选择性冠状动脉造影,了解冠脉狭窄程度及侧支循环形成并行心脏核素显像了解心肌缺血情况,以对胸腔镜下建立小型猪慢性心肌缺血模型进行评估。结果造模成功率80%（8/10）,手术时间45.3±7.1min,术中出血量32.5±11.3ml。术后第6周造影显示6头左回旋支完全闭塞,见侧支循环形成,2头狭窄程度大于70%。心肌灌注显像见左后下壁明显缺损。结论采用胸腔镜方式应用Ameroid缩窄环建立小型猪慢性心肌缺血模型技术微创、可行,模型均一、稳定,适用于慢性心肌缺血模型相关实验研究。

二、猪慢性心肌缺血模型的制作（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、猪慢性心肌缺血模型的制作（论文提纲范文）

（1）基于活血谱效相关的三七质量评价研究（论文提纲范文）

（2）基于ERK表达探讨针刺干预大型实验动物猪心肌缺血效应的初步观察（论文提纲范文）

（3）急慢性心肌缺血动物模型造模方法研究简况（论文提纲范文）

（4）血管生成素-1对猪慢性缺血心肌中功能性新生血管增生的促进作用（论文提纲范文）

（5）远隔缺血适应对心肌缺血再灌注损伤的基础和临床研究（论文提纲范文）

（6）针刺治疗慢性心肌缺血小型猪模型系列方法的可行性探讨（论文提纲范文）

（7）小型猪慢性心肌缺血模型的建立与无创遥测技术的应用（论文提纲范文）

（8）小型猪慢性心力衰竭模型研究进展（论文提纲范文）

（9）胸骨正中切口与左侧肋间切口开胸制备心肌梗死动物模型的比较（论文提纲范文）

（10）经胸腔镜建立巴马小型猪慢性心肌缺血模型（论文提纲范文）

四、猪慢性心肌缺血模型的制作（论文参考文献）

• [1]基于活血谱效相关的三七质量评价研究[D]. 丁永胜. 北京中医药大学, 2020(04)
• [2]基于ERK表达探讨针刺干预大型实验动物猪心肌缺血效应的初步观察[J]. 张金铃,李亮,荣培晶,孟宏,田毅,何勋,贾术永,张今朝,李少源,赵斌,周晟芳,刘欢,孙铭鸿,张峰,雷洪涛,方继良. 世界科学技术-中医药现代化, 2019(05)
• [3]急慢性心肌缺血动物模型造模方法研究简况[J]. 张东,贾连群,杨关林,李阳,陈奋. 实用中医内科杂志, 2018(05)
• [4]血管生成素-1对猪慢性缺血心肌中功能性新生血管增生的促进作用[J]. 李伟,Winston Ng Shim,Eugene Kwangwei Sim. 复旦学报(医学版), 2018(03)
• [5]远隔缺血适应对心肌缺血再灌注损伤的基础和临床研究[D]. 曹邦明. 苏州大学, 2018(01)
• [6]针刺治疗慢性心肌缺血小型猪模型系列方法的可行性探讨[J]. 张金铃,田毅,荣培晶,方继良,王瑜,石力,贾术永,何勋,雷洪涛,孟宏. 中国比较医学杂志, 2018(01)
• [7]小型猪慢性心肌缺血模型的建立与无创遥测技术的应用[J]. 陈民利,潘永明,陈亮,徐孝平,王德军,杨玉伟,陈方明,蔡月琴,徐剑钦,朱科燕. 中国比较医学杂志, 2017(05)
• [8]小型猪慢性心力衰竭模型研究进展[J]. 应陈艇,樊紫瑜,牛小龙. 医学研究与教育, 2016(05)
• [9]胸骨正中切口与左侧肋间切口开胸制备心肌梗死动物模型的比较[J]. 杨少玲,唐克强,陶均佳,顾芳芳,郭清奎. 中国组织工程研究, 2014(49)
• [10]经胸腔镜建立巴马小型猪慢性心肌缺血模型[J]. 张波,陈保富,马德华,王益兵,叶敏华,夏利龙,陈宇,王斌,王铮,朱成楚. 医学研究杂志, 2014(07)

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